Oxidative stress and changes in the content and pattern of tissue expression of ß-catenin protein in diversion colitis

OBJECTIVE: The aim of this study is to verify if oxidative stress is related to changes in content and pattern of β-catenin protein expression in an experimental model of diversion colitis. METHODS: Sixty Wistar rats were submitted to intestinal bypass. The animals were divided into three groups according to the sacrifice to take place in six, 12 and 18 weeks. For each group, five animals only underwent laparotomy (control). The presence of colitis was diagnosed by histological study, and its severity, by inflammation grading scale. Cellular oxidative stress was measured by comet assay. Tissue expression of β-catenin protein was analyzed by the immunohistochemistry and quantification of its tissue content by computerized morphometry. Statistical analysis was performed with the Student's t-test, median, Mann-Whitney, ANOVA and Kruskal-Wallis, adopting a significance level of 5% (p <0.05). RESULTS: Colon segments without fecal stream developed colitis, which worsened with time of exclusion. Segments without fecal stream suffer higher levels of oxidative stress when compared to those with stream, and it worsens with time of exclusion. The levels of cellular oxidative stress are directly related to the degree of inflammation. The total content of ß-catenin in segments without fecal stream reduces after six weeks, and does not vary thereafter. The content of β-catenin in the apical portion of the colon crypts decreases with time, whereas in the basal region, it increases. The total content of ß-catenin is inversely related to the degree of inflammation and levels of tissue oxidative stress levels. CONCLUSION: There are changes in tissue content of E-cadherin and increased expression of ß-catenin in proliferative regions of colonic crypts, related with oxidative tissue stress. (AU)

OBJETIVO: O objetivo do presente estudo é avaliar a relação entre estresse oxidativo e conteúdo tecidual de β-catenina em modelo experimental de colite de exclusão. MÉTODOS: Sessenta ratos Wistar foram submetidos à derivação intestinal e divididos em três grupos experimentais segundo o sacrifício ser realizado em 6, 12 e 18 semanas. Para cada grupo, cinco animais foram submetidos apenas a laparotomia (controle). A colite foi diagnosticada por estudo histológico, enquanto sua intensidade por escala de graduação inflamatória. Os níveis de estresse oxidativo foram mensurados pelo ensaio cometa, enquanto a expressão e o conteúdo tecidual de ß-catenina por imunoistoquímica e morfometria computadorizada, respectivamente. Os resultados foram analisados pelos testes t de Student, Mann Whitney, ANOVA e Kruskal-Wallis, estabelecendo-se nível de significância de 5% (p<0,05). RESULTADOS: Nos segmentos sem trânsito fecal ocorre desenvolvimento de colite que piora com o tempo de exclusão. Segmentos sem trânsito sofrem maiores níveis de estresse oxidativo quando comparados àqueles com trânsito, piorando com o tempo de exclusão. Os níveis de estresse oxidativo encontram-se diretamente relacionados a piora da inflamação. O conteúdo total de ß-catenina no cólon sem trânsito reduz após seis semanas de exclusão. O conteúdo de ß-catenina no ápice das criptas cólicas diminui com o tempo, enquanto na região basal, aumenta. O conteúdo total da β-catenina encontra-se inversamente relacionado ao grau de inflamação e aos níveis de estresse oxidativo. CONCLUSÃO: Existe redução no conteúdo de ß-catenina, principalmente no ápice das glândulas cólicas e aumento nas regiões basais, relacionadas à piora do estresse oxidativo. (AU)

Diminuição da expressão imuno-histoquímica de moléculasde adesão em carcinomas escamosos de mucosa oral / Reduction of immunohistochemical expression of adhesion molecules in squamous carcinoma of oral mucosa

Objetivos: Comparar a expressão imuno-histoquímica da E-caderina e da Beta-catenina de lesões escamosaspré-neoplásicas e neoplásicas de mucosa oral de amostras emblocadas em parafina. Materiais e métodos:Foram selecionadas 15 amostras de mucosa oral de pacientes apresentando hiperplasia com ou sem displasialeve (grupo 1); 5 amostras apresentando displasia moderada, acentuada ou carcinoma in situ (grupo 2); e12 amostras apresentando carcinoma de células escamosas invasor (grupo 3). Essas amostras foram submetidasà técnica de imuno-histoquímica com anticorpos primários monoclonais anti-E-caderina e anti-Betacatenina.A leitura em microscopia óptica compreendeu a expressão tecidual desses marcadores no epitélioescamoso das amostras de mucosa oral – lesadas ou não. A expressão imuno-histoquímica dessas moléculasde adesão foi classificada, segundo a sua intensidade de marcação tecidual, em negativa, positiva fraca epositiva forte. Resultados: A expressão de E-caderina foi forte em 93,3% dos casos do grupo 1 (hiperplasia/displasia leve), e 100% dos casos demonstraram forte expressão para a Beta-catenina nesse mesmo grupo. Contudo, no grupo 3 (carcinoma de célula escamosa), somente 42% dos casos foram fortemente positivospara E-caderina e 25% deles para Beta-catenina. Conclusões: A E-caderina e a Beta-catenina diminuíram asua expressão segundo a progressão tumoral do carcinoma de mucosa oral, reforçando um dos mecanismosrelacionados com a sua carcinogênese.

Objectives: To compare the immunohistochemical expression of E-cadherin and Beta-catenin in squamous pre-malignant and malignant lesions of formalin fixed paraffin embedded buccal mucosa samples. Materials e methods: Selected 15 samples of buccal mucosa of patients with hyperplasia with or without mild dysplasia (group 1), 5 samples showing moderate dysplasia, severe or carcinoma in situ (group 2) and 12 samples presenting invasive squamous cell carcinoma (group 3). These samples were subjected to immunohistochemistry with anti-E-cadherin and anti-Beta-catenin monoclonal antibodies. The expression of these markers in tissue samples injured or not were analyzed in accordance of positivity that was observed in epithelium stratum. The immunohistochemical expression of these adhesion molecules was classified according to their intensity in negative, weak positive and strong positive. Results: The expression of E-cadherin was strong at 93.3% of patients in group 1, and 100% of the cases showed strong expression of Beta-catenin in the same group. However, in group 3, only 42% of cases were strongly positive for E-cadherin and 25% of them to Beta-catenin. Conclusions: The E-cadherin and Beta-catenin decreased their expression according to tumor progression, from hiperplasia/mild dysplasia lesion to buccal invasive carcinoma and this fact may be related of the carcinogenesis mechanisms.