ABSTRACT
To investigate the kdr (knockdown resistance) resistance-associated gene mutation and determine its frequency in pyrethroid-resistant horn fly (Haematobia irritans) populations, a total of 1,804 horn flies of 37 different populations from all Brazilian regions (North, Northeast, Central-West, Southeast, and South) were molecular screened through polymerase chain reaction (PCR). The kdr gene was not detected in 87.08 percent of the flies. However, the gene was amplified in 12.92 percent of the flies, of which 11.70 percent were resistant heterozygous and 1.22 percent were resistant homozygous. Deviation from Hardy-Weinberg equilibrium (HWE) was found only in 1 ranch with an excess of heterozygous. When populations were grouped by region, three metapopulations showed significant deviations of HWE (Central-West population, South population and Southeast population). This indicates that populations are isolated one from another and kdr occurrence seems to be an independent effect probably reflecting the insecticide strategy used by each ranch. Although resistance to pyrethroids is disseminated throughout Brazil, only 48 percent of resistant populations had kdr flies, and the frequency of kdr individuals in each of these resistant populations was quite low. But this study shows that, with the apparent exception of the Northeast region, the kdr mechanism associated with pyrethroid resistance occurs all over Brazil.
Com o objetivo de verificar a ocorrência e determinar a frequência da mutação kdr (knock down resistance) em populações de Haematobia irritans (mosca-dos-chifres) resistentes aos piretróides, foram analisados 1.804 indivíduos de 37 populações de todas as Regiões do Brasil. Com exceção da Região Nordeste, o kdr (knock down resistance gene) foi encontrado em populações de todas as regiões. A mutação não foi detectada em 87,08 por cento dos indivíduos. Entretanto, o gene foi amplificado de 12,92 por cento das moscas, das quais 11,70 por cento se mostraram heterozigotas resistentes e 1,22 por cento homozigotas resistentes. Em todas as populações verificou-se equilíbrio de acordo com a Lei de Hardy e Weinberg, exceto uma com excesso de heterozigotos. Entretanto, quando agrupamos diferentes populações numa metapopulação de acordo com a região geográfica, é possível observar um desvio nas populações Centro-Oeste, Sul e Sudeste, indicando isolamento populacional e que a ocorrência do kdr é provavelmente um efeito independente, talvez refletindo a estratégia de uso do inseticida de cada produtor. Apesar da resistência aos piretróides estar disseminada por todo o país, apenas 48 por cento das populações resistentes apresentaram o kdr, e a frequência de indivíduos kdr nas populações resistentes se mostrou bastante baixa. À exceção da Região Nordeste, o mecanismo de resistência ligado ao kdr ocorre em todo o país.
Subject(s)
Animals , Mutation , Muscidae/genetics , Pyrethrins , Brazil , Insecticide Resistance/geneticsABSTRACT
Blood-sucking flies are important parasites in animal production systems, especially regarding confinement conditions. Haematobia irritans, the horn fly, is one of the most troublesome species within bovine production systems, due to the intense stress imposed to the animals. H. irritans is one of the parasites of cattle that cause significant economic losses in many parts of the world, including South America. In the present work, Brazilian, Colombian and Dominican Republic populations of this species were studied by Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) to assess basically genetic variability between populations. Fifteen different decamer random primers were employed in the genomic DNA amplification, yielding 196 fragments in the three H. irritans populations. Among H. irritans samples, that from Colombia produced the smallest numbers of polymorphic bands. This high genetic homogeneity may be ascribed to its geographic origin, which causes high isolation, low gene flow, unlike the other American populations, from Brazil and Dominican Republic. Molecular marker fragments, which its produced exclusive bands, detected in every sample enabled the population origin to be characterized, but they are also potentially useful for further approaches such as the putative origin of Brazilian, Colombian and Dominican Republic populations of horn fly from South America. Similarity indices produced by chemo metric analysis showed the closest relationships between flies from Brazil and Dominican Republic, while flies from Colombia showed the greatest genotypic differentiation relative to the others populations.
Moscas hematófagas são importantes parasitas em sistemas de produção animal, especialmente em condições confinamento. Haematobia irritans, a mosca-dos-chifres, é uma das espécies que mais causam problemas em sistemas de produção de bovinos, devido ao intenso estresse que impõe aos animais. H. irritans é um dos parasitas de bovinos que determinam as maiores perdas econômicas, as quais são significativas em muitas partes do mundo, incluindo a América do Sul. No presente trabalho, populações desta espécie provenientes do Brasil, Colômbia e República Dominicana foram estudadas através da análise do DNA polimórfico amplificado ao acaso (RAPD) para avaliar basicamente a variabilidade genética entre as populações. Quinze diferentes iniciadores decamétricos aleatórios foram utilizados na amplificação do DNA genômico, produzindo 196 fragmentos nas três populações de H. irritans. Entre as amostras de H. irritans, a população proveniente da Colômbia foi a que produziu o menor número de bandas polimórficas. Esta alta genética homogeneidade pode ser atribuída à sua origem geográfica, provocada pelo grande isolamento e o baixo fluxo gênico, ao contrário das outras populações americanas, Brasil e República Dominicana. Fragmentos marcadores moleculares, que produzem bandas exclusivas, foram detectados em cada amostra, o que permitiu caracterizar a origem das populações, mas tais marcadores também são potencialmente úteis para outras abordagens, tais como a provável origem das populações brasileiras, colombianas e dominicanas na América do Sul. Índices de semelhança produzidos por análise quimiométrica revelaram uma relação mais estreita entre moscas do Brasil e da República Dominicana, enquanto que as moscas da Colômbia apresentaram a maior diferenciação genotípica em relação às outras populações.
Subject(s)
Animals , Genetic Variation , Muscidae/genetics , Random Amplified Polymorphic DNA Technique , Brazil , Colombia , Dominican Republic , GenotypeABSTRACT
Blood-sucking diptera are important parasites in bovine production systems, especially regarding confinement conditions. Haematobia irritans, the horn fly, is one of the most troublesome species within bovine production systems, due to the intense stress imposed to the animals. An important aspect while studying the variability within a species is the study of the geographic structure of its populations and, attempting to find out the genetic flow of Brazilian populations of horn fly, the RAPD technique, which is suited for this purpose, has been used. The use of molecular markers generated from RAPD made it possible to identify the geographic origin of samples from different Brazilian geographic regions, as well as to estimate the genotypic flow among the different Brazilian populations of the horn fly.
Dípteras hematófagos são importantes parasitas dentro de sistemas de produção de bovinos, especialmente em confinamento. Haematobia irritans, a mosca-dos-chifres, é uma das espécies que maiores problemas causa em sistemas de produção de bovinos, dado ao intenso estresse que impõe aos animais. Um importante aspecto quando se estuda a variabilidade genética dentro das espécies é o estudo da estrutura geográfica destas populações. Buscando-se estimar a similaridade genotípica das diferentes populações brasileiras da mosca do chifre utilizou-se a técnica do DNA polimórfico amplificado ao acaso (RAPD-PCR), que mostrou-se eficiente para tal propósito. A utilização dos marcadores moleculares gerados através da técnica de RAPD-PCR tornou possível a identificação da origem geográfica das amostras das diferentes regiões geográficas brasileiras, assim como, estimar o fluxo genotípico entre as diferentes populações brasileiras da mosca-dos-chifres.
Subject(s)
Genetic Variation , Muscidae/genetics , Random Amplified Polymorphic DNA Technique/methodsABSTRACT
OBJECTIVE@#To deduce the region that the geographical species of Lucilia sericata come from and determine the scene of crime (SOC) based on the gene analysis of mtDNA CO II.@*METHODS@#A 635 bp region for CO II of 4 Lucilia sericata (belong to 2 geographical species) were collected and sequenced, compared with the data of GenBank. A neighbour-joining tree with the Tamura and Nei model was constructed by MEGA2.1 package. The number of inherit intervals of inner-species were analyzes by Kimura's two-parameter model and used for construction the relationships between hereditary and latitude interval by SPSS10.5 soft.@*RESULTS@#It showed that they had the relationships between inherit and latitude interval for the 8 geographical species of Lucilia sericata for CO II.@*CONCLUSION@#This method can be the evidence deducing the region that the geographical species of Lucilia sericata come from and further to determine the scene of crime (SOC).
Subject(s)
Animals , DNA, Mitochondrial/genetics , Electron Transport Complex IV/genetics , Forensic Medicine/methods , Genetics, Population , Geography , Muscidae/genetics , Phylogeny , Polymerase Chain Reaction/methods , Species Specificity , WeatherABSTRACT
Data on the genus Ophyra and on its known neotropical species are presented as well as a key to segregate them.