Incidence of sperm-tail tyrosine phosphorylation and hyperactivated motility in normozoospermic and asthenozoospermic human sperm samples

Our objective was to study the incidence of sperm-tail phosphotyrosine immunoreactivity in normozoospermic and asthenozoospermic human sperm samples, its association with sperm motion parameters, particularly hyperactivated motility, and its potential involvement in the pathogenesis of asthenozoospermia. The work was conducted as a prospective experimental study in the Sperm Biology and Andrology laboratories of the Jones Institute, a medical school-based fertility center. The study subjects were healthy fertile male donors (normozoospermic samples) and infertile patients (asthenozoospermic samples) attending the center. Recently ejaculated semen samples were washed twice to eliminate seminal plasma and a swim-up was performed to select the motile population which, in turn, was incubated up to 18 h at 37 degrees C in 3.5% human serum albumin-supplemented Ham's F10 to allow for capacitation. For evaluation, sperm aliquots were taken pre-swim-up (T0), immediately post swim-up (T1), at 6 h (T6), and 18 h (T18) of incubation. The main outcome measures were computer-analyzed sperm motion parameters and hyperactivated motility, and immunodetection of phosphotyrosine (PY)-containing proteins. During the capacitating incubation, normozoospermic samples displayed maximum motility, velocity, and hyperactivation at T6, significantly decreasing their values at T18. PY-proteins were located both at the tail and head of spermatozoa. Their expression increased progressively during the incubation, being present in about 70% of the sperm tails at T18. Asthenozoospermic samples showed an inability to respond to capacitation with an increase in motion parameters and PY-phosphorylation. At T6, both hyperactivation and PY-phosphorylation were significantly lower than in normal samples. Our results suggest that PY-phosphorylation of tail proteins is highly conspicuous in human spermatozoa, and increases its incidence in a time-dependent manner, as more sperm become capacitated. Asthenozoospermic samples displaying low percentages of motile sperm and altered motion characteristics showed a decreased incidence of PY-phosphorelated sperm. Tail protein PY-phosphorylation may be related to sperm movement, especially to hyperactivated motility and its deficiency may be associated to asthenozoospermia.

Puntaje embrionario promedio: un nuevo criterio para la evaluación morfológica de embriones en un programa de fertilización in vitro / Average embryo score: a new criterion for the evaluation of embryos in a in vitro fertilization program

En 1992, Steer y cols. (Hum Reprod 1992; 7:117-9) propusieron el "Puntaje Embrionario Acumulado" (PEA), criterio de evaluación embrionaria que asigna un puntaje a cada embrión (PE), igual a su calidad por su número de células, y a cada transferencia (PEA), igual a la suma de los PE de los embriones transferidos. Concluyeron que un valor de PEA elevado aumenta la chance de embarazo independientemente del número de embriones transferidos, pese a que sus valores de PEA aumentaban con éste. En base a esta observación, en este trabajo se propone un nuevo criterio, el puntaje embrionario promedio (PEP), para añadir al PEA la variable número de embriones (N) como denominador. Objetivo: Evaluar el valor pronóstico, en un programa de FIV, del criterio PEP propuesto, y compararlo con el del PEA y con el de la combinación descriptiva de la calidad embrionaria y el número de células. Materiales y Metodos: Se estudiaron retrospectivamente ciclos de FIV-TE en los que se transfirieron de 2 a 6 embriones entre las 41 y 50 horas post-inseminación. Se analizaron los criterios: CGDE (calidad embrionaria y número de células), PEA y PEP (para PEP=PEA/N). En cada criterio se utilizaron curvas ROC en base a implantación y embarazo clínico para determinar valores umbrales de predicción que delimitaron grupos de prónosticos bueno (+) y malo (-). Se usó el coeficiente r de Pearson para evaluar la correlación de los criterios con el número de embriones transferidos. Resultados: En los 122 ciclos estudiados se obtuvieron 35 embarazos (28.59 por ciento), implantando un total de 45 embriones de los 473 transferidos (9.51 por ciento). Los valores de correlación con el número de embriones transferidos fueron de 0.13 para PEP, 0.61 para CGDE y 0.79 para PEA (p<0.001). Los umbrales de predicción determinados para los criterios fueron de: PEP=11, PEA=34 y CGDE=2 embriones de clase III o IV y 4 o más células. Los tres criterios encontraron diferencias significativas (p<0.001) entre los grupos de prónostico (+) y (-) para las tasas de embarazo clínico e implantación: PEP (+): 38.3 por ciento y 12.3 por ciento, PEP(-): 9.8 por ciento y 2.9 por ciento; PEA(+): 38.4 por ciento y 11.2 por ciento, PEA(-): 5.6 por ciento y 2.3 por ciento; CGDE (+): 38.8 por ciento y 11.7 por ciento y CGDE (-): 9.5 por ciento y 3.3 por ciento...