The interaction between Histoplasma capsulatum cell wall carbohydrates and host components: relevance in the immunomodulatory role of histoplasmosis

Histoplasma capsulatum is an intracellular fungal pathogen that causes respiratory and systemic disease by proliferating within phagocytic cells. The binding of H. capsulatum to phagocytes may be mediated by the pathogen's cell wall carbohydrates, glucans, which consist of glucose homo and hetero-polymers and whose glycosydic linkage types differ between the yeast and mycelial phases. The ±-1,3-glucan is considered relevant for H. capsulatum virulence, whereas the ²-1,3-glucan is antigenic and participates in the modulation of the host immune response. H. capsulatum cell wall components with lectin-like activity seem to interact with the host cell surface, while host membrane lectin-like receptors can recognize a particular fungal carbohydrate ligand. This review emphasizes the relevance of the main H. capsulatum and host carbohydrate-driven interactions that allow for binding and internalization of the fungal cell into phagocytes and its subsequent avoidance of intracellular elimination.

Efectos de la desoxirribonucleasa I sobre células del melanoma murino B16-F10 / Effects of deoxyribonuclease I on murine melanoma B16-F10 cells

Introducción: La importancia de las nucleasas en la regulación del crecimiento celular (a través de la apoptosis) hace relevante investigar su utilidad para controlar el crecimiento tumoral.Objetivo: Valorar el efecto que una desoxirribo-nucleasa tuvo sobre células del melanoma murino B16-F10. Material y métodos: Las células fueron incubadas a diferentes tiempos y concentraciones de la DNasa, después de lo cual se evaluó su viabilidad, crecimiento y daño al DNA.Resultados: Se encontró que la viabilidad y actividad mitocondrial medida por medio de la técnica de exclusión con azul de tripán o, bien, por el colorante MTT no mostró ningún cambio significativo, sin embargo, la capacidad de crecimiento celular (número total de células) sí se vio modificada de una manera dosis dependiente. Con respecto del daño al DNA, nuestros resultados indican un efecto a las 24 horas de incubación de la nucleasa con las células, bandas de 400 y 200pb se encontraron en el corrimiento electroforético.Conclusión: la DNasa utilizada en este trabajo no tuvo ningún efecto significativo sobre la viabilidad, pero sí en el crecimiento celular, así como sobre la estructura del DNA por un mecanismo aún no determinado.

Efectos biológicos en células HEp-2, en la multiplicación del adenovirus tipo 6 y en la concentración de interferón en plasma humano en presencia de un RNA de transferencia fúngico / Biological effects in HEp-2 cells, adenovirus type 6 and interferon concentration in human plasma in the presence of a fungal transfer RNA

Introducción: Trabajos previos mostraron la capacidad antiviral in vitro, así como la utilidad como inductor de interferón natural (IFN-n) in vivo de un RNA de transferencia (tRNA) de origen fúngico, por este motivo se sigue estudiando esta molécula como una alternativa para el tratamiento antiviral. Objetivos: Estudiar el efecto del tRNA fúngico en la viabilidad, síntesis de DNA y en la multiplicación del adenovirus tipo 6 (AV-6) en células HEp-2, comparado su efecto con el producido por el polyl:polyC o por IFN-Ó. Valorar su capacidad como unductor a largo plazo de la síntesis de IFN-n in vivo. Material y métodos: Células HEp-2 se incubaron con diferentes concentraciones de las moléculas mencionadas durante 24 horas, y se determinó la viabilidad y la síntesis de DNA celular; adicionalmente cultivos tratados en las mismas condiciones se infectaron con 200 unidades formadoras de placas (ufp) del AV-6, se incubaron cinco días adicionales, y se valoró el grado de protección. In vivo a siete voluntarios clínicamente sanos se les administró intramuscularmente una dosis única de 100 mg del tRNA, y se determinó mediante la técnica de inhibición del efecto citopático (ECP) el nivel sérico de IFN-n, cinco días después de la inoculación. Resultados. El tRNA protegió a las células HEp-2 contra la infección por AV-6, mejor que el polyl:polyC y de forma similar al IFN-Ó. Ninguna de las tres sustancias afectó significativamente la viabilidad celular. En cambio, la síntesis de DNA sí disminuyó de manera directa en relación con la concentración de los inductores, no así con el IFN-Ó. En los plasmas de los sujetos tratados con el tRNA fúngico se encontró un aumento en la concentración de IFN-n (de 84.2 ñ 107.6 a 171.42 ñ 129.5 UI/mL) a los cinco días, aunque la diferencia no fue estadísticamente significativa. Conclusión. El tRNA fúngico mostró actividad antiviral contra el AV-6, no afectó la viabilidad pero sí la síntesis celular de DNA, y con una capacidad de mantener elevada hasta por cinco días la concentración plasmática de IFN-n en humanos

Los inductores de la síntesis de interferón endógeno ¿una posible opción terapéutica? / Endogenous interferon synthesis inducers. A possible therapeutic option?

La linfocina conocida como interferón (IFN) existe en tres tipos principales (-Ó, -ß y -ç), cada uno de ellos con diferente capacidad como agente antiviral, antitumoral o como inmunomodulador, esta características motivaron su aplicción exógena desde su descubrimiento como terapia para el tratamiento de diversos padecimientos, esto sin embargo, trajo consigo severos efectos colaterales del IFN exógeno, y de estimular la síntesis endógena en el organismo para aprovechar sus propiedades en la eliminación de alguna enfermedad (viral, tumoral, etc.), se han probado una enorme cantidad de compuestos, tanto de origen natural como sintético (inductores), lamentablemente hasta el momento no se ha encontrado al inductor idóneo, debido principalmente a factores, como: el tipo y grado de la infección o proceso tumoral, población estudiada, toxicidad de la molécula, etc., por estos motivos son necesarios la realización de un mayor número de trabajos para encontrar al mejor inductor, capaz de utilizarse con fines terapéuticos y que además muestre un mínimo de efectos secundarios al paciente al cual se aplique. En el presente trabajo se revisan algunos estudios que hablan de la utilidad, así como de los efectos secundarios de los inductores de la síntesis de IFN como el polyA:polyU, el PolyI:polyC, PolyI:polyC12U, Ridostine, Bropirimine y de un ARNt de orgien fúngico utilizados en el tratamiento de procesos infecciosos y tumorales

Incremento en la concentración de IFN-ç y TNF-Ó en el plasma de sujetos sanos a los que se administró un RNAt de origen fúngico. Reporte preliminar / Increase in the concentrations of IFN-ç and TNF-Ó in the plasm of healthy subjects treated with fungal tRNA. Preliminary report

Antecedentes: Es importante el uso con fines terapéuticos de inmunomoduladores que funcionen como inductores de la sintesis de interferón natural (IFN-n), principalmente si se considera el costo y toxicidad del interferón recombinante. En este trabajo, se estudia el efecto que la aplicación de uno de estos inductores, el ácido ribonucleico de transferencia (RNAt), tuvo sobre los niveles séricos del interferón gamma (IFN-ç) y del factor de necrosis tumoral alfa (TNF-Ó). Objetivos: Determinar la concentración del INF-ç y el TNF-Ó en el plasma de sujetos a quienes se les aplicó un RNAt de origen fúngico como inductor de la síntesis de IFN-n. Material y Métodos: A nueve voluntarios sanos se les administró por vía IM 200 mg del RNAt, y se valoró en plasma de sangre venosa antes y dos horas después de la apliación del RNAt, la concentración del IFN-ç y del TNF-Ó por la técnica de ELISA. Resultados: Se observó que los niveles de IFN-ç y del TNF-Ó se incrementaron de 267.83 ñ 208.03 a 2230 ñ 2088.73 pg/mL, y de 48.92 ñ 88.07 a 261.65 ñ 80.61 pg/mL respectivamante (Prom. ñ D.S, p < 0.05), a las dos horas de la administración de RNAt. Conclusión: Con la administración del RNAt se observa una tendencia de incremento en la concentración de IFN-ç y del TNF-Ó, en el plasma de sujetos normales

Indución a la producción de interferón endógeno en humanos e inhibición de la replicación in vitro de adenovirus tipo 6, virus herpes simple tipo 1 y virus sincitial respiratorio utilizando un ARN de transferencia / Induction of endogenous interferon production in humans and inhibition of the in vitro replication of type 6 adenovirus, type I herpes simplex virus, and respiratory syncytial virus using a transfer RNA

El interferón (IFN) es una linfocina con actividad inmunomoduladora, antitumoral y antiviral; por esta razón en numerosos laboratorios se trabaja intensamente en la búsqueda de nuevas moléculas capaces de inducir su producción de manera natural en el organismo humano, y de este modo utilizarlas contra diferentes padecimientos (virales y tumorales). Con este fin, en el presente trabajo se evaluó la capacidad de un ARN de transferencia (ARNt) de origen fúngico, como agente inductor de la síntesis de interferón tanto in vivo como in vitro. Para ésto, se aplicaron por vía intramuscular 200 mg del inductor a siete sujetos clínicamente sanos; a cada uno de ellos se les tomó dos muestras de sangre para obtener el plasmo, una antes de la aplicación del ARNt y otra 2 horas después. A las muestras de plasma se les determinó el nivel de interferón mediante la técnica de inhibición del efecto citopático utilizando el virus de la estomatitis vesicular. Los niveles de interferón en los plasmas variaron de 10 a 320 unidades internacionales (UI) por mL, antes de la aplicación y de 80 a 1,280 UI/mL 2 horas después de la misma, al realizar el análisis estadístico las diferencias encontradas fueron significativas. Para valorar la capacidad del ARNt en la protección contra las infecciones virales in vitro, se incubaron células Vero con diferentes concentraciones del ARNt durante 24 h, posteriormente se infectaron con adenovirus tipo 6 (AV-6), virus de herpes simple tipo 1 (VHS-1) o virus sincitial respiratorio (VSR), los cultivos se incubaron cinco días adicionales y se cuantificó el efecto del inductor sobre la multiplicación viral. Los cultivos incubados previamente con el ARNt de origen fúngico, e infectados posteriormente con uno de los virus mencionados, presentaron menor daño citopático que los cultivos usados como controles virales; dicha reducción del efecto citopático fue dependiente de la dosis. Los resultados indican que el ARNt utilizado es capaz de estimular la síntesis de IFN in vivo e in vitro, lo cual abre la posibilidad de utilizarlo en el tratamiento de las infecciones virales, sólo en el tratamiento de las infecciones virales, sólo o en combinación con antivirales ya conocidos

Disminución de la viabilidad y capacidad de proliferación en líneas celulares de origen tumoral, por efecto de una desoxirribonucleasa / Decrease in vibility and proliferation ability of tumor cell lines by effect of a deoxyribonuclease

La desoxirribonucleasa (DNasa I) es una nucleasa, capaz de intervenir en la degradación y reparación de los ácidos nucleicos. También participa en la eliminación de células dañadas, envejecidas o neoplásicas activando los sistemas relacionados con la muerte celular programada (MCP). El fracaso para eliminar a las células neoplásicas por medio de la MCP, es debido entre otras cosas, a la disminución en la concentración o actividad de las nucleasas en este tipo de células, favoreciendo del desarrollo de la masa tumoral. En este estudio, se valoró la viabilidad y capacidad de proliferación de las siguientes líneas tumorales: CaLu-1, SK-MES-1, HeLa, HEp-2, L-929; y en las siguientes células normales: mononucleares totales de sangre periférica (MNTSP) de pacientes sin cáncer y en los fibroblastos fetales MRC-5. La DNasa I se dosificó sobre el cultivo celular a las siguientes concentraciones: 0.75, 1.5, 3.0, 6.0, y 9.0 µg/mL. Los resultados mostraron una correlación de dosis respuesta en la viabilidad y proliferación, con una pérdida en la viabilidad cercana al 100 por ciento para HeLa y HEp-2, y del 50 por ciento aproximadamente en CalU-1, SK-MES-1 y L-929, comparadas con MNTSP y fibroblastos MRC-5, que redujeron de un 10 a 14 por ciento sus valores a la cocentración más alta de DNasa I; en los resultados obtenidos al medir la proliferación celular, la tendencia fue similar en las líneas celulares a las concentraciones más altas de la nucleasa. Al valorar viabilidad y proliferación célular, se obtuvieron diferencias estadísticamente significativas (p < 0.05); al comparar los resultados obtenidos de células normales y líneas célulares de origen tumoral. La importancia de la DNasa I, como parte de un control fisiológico natural de la proliferación celular, como lo es la MCP, y los resultados obtenidos en este trabajo, nos permiten sugerir su posible utilización complementaria a la terapéutica tradicional en el tratamiento del cáncer