Evaluación genotóxica del extracto oleoso de la semilla de Carapa guianensis Aublet en el ensayo de aberraciones cromosómicas en ratones Balb/c / Genotoxic assessment of the Carapa guianensis Aublet seed oil extract in the chromosomal aberrations assay performed in Balb/c mice

Introducción: el extracto oleoso de la semilla de Carapa guianensis Aublet ha tenido diversos usos biomédicos. Recientemente fue evaluado este extracto, el cual manifestó grandes potencialidades como antioxidante en ensayos in vivo; pero poco se conoce de su efecto sobre el ADN en biomodelos experimentales. Objetivo: evaluar el potencial genotóxico del extracto oleoso de la semilla de Carapa guianensis en el ensayo de aberraciones cromosómicas de células de la médula ósea de ratones Balb/c. Métodos: se formaron cinco grupos experimentales: un grupo placebo (Tween 65 al 2 por ciento), tres tratados con niveles de dosis del extracto (400, 1 000 y 2 000 mg/kg), administrados por vía oral durante 14 días; por último, un grupo control positivo tratado con ciclofosfamida, en dosis de 50 mg/kg por vía intraperitoneal 48 y 24 h antes de la eutanasia. Se administraron cinco animales/sexo/grupo. Después de los 14 días de administración se les efectuó la eutanasia por dislocación cervical y se les extrajo la médula ósea del fémur para proceder a realizar la técnica citogenética de aberraciones cromosómicas. Resultados: los resultados entre controles y tratados con el extracto no difirieron para los dos sexos en las variables índice mitótico, Gaps, células con poliploidías, número de células con aberraciones cromosómicas y cromatídicas y el porcentaje de células con aberraciones. Sin embargo, sí difirieron controles y tratados contra el grupo tratado con ciclofosfamida, lo que valida nuestros resultados. Conclusiones: el extracto oleoso de la semilla de la Carapa guianensis no posee potencialidades genotóxicas en la formación de aberraciones cromosómicas, sobre todo estructurales en células de la médula ósea de ratones Balb/c de ambos sexos(AU)

Introduction: the oil extract from Carapa guianensis seed has various biomedical applications. It was recently evaluated and revealed great potentialities as antioxidant in in vivo assays, but little is known about its effect on DNA in experimental biomodels. Objective: to evaluate the genotoxic potential of the oil extract from Carapa guianensis seed in the chromosomal aberration of the bone marrow cells test performed in Balb/c mice. Methods: five experimental groups were created: one placebo group (Tween 65, 2 percent), three treated with different extract doses (400, 1000 and 2000 mg/kg) orally administered for 14 days and one positive control group treated with cyclophosphamide at a dose of 50 mg/kg intraperitoneally at 48 and 24 h before euthanasia. Five animals per sex from each group were administered the set dose. After 14 days of treatment, the animals were euthanized through cervical dislocation and their femoral bone marrow was taken out to perform the cytogenetic chromosomal aberration technique. Results: the results between the control group and the groups treated with the extract did not differ between the two sexes in terms of the mitotic index variables, Gaps, polyploidy cells, number of cells with chromosome and chromatic aberrations and the percentage of aberration cells. However, the results of controls and of treated groups were different from those of the group treated with cyclophosphamide, which proved the validation of our results. Conclusions: the oil extract from Carapa guianensis seeds does not have genotoxic potential for the formation of chromosome aberrations, mainly structural, in Balb/c mice bone marrow of both sexes(AU)

Comparación entre dos biomodelos murinos (ratones Balb/c y ratas Sprague Dawley) en el ensayo de micronúcleos transplacentarios / Comparison between two murine biomodles (Balb/c mice and Sprague Dawley rats) in a transplacental micronucleus assay

Objetivo: comparar fetos de ratones Balb/c y ratas Sprague Dawley como biomodelos en el ensayo de micronúcleos transplacentarios, determinando la frecuencia espontánea e inducida, y vincular el efecto genotóxico y reproductivo. Métodos: se formaron tres grupos experimentales/especie: control negativo (simulacro), control solvente NaCl (0,9 %) y ciclofosfamida 50 mg/kg. Todos los grupos se administraron por vía intraperitoneal los días 14, 15 y 16 de la gestación, y 24 h después de la última inoculación en ratones y 48 h en ratas se procedió a realizar la eutanasia de las gestantes, para obtener las muestras de hígado fetal. Resultados: los fetos de ratas Sprague Dawley demostraron tener menores índices de citotoxicidad y de genotoxicidad, y se obtuvieron los resultados más bajos de micronúcleos endógenos. Los mejores resultados de inducción de citotoxicidad y genotoxicidad por la alta formación de micronúcleos con ciclofosfamida fueron en fetos de ratas Sprague Dawley, los que resultaron más susceptibles al daño genotóxico de este mutágeno. Se corroboró el poder clastogénico transplacentario de la ciclofosfamida, vinculando este ensayo de genotoxicidad a toxicología de la reproducción. Conclusiones: los resultados sugieren el mejor uso de fetos de ratas Sprague Dawley como biomodelo en este ensayo cuando es utilizada la ciclofosfamida como control positivo por la vía y dosis estudiada; además, se pudieran utilizar en la evaluación de nuevas drogas con carácter antigenotóxico por vía transplacentaria.

Objectives: to compare fetuses from Balb/c mice and Sprague Dawley rats as biomodels in transplacental micronuclei assay and to determine the spontaneous and induced frequency to link the genotoxic and reproductive effect. Methods: three experimental groups by species were formed: a negative control (simulation), NaCl (0.9 %) solvent control and 50 mg/kg cyclophosphamide. All the groups were intraperitoneally administered at 14th, 15th and 16th days of gestation, and 24 h after the last inoculation in mice and 48 h in rats, it proceeded to perform euthanasia in the pregnant animals to obtain the fetal liver samples. Results: the fetuses from Sprague Dawley exhibited smaller cytotoxicity and genotoxicity indexes, and the lowest endogenous micronucleus results. The best results of the cytotoxicity and genotoxicity induction for the high micronucleus formation with cyclophosphamide were found in Sprague Dawley rat fetuses, being more susceptible to the genotoxic damage by this mutagen. The clastogenic transplacental power of cyclophosphamide was confirmed whereas this genotoxicity assay was linked to reproduction toxicology. Conclusions: these results suggest that the Sprague Dawley rats fetuses could be better used as biomodels in this assay when cyclophosphamide is employed as positive control through the way of administration and the studied dosage. It could be similarly used in the evaluation of new antigenotoxic drugs with antigenotoxic effect through transplacental administration.

Comparación en la frecuencia espontánea e inducida de aberraciones cromosómicas en médula ósea de ratones OF-1 y C57BL/6/cenp / Comparison between induced and spontaneous chromosomal aberrations in OF-1 and C57BL/6/cenp bone marrow mice

El ensayo citogenético in vivo es un ensayo de mutagenicidad a corto plazo de gran sensibilidad, útil para detectar fundamentalmente aberraciones cromosómicas estructurales in vivo. El objetivo del trabajo consistió en determinar el biomodelo experimental más eficiente en este ensayo mediante la comparación de la frecuencia espontánea e inducida de aberraciones cromosómicas en células de la médula ósea, en uno y otro sexos de 2 líneas de ratones (OF-1 y C-57BL/6/cenp). Se formaron 4 grupos experimentales, uno control negativo, dos tratados durante 14 días con sustancias vehículos por vía oral, NaCl (0,9 por ciento) y tween 65 (2 por ciento), y uno control positivo tratado a las 48 y 24 h antes del sacrificio con ciclofosfamida (50 mg/kg) por vía intraperitoneal. La línea de ratones OF-1 resultó tener una frecuencia espontánea más baja en las variables analizadas que la C-57BL/6/cenp, obteniéndose un menor número espontáneo de células totales con aberraciones y mayor sensibilidad a la ciclofosfamida que la línea C-57BL/6/cenp. Se concluye que los ratones OF-1 y C-57BL/6/cenp, constituyen buenos modelos a emplear en los estudios genotoxicológicos, dada la baja frecuencia espontánea de aberraciones cromosómicas estructurales y numéricas analizadas aunque se recomienda el uso de la línea OF-1

The in vivo cytogenetics array is a very sensible short term mutagenesis method useful to detect mainly the in vivo the structural chromosomal aberrations. The aim of present paper was to determine the more effective experimental bio-model in this type of model to compare the spontaneous and induced frequency of the above mentioned aberrations in bone marrow cells in both sexes of two mice species (OF-1 and C-57BL/6/cenp). Four experimental groups were designed, one of negative control, twotreated during 14 days using oral vehicle substancesm NaCI (0.9 percent) and tween 65 (2 percent) and one of positive control treated at 48 and 24 h before sacrifice using cyclophosphamide (50 mg/kg) by intraperitoneal route. The OF-1 mice species had the lowest spontaneous frequency in variables analyzed that the C-57BL6/cenp species, achieving a lower spontaneous number of total cells with aberrations and a great sensitivity to cyclophosphamide than the C-57BL/6/cenp species. We conclude that the OF-1 and C-57BL/6/cenp mices were good models to be used in genotoxicological studies due to the low spontaneous frequency of the above mentioned aberrations and the numerical ones analyzed, thus it is recommended the use of OF-1 species

Efectos del D-003, mezcla de àcidos alifáticos en el ensayo de aberraciones cromosómicas in vivo / Effects of D-003, a mixture of aliphatic acids in a trial of in vivo chromosomal aberrations

El D-003 es una mezcla de àcidos alifàticos primarios de alto peso molecular purificada de la cera de caña de azúcar, cuyo componente principal es el àcido octacosanoico, con efectos antiosteoporóticos, hipolipemiantes y antioxidantes. El objetivo de este trabajo fue determinar si el tratamiento oral con D-003 durante 14 días induce aberraciones cromosómicas in vivo en médula ósea de ratones. Se formaron 5 grupos experimentales (5 ratones/grupo/sexo): un grupo control solvente, tres tratados con D-003 (500, 1 000 y 2 000 mg/kg) y un control positivo tratado con ciclofosfamida (50 mg/kg, ip), 24 h antes del sacrificio. El D-003 no aumentó la frecuencia de aparición de aberraciones (estructurales o numéricas) ni modificó el índice mitótico con respecto a los controles negativos, mientras que la ciclofosfamida, como era esperado sí aumentó ambas frecuencias. En conclusión, el D-003 no presentó potencial genotóxico ni citotóxico sobre las células de la médula ósea de ratones NMRI.

The D-003 is a mixture of high-molecular weight primary aliphatic acids purified from the sugar cane wax, whose main component is the octacosanic acid with antiosteoporotic, hypolipidemic and antioxidant effects. The aim of present paper was to determine if the oral treatment with D-003 for 14 days induces in vivo chromosomal aberrations in bone marrow of mice. Animals were randomized into 5 groups (5 mice/group/sex): one solvent control group, 3 D-003- treated with Ciclophosphamide (50 mg/kg), intraperitoneal route) 24 hours before sacrifice. D-003 neither increase the frequency of aberrations appearance (Structural or numerical) nor modified the mitotic index with regard to negative controls, whereas the cyclophosphamide increase both frequencies as expected. In conclusion, the D-003 has neither genotoxic potential nor cytotoxic on the bone marrow cells of NMRI mice.

Evaluación genotóxica del D-004, extracto del fruto de Roystonea regia, mediante el ensayo de micronúcleos / Genotoxic assessment of D-004, extract from Roystonea regia fruit, by means of micronuclei assays

El D-004 es un extracto lipídico del fruto de la palma real (Roystonea regia), que ha demostrado ser eficaz en prevenir la hiperplasia prostßtica inducida por testosterona y por fenilefrina en modelos experimentales en ratas. El objetivo fue determinar si el D-004 induce cambios en la frecuencia de aparición de micronúcleos al realizar la administración oral a dosis repetida durante 8 semanas. Se formaron 5 grupos experimentales (7 animales/grupo): un grupo control solvente, tres tratados con D-004 (500, 1 000 y 1 500 mg/kg) y un control positivo tratado con ciclofosfamida. No ocurrieron muertes ni se detectaron signos clínicos de toxicidad. No hubo diferencias significativas entre controles y tratados en cuanto a la frecuencia de eritrocitos policromatófilos micronucleados y el índice de citotoxicidad. En conclusión, el D-004 administrado por vía oral a las dosis empleadas no presenta actividad clastogénica ni citotóxica en médula ósea de ratones OF-1 machos in vivo.

D-004 is a lipid extract from the real palm fruit (Roystonea regia), which has demonstrated that is effective to prevent prostatic hyperplasia from testosterone and from phenylephrine in rats' experimental models. Aim of this paper was to determine if D-004 provoke changes in appearance frequency of micronuclei during oral administration of repeated doses for 8 weeks. Five experimental groups were created (7animals/group): a solvent control-group, three treated with D-004(500, 1 000, and 1 500 mg/kg), and a positive control-group treated with cyclophosphamide. There were no deaths or clinical signs of toxicity neither significant differences among controls and treated ones as regards the frequency of micronucleated polychromatophils erythrocytes, and the cytotoxic index. In conclusion, D-004 administered per os at doses used has neither clastogenic nor cytotoxic activity in bone marrow male OF-1mice in vivo.