Toxoplasma gondii genotyping from free-range chickens (Gallus gallus domesticus) in a rural area of Rio Grande do Sul, Brazil / [Genotipagem de Toxoplasma gondii em galinhas domésticas em uma área rural do Rio Grande do Sul, Brasil]

Free-range chickens may ingest oocysts of T. gondii present in the environment and consequently harbor virulent strains of this parasite in different tissues, without any clinical signs. Isolation of T. gondii through bioassays on mice and cats from naturally infected chicken tissues has been described in several countries, demonstrating the importance of free-range chickens in the transmission of this parasite. The aim of this study was the genotypic characterization of T. gondii isolates obtained from naturally infected free-range chickens in a rural area of the state of Rio Grande do Sul, Brazil. Brain and heart tissue from 12 chickens seropositive for T. gondii were processed using peptic digestion technique for parasite isolation. From 12 samples subjected to mouse bioassay, nine isolates were obtained. RFLP-PCR genotypic characterization was performed using 11 genetic markers: SAG1, 5'-3'SAG2, alt.SAG2, SAG3, BTUB, GRA6, c22-8, c29-2, L358, PK1 and Apico. Genetic characterization of the isolates revealed the presence of five atypical genotypes according to ToxoDB (# 11, # 55, # 64, # 140 and # 163). Our results showed a wide genetic diversity of T. gondii in free-range chickens in this region.(AU)

Galinhas criadas ao ar livre podem ingerir oocistos de T. gondii presentes no ambiente e, com isso, albergar cepas virulentas desse parasita em diferentes tecidos, sem sinais clínicos. O isolamento de T. gondii por meio de bioensaios em camundongos e gatos, a partir de tecidos de galinhas naturalmente infectadas, tem sido descrito em vários países. Isso demonstra a importância das galinhas caipiras na epidemiologia desse parasita. O objetivo deste trabalho foi caracterizar genotipicamente isolados de T. gondii obtidos de galinhas caipiras naturalmente infectadas em uma área rural do município de Santa Maria, estado do Rio Grande do Sul, Brasil. Fragmentos de cérebro e de coração, de 12 galinhas soropositivas para T. gondii, foram processados pela técnica de digestão péptica para isolamento do parasita. Das 12 amostras submetidas a bioensaio com camundongos, nove isolados foram obtidos. A caracterização genotípica por RFLP-PCR foi realizada utilizando-se 11 marcadores genéticos: SAG1, 5'-3'SAG2, alt.SAG2, SAG3, BTUB, GRA6, c22-8, c29-2, L358, PK1 e Apico e revelou a presença de cinco genótipos atípicos de acordo com o ToxoDB (# 11, # 55, # 64, # 140 e # 163). Os resultados mostraram uma ampla diversidade genética de T. gondii em galinhas caipiras nessa região.(AU)

Genotyping of Toxoplasma gondii isolates from naturally infected Gallus domesticus in Santa Catarina state, Brazil / Genotipagem de Toxoplasma gondii isolados de Gallus domesticus naturalmente infectados no estado de Santa Catarina, Brasil

Toxoplasmosis is a widespread zoonosis that can infect warm-blooded animals including birds and humans, and chickens are considered to be indicators of environmental contamination. In Brazil, Toxoplasma gondii has a non-clonal population structure composed of three lineages (I, II, and III), presenting high recombination, and resulting in wide genetic diversity. This study aimed to genetically characterize T. gondii isolates from naturally infected chickens (Gallus domesticus) in Santa Catarina state, southern Brazil region. Sera from 133 free-range chickens were analyzed by an immunofluorescence assay (IFA) to detect IgG antibodies against T. gondii. Brain and heart from 30 positive animals, based on IFA (≥ 1:64), were used to isolate the parasite using a mouse bioassay. Strain genotyping was performed by PCR-RFLP using 12 genetic markers (SAG1, 5´-3´SAG2, alt. SAG2, SAG3, BTUB, GRA6, c22-8, c29-2, L358, PK1, Apico, and CS3). The results were classified according to the genotypes based on the ToxoDB (http://toxodb.org/toxo/). Of 133 chicken sera analyzed, 84 (63.16%) were positive, with antibody titers ranging from 16 to 1024. Eleven isolates were obtained from mouse bioassay (Ck3, Ck32, Ck35, Ck56, Ck63, Ck89, Ck102, Ck103, Ck125, Ck127, and Ck128). Genotyping revealed six genotypes; three were classified as #26, #53, and #120, and three (NEO1, NEO2, and NEO3) were had not been previously described. No clonal lineages of type I, II, or III were identified. The present study confirms the high genetic diversity of T. gondii in Brazil.(AU)

A toxoplasmose é uma zoonose de ampla distribuição, que acomete animais homeotérmicos, incluindo as aves e o ser humano. Galinhas podem ser consideradas indicadoras de contaminação ambiental. No Brasil, Toxoplasma gondii não apresenta estrutura populacional clonal (I, II e III), ocorrendo alta frequência de recombinação, o que resulta na grande diversidade genética observada. O presente trabalho teve como objetivo caracterizar geneticamente T. gondii de galinhas (Gallus domesticus) naturalmente infectadas do estado de Santa Catarina. Soros de 133 aves criadas extensivamente foram analisados pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI) para detecção de anticorpos IgG contra T. gondii. Para o isolamento do parasito (bioensaio em camundongos), foram utilizados coração e cérebro de 30 aves que apresentaram títulos maiores que 64 na RIFI. Os isolados obtidos foram submetidos à caracterização genotípica por meio da RFLP-PCR utilizando 12 marcadores genéticos (SAG1, 5'-3'SAG2, alt.SAG2, SAG3, BTUB, GRA6, c22-8, c29-2, L358, PK1, Apico e CS3). Os resultados obtidos foram classificados de acordo com os genótipos presentes no ToxoDB (http://toxodb.org/toxo/). Das 133 amostras de soros de galinha analisadas, 84 (63,16%) foram positivas, com títulos de anticorpos variando de 16 a 1024. No bioensaio, foram obtidos 11 isolados (Ck 3, Ck 32, Ck 35, Ck 56, Ck 63, Ck 89, Ck 102, Ck 103, Ck 125, Ck127 e Ck 128). A análise genotípica revelou a presença de seis genótipos, três dos quais classificados como #26, #53 e #120, e três, NEO1, NEO2 e NEO3, não descritos anteriormente. Nenhuma linhagem clonal I, II ou III foi encontrada. O presente trabalho confirma a ampla diversidade genética do parasito observada no Brasil.(AU)