Cytokeratin expression in corneal dystrophies / Expressão de citoqueratinas em distrofias corneanas

PURPOSE: To identify an immunohistochemical pattern of epithelial markers in granular, lattice and Avellino corneal dystrophies. METHODS: Twenty-two corneal buttons, diagnosed as lattice (17), Avellino (4) and granular (1) underwent immunohistochemical studies of cytokeratins (CKs) on pa- raffin-embedded sections (group I). Monoclonal antibodies for pan-CK (AE1/AE3) and CKs 3/12, 5/6, 8, 18 and 19 were used. Twenty-two normal corneas were used as the control (group II). RESULTS: Six lattice and 2 Avellino cases of group I stained positively with anti-CK 3/12 in corneal epithelium and areas of corneal stroma deposits. One of these cases of lattice was positive for anti-pan-CK (AE1/AE3) also in the epithelium and areas of corneal stroma deposits with a similar pattern. None of the controls (group II) revealed any staining in corneal stroma. All disease and control cases (groups I and II) revealed positive staining in corneal epithelium. CONCLUSION: AE1/AE3 and CK 3/12 anti-CK positive markers in the stromal deposits of lattice and Avellino dystrophies may suggest an epithelial genesis of the disease.

OBJETIVO: Investigar a expressão de citoqueratinas (CKs) em córneas com distrofias corneanas tipo granular, lattice e Avellino. MÉTODOS: Vinte e dois botões corneanos com diagnóstico anatomopatológico de distrofia estromal tipo lattice (17), Avellino (4) e granular (1) foram submetidos à avaliação imunohistoquímica nos tecidos inclusos em parafina (grupo I). Anticorpos monoclonais para pan-CK (AE1/AE3) e CKs de números 3/12, 5/6, 8, 18 e 19 foram utilizados. Vinte e dois botões corneanos normais foram usados como controle (grupo II). RESULTADOS: Oito casos do grupo I (seis lattice e dois Avellino) apresentaram reações imuno-histoquímicas positivas com anti-CK 3/12, tanto no epitélio como nos depósitos estromais e um destes casos (lattice) também se mostrou positivo para anti-pan-CK (AE1/AE3) com o mesmo padrão de reação. Nenhum caso do grupo II mostrou reação imuno-histoquímica positiva no estroma corneano. Na avaliação imuno-histoquímica dos grupos I e II, o epitélio apresentou uma reação positiva com o anticorpo anti-pan-CK (AE1/AE3) e com o anti-CK 3/12. CONCLUSÃO: O fato da pan-CK e CK 3/12 apresentarem uma reação positiva nos depósitos das distrofias tipo lattice e Avellino sugere uma origem epitelial desses depósitos corneanos.

Use of CD25 as an immunohistochemical marker for acquired ocular toxoplasmosis / Uso do CD25 como um marcador imuno-histoquímico de toxoplasmose ocular adquirida

PURPOSE: Toxoplasmosis is the most common cause of posterior infectious uveitis worldwide. It is often impossible to determine its congenital or acquired nature. Interleukin-2 (IL-2) in peripheral blood has been described as a possible marker for acquired toxoplasmosis. The purpose of this study is to evaluate the histopathological characteristics of ocular toxoplasmosis cases using CD25 as a marker for the expression of interleukin-2. METHODS: Ten formalin-fixed, paraffin-embedded enucleated globes from ten immunocompetent patients with clinical diagnosis of toxoplasmosis were evaluated. Four patients had the acquired form of ocular toxoplasmosis (positive IgM) while six were IgM negative and IgG positive for toxoplasmosis. Histopathological slides were reviewed for the extension of the retinal necrosis, number of toxo cysts, the granulomatous inflammatory reaction, the presence of T and B cells within the choroid and the IL-2 expression. Immunohistochemistry using monoclonal antibodies was performed to observe the expression of CD4, CD8, CD20, CD25, and CD68. RESULTS: The histopathological evaluation disclosed no differences between acquired and the other ocular toxoplasmosis cases regarding the characteristics studied. However, CD25 showed a higher expression of IL-2 on the 4 acquired cases of ocular toxoplasmosis compared to the remainders. CONCLUSIONS: To the best of our knowledge, this is the first report showing that the use of CD25 as a marker for interleukin-2 could differentiate acquired ocular toxoplasmosis.

OBJETIVO: Toxoplasmose é a causa mais comum de uveíte posterior no mundo. Em grande parte dos casos, não é possível determinar se a doença ocular é devida a um quadro congênito ou adquirido. Interleucina-2 (IL-2) no sangue periférico foi descrita como um possível marcador de toxoplasmose adquirida. O objetivo deste estudo foi avaliar as características de casos de toxoplasmose usando CD25 como um marcador da expressão de interleucina-2. MÉTODOS: Dez olhos enucleados fixados com formalina e embebidos em parafina de dez pacientes imunocompetentes com diagnóstico clínico de toxoplasmose ocular foram examinados. Quatro pacientes tinham a forma adquirida (IgM positivo) enquanto 6 eram IgM negativo e IgG positivo para toxoplasmose. Cortes histopatológicos foram avaliados quanto a extensão de necrose retiniana, número de cistos de T. gondii, reação granulomatosa e presença de células B e T na coróide, bem como a expressão de interleucina-2. Estudo imuno-histoquímico utilizando anticorpos monoclonais foi realizado para determinar a expressão de CD4, CD8, CD20, CD25 e CD68. RESULTADOS: A avaliação histopatológica não mostrou diferenças entre os casos de toxoplasmose ocular com relação às características avaliadas mencionadas anteriormente. Entretanto, CD25 revelou maior expressão de interleucina-2 nos 4 casos adquiridos comparado com os demais. CONCLUSÕES: Expressão elevada de CD25 foi encontrada em todos os casos de toxoplasmose ocular adquirida. Assim, o uso de CD25 como marcador da interleucina-2 pode ser uma ferramenta útil para diferenciar toxoplasmose ocular congênita de adquirida.

Ocular toxoplasmosis: an update and review of the literature

Ocular toxoplasmosis is the most common cause of posterior uveitis worldwide. The infection can be acquired congenitally or postnatally and ocular lesions may present during or years after the acute infection occur. Current treatment controls ocular infection and inflammation, but does not prevent recurrences. We present a review and update on ocular toxoplasmosis and address misconceptions still found in the current medical literature.

Freeze-drying as an alternative method of human sclera preservation / Liofilização como alternativa à preservação de esclera humana

PURPOSE: To compare the effect of preserving sclera samples in either 95 percent ethanol or freeze-dried. METHODS: Ninety-six samples of human sclera were studied. Half of them were freeze-dried and half preserved in 95 percent ethanol. Preservation periods of 18, 45, 90 or 174 days were studied. Automated immunostaining was carried out in the Ventana BenchMarkR LT platform using collagen 1 and fibronectin antibodies. Histological staining was also performed with hematoxilin-eosin and Masson trichrome. Samples were classified according to the degree of collagen fiber parallelism (0-2), intensity of Masson staining (0-2), and the expression of both antibodies (0-3). Friedman and Wilcoxon tests were applied to compare preservation methods and p-values below 0.05 were considered to ensure statistical significance. RESULTS: Relevant results were found in three situations: (i) Friedman's test showed better collagen fiber integrity in the freeze-dried group rehydrated after 174-days as compared to the 90-day group; (ii) Wilcoxon's test showed better collagen fiber integrity in the freeze-dried group after 18 and 174 days as compared to the ethanol group; (iii) the freeze-dried group disclosed higher immunohistochemical expression for COL-1 antibody in the sclera samples rehydrated after 45, 90 and 174 days as compared to the ones rehydrated after 18 days. CONCLUSION: Histological and immunohistochemical analysis showed freeze-drying to be a superior method for sclera preservation as compared to 95 percent ethanol. This technique provides an easy method to manipulate tissue, with longer shelf life, and storage at room temperature.

OBJETIVO: Comparar dois métodos de preservação de esclera humana, liofilização e álcool 95 por cento, em diferentes períodos de tempo. MÉTODOS: Foram avaliados 96 fragmentos de seis escleras humanas. Metade das amostras foi submetida ao processo de liofilização e metade conservada em álcool 95 por cento. Dois fragmentos de cada grupo foram avaliados pelas colorações de hematoxilina-eosina e tricrômio de Masson e submetidos a técnica de imuno-histoquímica para os anticorpos fibronectina e colágeno 1, após 18, 45, 90 e 174 dias de preservação. Os espécimens foram classificados de acordo com o paralelismo (PF:0-2) e integridade (IF:0-1) das fibras de colágeno e expressão imuno-histoquímica para os anticorpos fibronectina (FIB:0-3) e colágeno 1 (COL-1:0-3). A análise estatística foi realizada por meio dos testes de Friedman e Wilcoxon e o valor de p menor que 0,05 foi considerado estatisticamente significante. RESULTADOS: Verificaram-se diferenças significantes em três situações: (i) maior integridade das fibras de colágeno das escleras liofilizadas após 174 dias quando comparado aos 90 dias; (ii) maior expressão imuno-histoquímica para o anticorpo COL-1 nas amostras de escleras liofilizadas após os 18 dias iniciais de preservação; (iii) maior integridade das fibras de colágeno das escleras liofilizadas após 18 e 174 dias quando comparado às escleras preservadas em álcool. CONCLUSÕES: A preservação de tecido escleral por liofilização mostrou-se técnica tão eficaz quanto a preservação em álcool, apresentado vantagem quando considerada a integridade das fibras de colágeno. A liofilização mostra-se benéfica por permitir a estocagem do tecido em temperatura ambiente e com prazo de validade estendido.

Pesquisa de células malignas circulantes em pacientes com melanoma maligno de coróide / Detection of circulating malignant cells in patients with uveal melanoma

OBJETIVO: Avaliar a possibilidade de identificação de células malignas circulantes nas amostras de sangue periférico de pacientes brasileiros com melanoma maligno de coróide enviadas para análise no exterior. MÉTODOS: Os marcadores melan-A e tirosinase foram usados para detectar a presença de células malignas circulantes, pela transcrição reversa seguida de reação em cadeia da polimerase e análise seqüencial de DNA (RT-nested-PCR), em seis pacientes com melanoma maligno de coróide, diagnosticados no Brasil. RESULTADOS: Cinco pacientes deste grupo (83,33 por cento) foram considerados positivos. A reação de RT-nested-PCR foi positiva para melan-A em quatro (66,7 por cento) e positiva para tirosinase em quatro (66,7 por cento) dos seis pacientes testados. Três (50 por cento) pacientes foram positivos para os dois marcadores. Um (16,7 por cento) paciente foi negativo para ambos marcadores. CONCLUSÃO: A pesquisa de células malignas circulantes usando RT-nested-PCR, foi positiva na maioria dos pacientes estudados. A qualidade das amostras de sangue periférico dos pacientes brasileiros foi mantida no material preservado mesmo após ter sido enviado ao exterior.

PURPOSE: The purpose of our study was to detect circulating malignant cells (CMCs) in oversea-shipped blood samples of patients with uveal melanoma diagnosed in Brazil. METHODOS: Melan-A and tyrosinase were the two markers used for the detection of CMCs, using reverse transcriptase nested polymerase chain reaction (RT-nested-PCR) in 6 patients with uveal melanoma. The expression of beta-actin and GAPDH were used to assess the quality of the material. RESULTS: Five patients (83.33 percent) tested positive for the presence of CMCs. The RT-nested-PCR was positive for melan-A in 4 patients (66.7 percent) and positive for tyrosinase in 4 (66.7 percent) of the 6 patients. Three (50 percent) patients were positive for both markers. One (16.7 percent) patient was negative for both markers. All negative controls were negative. CONCLUSION: The quality of the blood samples shipped overseas, from patients with uveal melanoma, was preserved. The detection of CMCs using RT-nested-PCR was positive in the majority of the patients.

Extração da catarata pela técnica de facoemulsificação em pacientes com uveíte / Cataract extraction using the phacoemulsification technique in patients with uveitis

OBJETIVO: Descrever os resultados da cirurgia de catarata pela técnica de facoemulsificação em pacientes com uveíte. MÉTODOS: Foi realizado estudo retrospectivo pela análise de prontuários de 189 pacientes (242 olhos) com uveíte que foram submetidos a cirurgia de catarata pela técnica de facoemulsificação no Setor de Uveítes e Imunologia Ocular do Royal Victoria Hospital, McGill University Health Centre, Montreal, Quebec, Canadá. Os dados foram coletados em fichas protocoladas com informações sobre sexo, idade, classificação da uveíte, descrição cirúrgica e exames pré e pós-operatórios. Os exames pré e pós-operatórios continham informações sobre a data do exame, a melhor acuidade visual corrigida, o exame biomicroscópico, a pressão intra-ocular, os procedimentos realizados e o tratamento em uso. RESULTADOS: A média de acompanhamento pós-operatório foi de 46,8 ± 31,2 meses. A média da acuidade visual pré-operatória encontrada foi de 20/100 e a média de acuidade visual pós-operatória encontrada foi de 20/40. Encontramos 145 olhos (59,5 por cento) com acuidade visual melhor ou igual a 20/40 e 26 olhos com piora da acuidade visual. A complicação per-operatória mais encontrada foi a ruptura de cápsula posterior com perda vítrea observada em 7 olhos (3 por cento do total de olhos). A recorrência da uveíte foi a complicação pós-operatória mais freqüente, sendo observada em 73 olhos (30,16 por cento). Outras complicações pós-operatórias observadas foram a atrofia iriana (28,51 por cento), hipertensão intra-ocular (28,09 por cento), membrana epirretiniana (26,44 por cento), opacidade de cápsula posterior (19 por cento), edema macular cistóide (13,63 por cento), hipotonia ocular (12,80 por cento), atrofia do disco óptico (8,67 por cento) e sinéquias posteriores (6,61 por cento). CONCLUSÕES: A cirurgia de catarata pela técnica de facoemulsificação é considerada segura e eficaz em pacientes com uveíte. Observamos um bom prognóstico visual no período...

PURPOSE: To report outcomes of cataract extraction by phacoemulsification in patients with uveitis. METHODS: We retrospectively reviewed the charts of 189 patients (242 eyes) with uveitis who underwent cataract extraction by phacoemulsification at the Uveitis and Ocular Immunology Unit of McGill University Health Centre, Montreal, Quebec, Canada. RESULTS: Average follow-up was 46 ± 31.2 months. Average preoperative visual acuity was 20/100 and average postoperative visual acuity was 20/40. Hundred and forty-six eyes (59.9 percent) attained visual acuity better than 20/40. Visual loss occurred in 26 eyes. The most common peroperative complication was posterior capsule rupture with vitreous loss seen in 7 eyes (3 percent). Recurrence of uveitis was the most common postoperative complication seen in 73 eyes (30.16 percent). Other postoperative complications included iris atrophy (28.51 percent), ocular hypertension (28.09 percent), epiretinal membrane (26.44 percent), posterior capsule opacification (19 percent), cystoid macular edema (13.63 percent), ocular hypotony (12.80 percent), optic disc atrophy (8.67 percent) and posterior synechiae (6.61 percent). CONCLUSIONS: Cataract extraction by phacoemulsification is safe in patients with uveitis. Successful visual results are observed in long-term follow-up despite the prevalence of recurrence of uveitis, posterior capsule opacification and macular abnormalities. To the best of our knowledge this is the largest series presented to date.

Subretinal neovascularization following ruptured retinal arterial macroaneurysm: case report

A 51-year-old black woman was referred to our Retina Clinic for evaluation of loss of vision in her left eye. She was previously diagnosed with a ruptured retinal arterial macroaneurism (RAM) in the same eye. The ophthalmoscopic examination of the affected eye disclosed a subretinal lesion with some hemorrhage and exudation in the same area previously diagnosed with ruptured RAM. Fluorescein angiography revealed a gradually hyperfluorescent net of vessels located in the subfoveal region, consistent with the diagnosis of subretinal neovascular membrane. In this paper we stress the possibility of subretinal neovascularization following a ruptured RAM, even as a rare event.

Paciente de 51 anos foi encaminhada ao Setor de Retina para avaliação de perda visual no olho esquerdo. A paciente apresentava o diagnóstico prévio de macroaneurisma arterial retiniano (MAR) rôto no referido olho. O exame oftalmológico revelou lesão sub-retiniana hemorrágica associada à exsudação na área previamente diagnosticada com MAR. A angiofluoresceinografia revelou hiperfluorescência gradual localizada na região subfoveal, consistente com o diagnóstico de membrana neovascular sub-retiniana (MNSR). Nosso artigo aponta para a possibilidade, embora rara, da formação de uma MNSR após MAR rôto.

Manifestaçöes oculares da Síndrome da Imunodeficiência Adquirida (AIDS) / Ocular manifestations of Immunodeficiency Syndrome

Os autores fazem uma revisäo da Síndrome da Imunodeficiência Adquirida em seus aspectos gerais. Focalizam as infecçöes oportunistas, relacionando-as com a contagem dos linfócitos T circulantes, e as afecçöes malignas associadas à doença. Chamam a atençäo para a evoluçäo e os aspectos clínicos para a menor incidência de manifestaçöes oculares

Drusas de nervo óptico associadas à membrana neovascular coroideana macular / Optic nerve drusen with macular choroidal neovascular membrane

Os autores relatam o caso de um paciente de 49 anos, sexo masculino, com baixa acuidade visual há 3 meses, em ambos os olhos. Apresentava ao exame ocular a rara associaçäo de drusas do nervo óptico com drusas moles e membrana neovascular coroideana macular. Säo analisados os resultados da campimetria manual e computadorizada, ecografia, angiografia fluoresceínica e videoangiografia com indocianina verde. Discute-se a associaçäo de drusas de nervo óptico com membrana neovascular sub-retiniana e as alternativas de tratamento

Contribuiçäo ao estudo das distrofias corneanas / Contribution to the study of corneal dystrophies

Foram analisados os prontuários e as córneas provenientes de 49 pacientes submetidos à ceratoplastia penetrante, com diagnóstico de distrofia, durante o período de 1982 a 1988. Destes casos, 16 pacientes (32,7%) eram do sexo masculino e 33 (67,3%) do sexo feminino. A idade média dos pacientes foi de 32 anos, variando de 7 a 76 anos. Entre as mulheres, a faixa etária compreendida entre 21 e 30 anos foi a que apresentou o maior número de casos. Em ordem decrescente as distrofias mais frequentes foram: Granular, Macular, Lattice, Fuchs, Reis-Buklers e Polimorfa Posterior

Queratose actínica: tumor epibulbar freqüente / Actinic keratosis: frequent epibulbar tumor

Três casos de queratose actínica säo apresentados como tumor epibulbar. Este tipo de lesäo pré-maligna é relativamente comum em países onde a populaçäo se expöe mais freqüentemente aos raios solares. Os diagnósticos diferenciais e o tratamento utilizado säo salientados

Queratoacantoma de pálpebra: estudo crítico do seu diagnóstico / Palpebral keratoacanthoma: critical study about its diagnosis

O queratoacantoma é uma lesäo benigna auto-resolutiva que se assemelha clínica e histologicamente ao carcinoma espino-celular. Foram revistas 42 lesöes de pápebra provenientes do registro Brasileiro de Patologia Ocular - Escola Paulista de Medicina, dos quais 30 (71,4%) eram carcinomas espino-celulares e 12 (28,6%) correspondiam a queratocantomas. As lesöes foram analisadas quanto a sexo, idade, raça e comparadas com o diagnóstico clínico. Os resultados mostraram imprecisäo do diagnóstico clínico, o que leva as lesöes neoplásicas de pálpebra, principalmente no caso do queratoacantoma, necessitarem de uma incisäo ampla pois podem se tratar de lesöes malignas

Cateterizaçäo experimental do canal de Schlemm / Experimental cateterization of the canal of Schlemm

Os autores demonstram técnica experimental de cateterizaçäo do canal de Schlemm com monofilamento de nylon 5-0 com documentaçäo anatomopatológica visando o treinamento de cirurgiöes e busca de aprimoramento das técnicas cirúrgicas no tratamento do glaucoma congênito

Transplante de córnea "a quente" em úlcera micótica: estudo clínico, microbiológico e histopatológico / Corneal transplantation a chaud in mycotic ulcer: clinical, microbiological and histopathological study

De uma amostra de 954 córneas recebidas no Registro Brasileiro de Patologia Ocular, durante um período de 6 anos (1982-1988), 63 córneas eram provenientes de 63 pacientes submetidos a ceratoplastia penetrante "a quente", decorrente de úlcera corneana micótica. O grupo mais acometido foi o dos homens 77,8%), na faixa etária entre 31 a 40 anos (28,6%). Nos 25 casos onde foi realizado o estudo clínico completo, a atividade profissional mais freqüente foi a de agricultor (44%), com antecedentes do transplante "a quente" foi obtido em 23 casos, e em 2 pacientes (8%) foi necessária a evisceraçäo devido a progressäo da infecçäo micótica. A acuidade visual obtida, em um seguimento médio de 11 meses, foi igual ou maior que 20/60 em 8 pacientes (32%), entre 20/200 e conta dedos em 6 (24%), percepçäo e projeçäo luminosa em 2(8%) e sem percepçäo luminosa em 4(76%). O agente etiológica mais freqüente, no estudo microbiológico realizado nos 63 casos, foi o Fusarium sp, responsável por 24 casos (38,1%). Nos 63% pacientes, o diagnóstico de ceratite micótica só foi possível em 24(38,1%) pelo exame histopatológico do botäo corneano, devido a exames microbiológicos negativos

Diagnóstico citopatológico do fluído vítreo / Cytopathologic diagnosis of vitreous fluid

Foram estudados 22 espécimes cítreos através de vitrectomia pars plana ou aspiraçäo vítrea provenientes de 22 pacientes com doença aguda ou crônica. A análise dos fluídos cítreos forneceu diagnóstico preciso em muitos casos. Endoftalmites agudas, crônica, granulomatosa e näo granulomatosa foram prontamente reconhecidas. Foram revelados agentes etiológicos como fungos e parasitas. O procedimento foi útil na indicaçäo de células fusiformes atípicas, características de melanoma e produtos de eritrócitos degenerados encontrados nas hemorragias antigas e glaucoma por células fantasmas, assim como fragmentos de cristalino em casos de trauma ocular. Achados etiológicos de membranas vítreas e perirretinianas de olhos com retinopatia diabética, proliferaçäo vítreo-retiniana e macular pucker também foram identificados. O estudo citopatológico do fluído vítreo mostrou-se importante por fornecer e confirmar diagnósticos em casos de neoplasias malignas e infecçöes específicas, demonstrar agentes etiológicos, sugerir prognóstico em melanoma, além de fornecer, ocasisonalmente, dados sugestivos e várias condiçöes patológicas, como glaucoma secundários e inflamaçöes intraoculares