Detection of Campylobacter spp. in chilled and frozen broiler carcasses comparing immunoassay, PCR and real time PCR methods / Detecção de Campylobacter spp. em carcaças de frango de corte resfriadas e congeladas pelos métodos imunoenzimático, PCR e PCR em tempo real

ABSTRACT: In order to detect and identify Campylobacter spp. in broiler chicken carcasses, and to compare detection methods, 43 chilled and 43 frozen carcasses were collected and analyzed. Three methodologies were evaluated: an automated Enzyme Linked Fluorescent Assay (ELFA) VIDAS®30, Polymerase Chain Reaction (PCR) and real-time PCR. Only four chilled carcasses (4.6%) were considered positive for Campylobacter spp. by VIDAS®30 and no sample was positive when the conventional PCR technique was used. However, real-time PCR showed a higher incidence of contamination by Campylobacter spp. in broiler carcasses, with 45 (52.3%) positive samples. C. jejuni was the species most frequently reported in the samples (88.8%). No differences in the frequencies of Campylobacter spp. were observed between the chilled and frozen broiler carcasses. In conclusion, real-time PCR was the most sensitive method for the detection of Campylobacter spp. in chilled or frozen broiler carcasses, which were mainly contaminated by C. jejuni.

RESUMO: Com o objetivo de detectar e identificar Campylobacter spp. em carcaças de frango de corte utilizando três metodologias distintas - ensaio imunoenzimático VIDAS®30, Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) e PCR em tempo real - foram coletadas e analisadas 43 carcaças de frango resfriadas e 43 congeladas. Quatro carcaças refrigeradas (4,6%) foram consideradas positivas para Campylobacter spp. pelo VIDAS®30 e nenhuma amostra positiva foi identificada quando utilizada a técnica de PCR. Porém, ao analisar as carcaças pela metodologia da PCR em tempo real, foi observada uma maior incidência de Campylobacter spp., com 45 amostras (52,3%) positivas, sendo que Campylobacter jejuni foi a espécie mais frequentemente encontrada nas amostras (88,8%). Não foi observada diferença na frequência do micro-organismo entre carcaças de frangos resfriadas e congeladas. Concluiu-se que a técnica de PCR em tempo real apresentou maior sensibilidade na detecção de Campylobacter spp. em carcaças de frangos de corte e que foi encontrada elevada presença de carcaças contaminadas, especialmente por C. jejuni.

Effects of the use of soybean oil and animal fat in the diet of laying hens on production performance and egg quality / Efeito do uso de oleo de soja e gordura animal na dieta de poedeiras sobre desempenho produtivo e qualidade do ovo

The effects of different dietary lipids on the fatty acid profiles of eggs produced by 20 and 54 wk old Dekalb laying hens were investigated. Laying hens were subjected to three defined treatments according to the source of lipid added to their diets: soybean oil, beef tallow, and a control diet (without the addition of oil). The experimental design was in a 3x2 factorial arrangement (three treatments and two different ages). The fatty acid composition of the yolks in the eggs produced by the laying hens was analyzed. The eggs produced by laying hens on the soybean oil diet had a large amount of polyunsaturated fatty acids (PUFA) omega-6 (n-6) and omega-3 (n-3) in their yolks (23.55, 2.30 percent respectively), whereas egg yolks from hens who were given beef tallow had higher percentages of monounsaturated fatty acids (47.53 percent) compared to soybean oil (47.53 percent) and the control diet (38.72 percent). The percentages of trans fats present in the egg yolks in all treatments were considered very low (0.91; 0,11; 0.05 percent). Young layers are more efficient at depositing n-3 fatty acids (1.40 percent), specially C22:6 (0.76 percent) with the best ratio n6:n-3 (13.97) compared to old layers (1.35; 0.72; 14.81 percent respectively). Based on these results, it was concluded that the amount of fatty acids present in the egg yolks can be modified by the sources of lipids included in the diet and that independent of the sources of lipid in the diet and the age of the chicken, egg yolks have insignificant amounts of trans fatty acids.

Foram avaliados os efeitos de diferentes dietas lipídicas na composição de ácidos graxos (AG) de ovos produzidos por poedeiras Dekalb de 20 e 54 semanas de idade. As poedeiras foram submetidas a três tratamentos definidos de acordo com a fonte lipídica adicionada nas rações: óleo de soja, sebo bovino e ração controle (sem adição de óleo). O delineamento experimental foi inteiramente casualizado em arranjo fatorial 3x2 (três tratamentos e duas idades das galinhas). Foram analisadas as composições em ácidos graxos das gemas dos ovos produzidos pelas poedeiras. O perfil de ácidos graxos das gemas dos ovos, produzidos pelas aves alimentadas com rações contendo óleo de soja, apresentaram na sua composição grande quantidade de ácidos graxos poliinsaturados (PUFA) ômega 6 (n-6) and Omega 3 (n-3) (23,55; 2,30 por cento respectivamente), enquanto as gemas dos ovos de poedeiras que receberam sebo bovino apresentaram maiores porcentagens de AG monoinsaturados (47,53 por cento) na sua composição, comparados com dieta contendo óleo de soja (47,53 por cento) e dieta controle (38,72 por cento). As porcentagens de gordura trans presente nas gemas dos ovos de todos os tratamentos foram consideradas muito baixas (0,91; 0,11; 0,05 por cento). Poedeiras novas são mais eficientes em depositar AG n-3 (1,40 por cento), especialmente C22:6 (0,76 por cento) na gema do ovo, com melhor razão n6:n:3 (13,97) comparado com poedeiras velhas (1,35; 0,72; 14,81 por cento respectivamente). Com base nesses resultados, foi concluído que a quantidade de ácidos graxos presentes na gema dos ovos podem ser modificadas de acordo com as fontes de lipídios oferecidas nas dietas e que, independente da adição de diferentes fontes lipídicas na ração e da idade das galinhas, as gemas dos ovos possuem quantidades insignificantes de gorduras trans.

Validation of spectrophotometric method to detect and quantify nitrite in ham pate / Validação de método espectrofotométrico para determinação de nitrito em patê de presunto

The objective of this work was to validate the spectrophotometric method to detect and quantify nitrite using ham pate as a source. The validated analytical conditions were 540 nm wavelength and the samples reading between 40 to 70 minutes after addition of coloring agents. The tested performance criteria were: linearity, matrix effect, selectivity, detection and quantification limit, accuracy, precision and robustness. As the results have obtained linearity in the studied zone (0.125 to 3 g/mL) and matrix effect was not observed, there was not any interference from ascorbic acid, but interference occurred from sodium eritorbate, in concentrations above 2.5 mg/100g. The detection limit was defined as 12.5 mg of nitrite/kg for pate and the quantification limit as 25 mg of nitrite/kg of pate. The method presented repeatability and reproducibility. The accuracy was assessed through recovery values varying from 84 to 110 percent. Respecting robustness, it was observed that the variations applied to the extraction procedure depended on the concentration of nitrite in the pate sample. In conclusion, the methodology was validated under the tested conditions.

O objetivo deste trabalho foi validar o método espectrofotométrico para determinação de nitrito usando como matriz patê de presunto. As condições analíticas usadas foram comprimento de onda de 540 nm e leitura das amostras entre 40 e 70 minutos após a adição dos reagentes complexantes. As características de desempenho testadas foram linearidade, efeito de matriz, seletividade, limite de detecção do equipamento e do método, limite de quantificação, exatidão, precisão e robustez. A linearidade foi obtida na faixa de trabalho estudada (0,125 a 3 μg de nitrito/mL) e não foi observado efeito de matriz. A concentração de ácido ascórbico na amostra não interferiu na análise e o eritorbato de sódio possuiu interferência negativa para concentrações acima de 2,5 mg/100g de amostra. O limite de detecção foi definido em 12,5 mg de nitrito/kg de patê e o limite de quantificação em 25 mg de nitrito/kg de amostra. O método apresentou repetitividade e reprodutibilidade intra-laboratorial. A exatidão foi avaliada através dos valores de recuperação que variaram entre 84 e 110 por cento. Na avaliação da robustez, as variações realizadas no procedimento de extração foram dependentes do nível de concentração existente na amostra. Concluiu-se que a metodologia pôde ser validada nas condições testadas.