Dípteros muscoides como veiculadores de bactérias resistentes aos antimicrobianos / Muscoid dipterans as carriers of antimicrobial resistant bacteria

Dípteros muscoides desempenham papel significante na disseminação de microrganismos. O principal objetivo deste estudo foi isolar bactérias resistentes aos antimicrobianos, a partir de dípteros muscoides, coletados em 5 pontos diferentes: no entorno e no lixo de um hospital municipal, na Zona Norte do Rio de Janeiro, assim como na Fiocruz e Quinta da Boa Vista, Rio de Janeiro. As moscas foram capturadas utilizando armadilhas de garrafa pet contendo isca atrativa, levadas ao Laboratório de Entomologioa Médica e Forense, IOC/Fiocruz, e identificadas utilizando chaves dicotômicas. Após esse procedimento foram maceradas em salina 0,85% estéril. Este extrato foi diluído e plaqueado em diferentes meios de cultura, contendo ou não antibiótico (ceftriaxona e polimixina, a 1 mg/L e 8 mg/L, respectivamente). Foram realizados o isolamento, a purificação das colônias e o teste de sensibilidade aos antimicrobianos (TSA) por disco difusão, utilizando os antibióticos cefepime, ceftazidima, cefoxitina, meropenem, gentamicina, tetraciclina e ciprofloxacina, cloranfenicol e trimetoprim-sulfametoxazol (Sensifar). Foram realizadas 16 coletas, e um total de 197 isolados bacterianos foram obtidos a partir dos 117 dipteros muscoides. Os isolados foram identificados por sequenciamento parcial do gene 16S rRNA e por MALDITOF-MS (Brucker). Do total, 46 isolados apresentaram perfil de não sensibilidade (perfil resistente e intermediário) a pelo menos dois antimicrobianos diferentes, enquanto dez isolados foram classificados como multirresistentes

Análise de cluster feita pelo programa Statistica revelou diferença significativa entre o Ponto 5 e os demais pontos, quanto ao número de isolados não sensíveis. Setenta e três amostras foram submetidas para detecção de genes de resistência aos ß-lactâmicos, aminoglicosídeos e colistina, através de PCR. Destas, apenas sete foram positivas. Três cepas de importância foram encontradas: Raoultella ornithinolytica positiva para o gene blaKPC-2, e para os principais elementos do transposon Tn4401, além dos grupos de incompatibilidade plasmideal IncK; Escherichia coli positiva para o gene blaNDM-1, Inc A/C, a partir da qual foram obtidas transconjugantes utilizando E. coli J53 como receptora e K. pneumoniae positiva para blaNDM-1 e grupo IncY. Todas as três cepas foram aac(6')-Ib e Int1 (integron de classe 1) 10 positivas. O sequenciamento total da cepa 23 (K. pneumoniae ST 3997 blaNDM-1 positiva) revelou a presença de diversos genes de resistências. A não hibridização com sonda específica e não obtenção de transconjugantes sugerem a presença cromossomal de blaNDM-1. Através da técnica de PFGE, analisamos o perfil genético dos isolados de origem clínica (urinocultura e hemocultura) e os isolados obtidos a partir de mosca, pertencentes à espécie K. pneumoniae, porém não foi detectado o mesmo clone nos dois ambientes. Nesse sentido, destaca-se a importância das moscas na disseminação (e reservatórios) de bactérias resistentes aos antimicrobianos. (AU)

Preliminary screening of the larvicidal effect of Brevibacillus laterosporus strains against the blowfly Chrysomya megacephala(Fabricius, 1794) (Diptera: Calliphoridae)

: This study evaluated whether different strains of Brevibacillus laterosporus could be used to control larvae of the blowfly Chrysomya megacephala , a pest that affects both human and animal health.

Bioprospecção de bactérias entomopatogênicas sobre o desenvolvimento pós-embrionßrio de Chrysomya megacephala (Fabricius, 1794) (Diptera: Calliphoridae), em laboratório / Bioprospecting entomopathogenic bacteria on the postembryonic development of chrysomya megacephala (fabricius, 1794) (diptera: calliphoridae) in laboratory

Chrysomya megacephala, conhecida como mosca-varejeira, tem importânciapara a saúde pública devido ao fato de os adultos serem potenciais vetores depatógenos entéricos, e causadores de miíase, tanto em humanos quanto emanimais. Além disso, trata-se de uma espécie exótica invasora. Os poucos estudosque abordam o controle de C. megacephala empregam os inseticidas químicos,como os piretroides e os organofosfatos e o uso de parasitoides e metabolitossecundßrios de plantas. Bactérias entomopatogênicas são uma alternativainteligente para a redução do uso de agroquímicos, pois possuem maior eficßcia,menor custo e benefícios ambientais, como segurança para os humanos e outrosorganismos não alvo. Nesse sentido, este trabalho avaliou a bioatividade deBrevibacillus laterosporus e Bacillus thuringiensis sobre o desenvolvimento pósembrionßriode Chrysomya megacephala. Foram testadas (bioensaios preliminares)15 cepas da espécie Brevibacillus laterosporus e 3 cepas de Bacillus thuringiensisvar. israelensis contra larvas de primeiro instar de C. megacephala. Anßlisesestatísticas indicaram maior atividade larvicida das cepas Bon 707, IGM 16-92 e Shi3 de B. laterosporus, causando mortalidade significativa e superior a 50%. Foramrealizados bioensaios completos analisando os efeitos letais (mortalidade larval,pupal e total) e subletais (período de desenvolvimento pós-embrionßrio em dias emédia de peso das larvas), das cepas Bon 707, Shi 3 e IGM 16-92. Suspensões deesporos das cepas Shi 3 e Bon 707 apresentaram taxas de mortalidade superiores.A anßlise por microscopia eletrônica de transmissão revelou alterações intestinaisdecorrentes da ingestão pelas larvas de esporos das cepas Bon 707 e IGM 16-92...

Chrysomya megacephala, known as a blowfly species, is important for publichealth due to the fact that adults are potential vectors of enteric pathogens, andcause myiasis, both in humans and in animals. Furthermore, it is an exotic invasivespecies. The few studies that address the control of C. megacephala employchemical insecticides, such as pyrethroids and organophosphates, the use ofparasitoids and secondary plant metabolites. Entomopathogenic bacteria are a smartalternative for reducing the use of pesticides because they have greater efficiency,lower cost and environmental benefits such as safety for humans and other nontargetorganisms. Therefore, this study evaluated the bioactivity of Brevibacilluslaterosporus and Bacillus thuringiensis strains on the post-embryonic developmentChrysomya megacephala. Fifteen strains of Brevibacillus laterosporus species and 3strains of Bacillus thuringiensis var. israelensis were tested (preliminary bioassays)against first instar larvae of C. megacephala. Statistical analysis indicated higherlarvicidal activity of the strains Bon 707, IGM 16-92 and Shi 3 of B. laterosporus,causing significant mortality, higher than 50%. Complete bioassays analyzing thelethal effects (larval, pupal and total mortality) and sublethal effects (period in days ofpost-embryonic development and mean weight of larvae) were performed with strainsBon 707, Shi 3 and IGM 16-92. Spore suspensions of strains Bon 707 and Shi 3presented higher mortality rates. Analysis by transmission electron microscopyrevealed intestinal alterations resulting from the intake of spores of Bon 707 and IGM16-92 strains by the larvae...