Molecular confirmation of twinning in the West Indian Manatee (Trichechus manatus) / Confirmação molecular de gemelaridade em peixes-boi marinho (Trichechus manatus)

Abstract: Few twinning events have been recorded in the West Indian manatee (Trichechus manatus, Sirenia: Trichechidae) and no previous published study has provided confirmation of this phenomenon based in molecular tools. Here we investigate a possible case of twinning in an endangered Brazilian population of T. manatus using molecular tools. We analyzed two male neonates found stranded in Ceará State, on the northeastern coast of Brazil. The DNA of both individuals was isolated, and 10 microsatellite loci were amplified and genotyped. Following the identification of the alleles, the probabilities of identity by descent (∆7 and ∆8) and relatedness (rxy) were calculated using estimators that evaluate inbreeding. The two individuals shared most of the alleles, with differences in the genotypes being identified in only two loci. All the estimators identified a level of relatedness compatible with that found between siblings (selfed or outbred), indicating they were dizygotic twins. This is the first confirmed case of fraternal twins in free-ranging West Indian manatees in South America. The recognition of this type of twinning provides elements to improve actions for the rehabilitation of stranded animals and their subsequent release to the environment.

Resumo: Poucos eventos de gemelaridade foram registrados para o peixe-boi marinho (Trichechus manatus, Sirenia: Trichechidae) e nenhum estudo previamente publicado confirmou esse fenômeno com base em ferramentas moleculares. Aqui investigamos um possível caso de gemelaridade em uma ameaçada população brasileira de T. manatus utilizando ferramentas moleculares. Foram analisados dois neonatos machos encontrados encalhados no Ceará, costa nordeste do Brasil. O DNA dos indivíduos foi isolado e 10 loci microsatélites foram amplificados e genotipados. Após a identificação dos alelos, as probabilidades de identidade por descendência (∆7 e ∆8) e relação (rxy) foram calculadas usando estimadores que avaliam endogamia. Os dois indivíduos partilharam a maioria dos alelos, com diferenças nos genótipos sendo identificadas em apenas dois loci. Todos os estimadores identificaram um nível de parentesco compatível com o encontrado entre irmãos (com e sem endogamia), o que aponta para o fato de serem gêmeos dizigóticos. Este é o primeiro caso confirmado de gêmeos fraternais em peixes-boi marinho de vida livre na América do Sul. O reconhecimento deste tipo de gemelaridade fornece elementos para aprimorar ações que visem a reabilitação de animais encalhados e sua posterior soltura ao ambiente.

Toxoplasma gondii in cetaceans of Brazil: a histopathological and immunohistochemical survey / Toxoplasma gondii em cetáceos do Brasil: estudo histopatológico e imuno-histoquímico

Abstract Toxoplasmosis is a parasitic disease caused by the protozoan Toxoplasma gondii. In cetaceans, T. gondii infection is a significant cause of morbidity and mortality. Despite the worldwide range and broad cetacean host record of T. gondii infection, there is limited information on toxoplasmosis in cetaceans from the Southern hemisphere. We investigated the occurrence of T. gondii by histopathology and immunohistochemistry in tissue samples of 185 animals comprising 20 different cetacean species from Brazil. Three out of 185 (1.6%) animals presented T. gondii-associated lesions: a captive killer whale Orcinus orca, a free-ranging common bottlenose dolphin Tursiops truncatus and a free-ranging Guiana dolphin Sotalia guianensis. The main lesions observed in these animals were necrotizing hepatitis, adrenalitis and lymphadenitis associated with protozoal cysts or extracellular tachyzoites presenting immunolabeling with anti-T. gondii antibodies. This study widens the spectrum of species and the geographic range of this agent in Brazil, and provides the first reports of T. gondii infection in a captive killer whale and in a free-ranging common bottlenose dolphin in South America.

Resumo Toxoplasmose é uma doença parasitária causada pelo protozoário Toxoplasma gondii. A infecção por T. gondii é uma causa significativa de morbidade e mortalidade, nos cetáceos. Apesar da abrangência mundial e amplo registro de espécies de cetáceos infectadas por T. gondii, informações sobre toxoplasmose em cetáceos do hemisfério sul são limitadas. Neste estudo pesquisou-se por meio de histopatologia e imuno-histoquímica a ocorrência de T. gondii em amostras de tecido de 185 animais, compreendendo 20 diferentes espécies de cetáceos que ocorrem no Brasil. Três dos 185 (1,6%) animais apresentaram lesões associadas a T. gondii: uma orca Orcinus orca mantida em cativeiro, um golfinho-nariz-de-garrafa Tursiops truncatus e um boto-cinza Sotalia guianensis de vida livre. As principais lesões observadas nesses animais foram hepatite, adrenalite e linfadenite necrotizantes associadas a cistos protozoários ou taquizoítos extracelulares, marcados com anticorpos anti-T. gondii. O presente estudo amplia o espectro de espécies susceptíveis a esse agente e o seu alcance geográfico no Brasil, fornecendo o primeiro relato da infecção por T. gondii em uma orca mantida em cativeiro e em um golfinho-nariz-de-garrafa de vida livre na América do Sul.

Desempenho e parâmetros séricos de ratos alimentados com dietas contendo soja integral crua / Performance and serum parameters of rats fed on diets containing raw full-fat soybeans

O trabalho objetivou avaliar o efeito da substituição da proteína da clara de ovo por proteína de soja crua na dieta de ratos em crescimento sobre o ganho de peso, consumo de ração, eficiência alimentar e parâmetros séricos (proteínas totais, albumina, aminotransferases, uréia, creatinina e amilase pancreática), visando estabelecer limites biologicamente seguros para inclusão de soja crua na dieta dos animais por períodos de curta duração. Foram utilizados 24 ratos divididos aleatoriamente em seis grupos de quatro animais e alimentados com dietas contendo cinco percentuais de substituição de proteína da clara de ovo por proteína de soja (0, 25, 50, 75 e 100%) e um grupo com dieta aprotéica. Os animais foram mantidos por 10 dias com fornecimento de água e alimento ad libitum. Os resultados obtidos revelaram que não houve diferença significativa no consumo entre os tratamentos testados. O ganho de peso e a eficiência alimentar observados no tratamento com 25% de substituição foram equivalentes aos obtidos com clara do ovo como única fonte de proteína. Albumina sérica, aminotransferases e creatinina não foram afetadas pelo aumento do percentual de soja crua, mas houve aumento da concentração de uréia no soro a partir de 50% de substituição. Proteínas totais e amilase pancreática sérica foram afetadas pela proteína da soja crua somente acima de 75% de substituição. Análises de regressão demonstraram que a substituição da proteína da clara de ovo por proteína de soja crua em até 30% foi inócua para o desempenho e parâmetros séricos de ratos em crescimento.

This work aimed to evaluate the replacement of egg white protein for raw soybean protein in diets for weaned rats on feed intake, body weight gain, feed efficiency and serum parameters (total protein,albumin, aminotransferases, urea, creatinine and pancreatic amylase). Twenty four weaned rats were randomly assigned to six groups of four animals which were fed diets containing five percentages of soybean protein (0, 25, 50, 75 and 100%), plus a non-proteic diet group. Animals were kept for 10 days with food and water ad libitum. Results showed that feed intake did not differ significantly among treatments tested. Body weight gain and feed efficiency of rats treated with 25% substitution diets did not differ from the control group. Serum albumin, aminotransferases and creatinine were not affected by increased amounts of soybean in rations, whilst serum urea was affected by inclusion of soybean in diets in values equal or above 50%. Total protein and pancreatic amylase were affected when soybean was present at 75% or more. Regression analysis showed that egg white protein replacement by soybean protein at up to 30% did not affect the tested traits of the growing rats.

Gastric lesions associated with the presence of Anisakis spp. Dujardin, 1845 (Nematoda: Anisakidae) in Cetaceans stranded on the coast of Ceara, Brazil / Lesões gástricas associadas à presença de Anisakis spp. Dujardin, 1845 (Nematoda: Anisakidae) em Cetáceos encalhados no litoral do Ceará, Brasil

The gastric compartments of ten cetaceans stranded on the coast of Ceará State, Northeast Brazil were analyzed in this study. Gastric Anisakis spp. was diagnosed in all individuals involved in this study. Parasites and tissue samples were collected during necropsy. The presence of Anisakis parasites showed similar distribution across the three gastric compartments and the majority was free within the gastric lumen. Macroscopically, the lesions were predominantly characterized by the presence of ulcers (60 percent, 6/10) within the gastric mucosa, occasionally associated with edema and hemorrhage (30 percent, 3/10). Eight cetaceans (8/10 - 80 percent) presented gastric microscopic alterations and in 75 percent (6/8) of these animals, chronic lymphoplasmocytic gastritis was observed with varying degrees of distribution and severity. Additionally, eosinophilic and granulomatous inflammation with giant cells, hemosiderosis, fibrosis and areas of necrosis were associated with location of parasites within the gastric mucosa. In this study, it was shown that the majority of cetaceans with the presence of Anisakis parasites presented macro and microscopic gastric alterations. These nematodes are probably associated with the development of these alterations; however, more pathological approaches are still required.

Neste estudo, foram analisados os compartimentos gástricos de dez cetáceos encalhados na costa do Ceará, região nordeste do Brasil. Parasitos do gênero Anisakis foram diagnosticados em todos os indivíduos estudados. As amostras parasitárias e teciduais foram coletadas durante o procedimento de necropsia. A presença de Anisakis demonstrou distribuição similar nos três compartimentos gástricos, estando a maior parte dos parasitos livre na mucosa gástrica. Macroscopicamente, as lesões se caracterizaram principalmente pela presença de úlceras (60 por cento, 6/10) gástricas, associadas ocasionalmente a edema e hemorragia (30 por cento, 3/10). Oito cetáceos (8/10 - 80 por cento) apresentaram alterações gástricas microscópicas e em 75 por cento (6/8) destes animais, foi observada uma gastrite crônica linfoplasmocitária com vários graus de distribuição e severidade. Foram constatados ainda, focos de inflamação granulomatosa com a presença de eosinófilos, células gigantes e a formação de hemossiderose, fibrose e de necrose em torno dos parasitos. Neste estudo, a maioria dos cetáceos com a presença de parasitos do gênero Anisakis apresentaram alterações gástricas macro e microscópicas. Estes nematóides estão provavelmente associados ao desenvolvimento destas alterações, entretanto, mais estudos são ainda necessários.