EXHALED AND PLASMA NITRITE: a comparative study among healthy, cirrhotic and liver transplant patients / Nitrito exalado e plasmático: um estudo comparativo entre pacientes transplantados saudáveis, cirrose e fígado

Context There is a relative lack of studies about exhaled nitrite (NO2-) concentrations in cirrhotic and transplanted patients. Objective Verify possible differences and correlations between the levels of NO2-, measured in plasma and exhaled breath condensate collected from patients with cirrhosis and liver transplant. Method Sixty adult male patients, aged between 27 and 67 years, were subdivided into three groups: a control group comprised of 15 healthy volunteers, a cirrhosis group composed of 15 volunteers, and a transplant group comprised of 30 volunteers. The NO2- concentrations were measured by chemiluminescence. Results 1) The analysis of plasma NO2- held among the three groups showed no statistical significance. 2) The comparison between cirrhotic and control groups, control and transplanted and cirrhotic and transplanted was not statistically significant. 3) The measurements performed on of NO2- exhaled breath condensate among the three groups showed no statistical difference. 4) When comparing the control group samples and cirrhotic, control and transplanted and cirrhotic and transplanted, there was no significant changes in the concentrations of NO2-. Conclusion No correlations were found between plasma and exhaled NO2-, suggesting that the exhaled NO2- is more reflective of local respiratory NO release than the systemic circulation. .

Contexto Observa-se relativa falta de estudos sobre nitrito (NO2-) exalado como biomarcador de lesão, após transplante de fígado. Objetivo Verificar possíveis diferenças e correlações entre os níveis de nitrito (NO2-), medido no plasma e condensado do exalado pulmonar de pacientes com cirrose e transplante de fígado. Método Sessenta pacientes adultos, masculinos, idades entre 27 e 67 anos, foram divididos em três grupos: grupo controle composto por 15 voluntários saudáveis, grupo cirrose, composto por 15 voluntários e, grupo de transplante, composto por 30 voluntários. As dosagens plasmáticas e do condensado do exalado pulmonar foram realizadas por quimioluminescência. Resultados A análise os valores de NO2- plasmático não mostrou diferença entre os grupos. As comparações entre grupos cirrose e controle, controle e transplantados e cirrose e transplante não foram significativas. As medidas em amostras de condensado do exalado pulmonar entre os três grupos não evidenciaram diferenças estatísticas. Ao comparar as amostras dos grupos controle e cirrótico, controle e transplantado e cirróticos e transplantados, não houve alterações significativas nas concentrações de NO2-. Conclusão Não foram encontradas correlações entre plasma e condensado do exalado pulmonar, sugerindo que o NO exalado reflete mais as condições respiratórias locais de liberação de NO do que a circulação sistêmica. .

Behavior of cholinesterase and liver mitochondrial function in dogs submitted to normothermic ischemia and reperfusion

PURPOSE: The plasmatic activity of the cholinesterase (CHE) and the liver mitochondrial function, expressed by the ratio of respiratory control (RCR), were studied during normothermic ischemia. METHODS: Sixteen adult mongrels, eight females and eight males were submitted to ischemia by clamping of the hepatic artery, portal vein and infrahepatic inferior vena cava, infra-hepatic, for two h, follwed by reperfusion for 1 h. The CHE and the mitochondrial function were evaluated at 60 and 120 min. of ischemia and at 15 and 60 minutes of reperfusion. RESULTS: The CHE decreased, significantly, during ischemia and in reperfusion. The RCR was decreased at 120 min. of ischemia, returning to the initial values on reperfusion. CONCLUSION: In this study, the CHE was a sensitive indicator of ischemic injury , suggesting irreversibility of ischemia injury. The RCR, by other side, showed a greater sensibility than the CHE in detection sense, during the studied period, the reversibility of the hepatic ischemic injury.

OBJETIVO: A atividade plasmática da colinesterase (CHE) e a função mitocondrial do fígado expressa pela RCR- razão de controle respiratório mitocondrial foram estudadas durante a isquemia/reperfusão hepáticas. MÉTODOS: Dezesseis cães adultos sem raça definida (oito machos e oito fêmeas) foram submetidos a isquemia normotérmica por pinçamento do pedículo hepático e da veia cava inferior infra-hepática por 2 horas, seguida de 15 e 60 minutos de reperfusão.A CHE e a RCR foram avaliadas após 60 e 120 minutos de isquemia e após 15 e 60 minutos de reperfusão. RESULTADOS: Os níveis de CHE diminuíram significativamente na isquemia e reperfusão.A RCR diminuiu após 120 minutos de isquemia retornando a níveis semelhantes ao controle após a reperfusão. CONCLUSÃO: A CHE foi sensível para indicar a lesão isquêmica, sugerindo irreversibilidade da lesão. Já a RCR foi mais sensível no sentido de detectar a reversibilidade da lesão isquêmica após a reperfusão.

Hepatectomia total com preservação da veia cava inferior: "piggy-back" experimental em cães

During the recipient hepatectomy in liver transplantation, preservation of the retrohepatic segment of the inferior vena cava has several advantages: it decreases warm ischemia time by eliminating the infrahepatic caval anastomosis, eliminates the need for venovenous bypass and eases retransplantation. Removal of the liver of the dog without sacrificing the inferior vena cava has been considered impossible because of the intrahepatic course of the vena cava at the sites of entry of the hepatic veins. The following report reviews the history of the piggyback method, and discuss about the feasibility of the total removal of the liver without injury to the vena cava in the dog.

No transplante de fígado, a preservação do segmento retro-hepático da veia cava durante a hepatectomia do receptor apresenta uma série de vantagens: diminuição do tempo de isquemia quente por eliminar a anastomose da veia cava infra-hepática, redução da necessidade da utilização de derivações veno-venosas e simplificação da cirurgia do re-transplante hepático. Em cães, os lobos hepáticos lateral direito e caudado são caprichosamente atravessados pela veia cava inferior, dificultando a completa "esqueletização" do vaso. No presente trabalho, os autores revisam a singular história do método do "piggy-back" experimental e clínico, e discutem a técnica da cirurgia em cães.

Transplante de fígado: indicação e sobrevida

The success of liver transplantation would be certainly compromised if the pre-operative evaluation was not adequately performed. The success of the liver transplantation depends on the diagnosis of the underlying hepatic disease, the determination of its extension and the degree of systemic repercussion. In the last 30 years, the progress in hepatology, the identification of viral hepatitis and the better management of ascitis and hepatorenal syndrome have increased the life expectancy of patients with chronic liver failure. Undoubtedly, orthotopic liver transplantation represents a great advance in modern hepatology. Nowadays, liver transplantation represents a valid therapeutic option for chronic liver diseases with (and presents) a mean survival rate of about 80% in 3 years. Thus, it is an indicated treatment in situations where the conservative treatment (would) could lead to a (incur) mortality rate as high as 70% in one year. In this article the authors comment (on) various aspects of Orthotopic Liver Transplantation related to indications and survival rates.

O sucesso dos transplantes de fígado certamente seria comprometido se a avaliação pré-operatória dos pacientes não fosse realizada de forma adequada. Isto se justifica devido ao reconhecimento de que o sucesso da cirurgia depende, em princípio, do diagnóstico da doença de base, da determinação de sua extensão e do grau de repercussão sistêmica. No final das décadas de setenta a noventa os progressos da hepatologia na identificação das hepatites virais e no manejo da ascite e da síndrome hepatorrenal melhoraram sobremaneira a expectativa de vida do doente portador de doença hepática crônica. Mas, sem dúvida o transplante ortotópico do fígado (TOF) foi o espetacular avanço da hepatologia moderna. Atualmente o transplante é um tratamento eficaz das hepatopatias crônicas, e o índice de sobrevivência global aos 3 anos é ao redor de 80%. É, portanto, uma alternativa de tratamento indicada nos casos terminais, onde a mortalidade com tratamentos conservadores pode atingir até 70% ao final de 12 meses. Neste artigo, os autores comentam aspectos do TOF, relacionados à indicação e a sobrevida.

Led enhancement in mitochondrial oxidative phosphorylation for hepatectomized rats

Recently, the LED (light emitting diode) developed by the Optics Group of IFSC-USP has been used instead of laser for the treatment of skin tumors by the PDT (Photodinamic Therapy) because of its low operational cost compared to the use of a laser. In this paper we investigate the effect of LED light on oxidative phosphorylation during liver regeneration after partial hepatectomy. Twenty-four male Wistar rats (250 g) were kept in identical housing units on a 12-hour light/12 hour dark cycle. The LED 10 group was exposed to LED at 638 nm (10 J/cm² for 3 minutes). Seventy percent partial hepatectomy was performed in the LED 10 and HPC (Partial Hepatectomy-Control). A sham-operated group (C) was used for control. Twenty four hours after the procedure, LED 10, HPC and control animals were sacrificed. Samples of liver tissue were used for the mitochondrial respiration assay. Statistical comparisons of the groups were performed by analysis of variance (ANOVA), followed by the Bonferroni post-test. Probability values less than 0.05 were considered to be statistically significant. the phosphorylation index (FI) for the LED 10 group was higher than that for the HPC group and for the sham group (p 005). The FI for the HPC group was higher than that for the sham group (p 005). The values of the ADP:O ratio for the three groups, which did not differ significantly from one another (p > 0.05). In the present study we noted an effective interaction between LED light and hepatic mitochondria, with an increased phosphorylation rate for the latter.

Aspectos básicos da lesão de isquemia e reperfusão e do pré-condicionamento isquêmico

Ischemia contributes to the pathogenesis of many perioperative clinical conditions. Although restoration of blood flow to an ischemic organ is essencial to prevent irreversible cellular injury, reperfusion may augment tissue injury in excess to that produced by ischemia alone. Thus, cellular damage after reperfusion of previously viable ischemic tissue is defined as ischemia-reperfusion injury. The basic aspects of I/R are reviewed.

A isquemia tem papel fundamental em muitas situações clínicas perioperatórias . Apesar da revascularização sanguínea a um órgão isquêmico seja essencial para prevenir a irreversibilidade da lesão celular, a reperfusão pode agravar as lesões produzidas na fase isquêmica isolada. Assim, o dano celular induzido após reperfusão de um órgão isquêmico é denominado de lesão de isquemia-reperfusão (I/R). Aspectos básicos da lesão I/R, são revisados neste artigo.

Efeito de agentes anti-hipertensivos sobre as células estreladas durante a regeneração hepática em ratos

O efeito de um inibidor da enzima conversora da angiotensina (lisinopril), de um antagonista do receptor da angiotensina II (losartan) e da bradicinina na população de células estreladas (CE) durante o fenômeno regenerativo hepático foi estudado. Ratos machos Wistar receberam lisinopril, losartan, bradicinina ou solução salina em volumes proporcionais, intraperitonealmente, antes e após hepatectomia parcial a 70% (HP). Cinco animais de cada grupo experimental e controle foram sacrificados sob anestesia com éter em 36 horas após a HP. A população de CE marcadas para alfa-actina de músculo liso foi estimada nas zonas periportal e pericentral das amostras hepáticas. A população de CE foi menor no grupo tratado com losartan, e maior nos grupos tratados com bradicinina e lisinopril que no grupo controle. Estes resultados sugerem que o losartan pode inibir, e a bradicinina e o lisinopril podem estimular a população de CE durante a regeneração hepática em ratos.

Eficácia do pré-condicionamento isquêmico na proteção das lesões de isquemia e reperfusão hepáticas

O pré-condicionamento isquêmico foi estudado inicialmente no coração, onde atenua os efeitos lesivos da isquemia coronariana. Consiste na indução de breves períodos de isquemia seguidos de reperfusão, para tornar o órgão resistente a períodos mais longos de isquemia. Nesta investigação estudamos sua eficácia na proteção das lesões de isquemia-reperfusão hepáticas em ratos. Utilizaram-se 40 animais divididos em grupo Controle (C); grupo Shunt (S), submetido a exposição da cavidade abdominal por 95’; grupo Isquemia (I), submetido a exposição da cavidade abdominal por 10’, isquemia de 80’ e reperfusão de 5’; e grupo Pré-condicionamento (PC), em que realizamos isquemia de 5’, reperfusão de 5’, nova isquemia de 80’ e reperfusão de 5’. As enzimas hepáticas e o potencial elétrico da membrana mitocondrial interna (MMI) foram analisados. Os resultados mostraram aumento nos níveis de ALT,AST e LDH em todos os grupos em relação ao controle e nos grupos I e PC em relação ao grupo S. Houve diminuição significativa do potencial elétrico da MMI no grupo Isquemia em relação aos demais. O aumento nos níveis das enzimas hepáticas nos grupos Isquemia e Pré-condicionamento em relação ao grupo Shunt pode ser atribuído a perda da integridade da membrana citoplasmática provocada pela isquemia de 80’ e reperfusão de 5’. A diminuição do potencial elétrico da membrana mitocondrial interna no grupo Isquemia em relação aos demais pode estar relacionada a lesão da MMI e perda do gradiente de prótons transmembrana. O pré-condicionamento isquêmico atenua essas lesões provavelmente pelo consumo mais lento do ATP durante a isquemia.

Efeito da deferoxamina na isquemia e reperfusão do fígado remanescente após ressecção hepática parcial

Particularmente, a utilização de vários tipos de drogas que diminuem os efeitos deletérios do binômio isquemia-reperfusão, tem tornado-se foco de vários estudos experimentais visando possíveis aplicações clínicas. O objetivo do presente estudo foi avaliar os efeitos da deferoxamina na isquemia e reperfusão sobre o fígado remanescente após ressecção hepática parcial a 70%, avaliando-se váriáveis bioquímicas do sangue: aspartato aminotransferase e alanina aminotransferase;.A amostra de 34 ratos foi dividida em grupos: Grupo HP (n = 8) - submetidos a hepatectomia parcial (HP) a 70%; Grupo HPD (n = 4) - submetidos a administração de deferoxamina (40 mg/kg) e HP a 70%; Grupo HPI (n = 7) - hepatectomizados (HP a 70%) e submetidos a isquemia (40 minutos); Grupo HPID (n = 7) - semelhante ao anterior, porém recebendo previamente deferoxamina; Grupo C (n = 8) - controle, submetido a operação simulada para HP a 70%. A análise estatística entre os diversos grupos foi feita pelos testes de Kruskal - Wallis e de Mann - Whitney, com nível de significância de 5%. Portanto, houve aumento significativo das aminotransferases nos animais submetidos a hepatectomia e a isquemia. Esse aumento foi inibido pela deferoxamina.

Avaliação do intumescimento osmótico mitocondrial do fígado submetido a isquemia parcial e ao pré-condicionamento isquêmico

O objetivo deste trabalho foi avaliar a permeabilidade da membrana mitocondrial em animais submetidos a pré-condicionamento isquêmico, isquemia e reperfusão seguido de hepatectomia a 70%. Foram utilizados 30 ratos Wistar divididos em 3 grupos de 10: Grupo Controle (fc), Grupo Isquêmico (fi) e Grupo Pré-condicionado (fp). Após o procedimento cirúrgico os animais foram sacrificados para a remoção do remanescente hepático (30%) do qual foram isoladas as mitocôndrias para a realização dos estudos de permeabilidade da membrana mitocondrial interna através do intumescimento osmótico. Foi observado um aumento significativo do intumescimento osmótico mitocondrial do grupo fi em relação aos grupos fc e fp, sugerindo uma possível participação de espécies reativas do oxigênio no processo.

Avaliação da função mitocondrial hepática em crianças portadoras de colestase neonatal

A dificuldade em se excluir o diagnóstico de atresia de vias biliares através de exames não invasivos freqüentemente leva à realização de biópsia hepática, cirúrgica ou transparietal. Apesar de inúmeros estudos a respeito de muitos de seus aspectos, esta moléstia ainda é considerada idiopática. Com a finalidade de compreender melhor as alterações hepáticas decorrentes da atresia de vias biliares, estudamos a função mitocondrial dos hepatócitos em crianças portadoras de colestase neonatal. Foram estudadas dez crianças portadoras de colestase neonatal, das quais sete foram submetidas à laparotomia para realização de biópsia hepática, colangiografia intra-operatória e portoenterostomia. Os valores obtidos para o consumo de oxigênio no estado 3 de ativação mitocondrial foram semelhantes aos de fígados normais, o que reflete uma boa capacidade de oxidação/fosforilação, transformando ADP em ATP. Estes resultados revelam uma capacidade compensatória mitocondrial para enfrentar a situação adversa conseqüente à doença hepática. Os valores para o estado 4 foram significativamente maiores que os de fígados normais, o que indica um aumento de permeabilidade de membrana mitocondrial. A diminuição do potencial de membrana, com lesão do tipo desacoplamento oxidação/fosforilação também sugere deficiência na capacidade energética dos hepatócitos. A diminuição da razão de controle respiratório foi outro achado significativo, que pode ser parte da alteração típica de colestase neonatal crônica, com algum grau de cirrose biliar.

Função mitocondrial hepática compensatória na coletase extra hepática aguda

A atividade compensatória mitocondrial é um mecanismo que permite a alguns orgãos manter seu nível energético em situações adversas. Este presente estudo visa analisar a função mitocondrial hepática em ratos submetidos à OBEH. Foram estudados 10 ratos Wistar machos (180 a 230 g), divididos em dois grupos. Grupo operação simulada - OS e grupo obstrução biliar extra hepática (OBEH). Após 24 h. foram coletadas amostras de sangue e biópsia hepática para a dosagem do nível sérico das enzimas hepáticas e a atividade mitocondrial. Houve aumento significativo das aminotranferases, da FA e BT (tabela 1).Verificou-se aumento do Estado 3 da respiração mitocondrial. Analisando os resultados, observou-se que as mitocôndrias hepáticas apresentaram atividade compensatória no sentido de preservação da função hepatocelular