Evaluation of aversive behavior in Rattus norvegicus experimentally infected by two distinct strains of Toxoplasma gondii (ME49 and VEG): study of epigenetic markers

ABSTRACT Background: Behavioral changes in Rattus norvegicus infected with two strains of Toxoplasma gondii (ME49 and VEG) were investigated. Methods: Rats were evaluated for motor activity and aversion or attraction to cat urine 60 days after infection. After euthanasia, arginine-vasopressin gene methylation in the central nervous system was evaluated. Results: A significant difference was observed in the methylation of the arginine-vasopressin promoter gene between rats infected with the ME49 and VEG strains. Conclusions: Although differences were not observed in many parameters, significant differences were observed in the methylation of the arginine-vasopressin promoter gene in rats infected with the two studied strains.

Effect of sex on Toxocara canis larval migration to the cerebellum during experimental infection of Rattus norvegicus

The presence of Toxocara canis third instar larvae in the cerebellum of Rattus norvegicus may alter rodent behavior and movement. In this study, we investigated whether the sex of the rodent affects the migration of larvae to the cerebellum. Thirty-six Rattus norvegicus specimens (18 males and 18 females) were infected with 300 T. canis eggs and were euthanized after 60 days. The cerebellum was removed and treated with 0.5% HCl to recover the T. canis larvae. The number of larvae recovered from male rodents was significantly higher than in females, suggesting that the sex of the animal influences larval migration to the cerebellum

Experimental toxocariasis in BALB/c mice: relationship between parasite inoculum and the IgG immune response

BALB/c mice were inoculated with 5-500 Toxocara canis infective eggs, and bled at 15-120 days post infection (dpi) to evaluate the dynamics of IgG antibody response and larvae distribution. Positive results were observed in all occasions for every inoculum, and a direct proportional relationship between antibody detection and the parasitic load was observed. In samples collected at 60 dpi, detection of IgG was more intense, especially with the 50 and 500 egg doses; also, a correlation between antibody level and egg count was observed with these two inocula. At 120 dpi, a decrease in antibody titer was observed for all groups; and at the end of the experiment, larvae were recovered from carcass, liver and brain. In the liver, larvae were only found in mice inoculated with 500 T. canis eggs. In carcasses, these were recovered in all groups, and the group inoculated with 50 eggs showed the highest percentage of larvae in the brain.

Efficacy of nitazoxanide against toxocara canis: larval recovery and humoral immune response in experimentally infected mice / Eficácia da nitazoxanida contra Toxocara canis: recuperação larvária e resposta imune humoral em camundongos experimentalmente infectados

SUMMARYThe efficacy of nitazoxanide (NTZ) against toxocariasis was investigated in an experimental murine model and results were compared to those obtained using mebendazole. Sixty male BALB/c mice, aged six to eight weeks-old, were divided into groups of 10 each; fifty were orally infected with 300 larvaed eggs of T. canisand grouped as follows, G I: infected untreated mice; G II: infected mice treated with MBZ (15 mg/kg/day) 10 days postinfection (dpi); G III: infected mice treated with NTZ (20 mg/kg/day) 10 dpi; G IV: infected mice treated with MBZ 60 dpi; G V: infected mice treated with NTZ 60 dpi; GVI: control group comprising uninfected mice. Mice were bled via retro-orbital plexus on four occasions between 30 and 120 dpi. Sera were processed using the ELISA technique to detect IgG anti- Toxocaraantibodies. At 120 dpi, mice were sacrificed for larval recovery in the CNS, liver, lungs, kidneys, eyes and carcass. Results showed similar levels of anti- ToxocaraIgG antibodies among mice infected but not submitted to treatment and groups treated with MBZ or NTZ, 10 and 60 dpi. Larval recovery showed similar values in groups treated with NTZ and MBZ 10 dpi. MBZ showed better efficacy 60 dpi, with a 72.6% reduction in the parasite load compared with NTZ, which showed only 46.5% reduction. We conclude that administration of these anthelmintics did not modify the humoral response in experimental infection by T. canis. No parasitological cure was observed with either drug; however, a greater reduction in parasite load was achieved following treatment with MBZ.

RESUMOFoi investigada a eficácia da nitazoxanida (NTZ) na toxocaríase murina experimental e os resultados comparados com os obtidos usando mebendazol (MBZ). Sessenta camundongos BALB/c machos, com idade entre seis e oito semanas foram divididos em grupos de 10 cada, 50 foram infectados oralmente com 300 ovos larvados de T. canise agrupados a seguir: GI: camundongos infectados não tratados; GII: camundongos infectados tratados com MBZ (15 mg/kg/dia) 10 dias pós-infecção (dpi); GIII: camundongos infectados tratados com NTZ (20 mg/kg/dia) 10 dpi, GIV: camundongos infectados tratados com MBZ 60 dpi; GV: camundongos infectados tratados com NTZ 60 dpi; GVI: controle não infectado. Os camundongos foram sangrados via plexo retro orbitário em quatro ocasiões entre o 30º e 120º dpi. Os soros foram processados pela técnica de ELISA para detecção de anticorpos IgG anti- Toxocara.Aos 120 dpi, os animais foram sacrificados para a recuperação larvária do SNC, fígado, pulmões, rins, olhos e carcaça. Os resultados mostraram níveis similares de anticorpos IgG anti- Toxocaraentre os camundongos infectados mas não submetidos a tratamento e os grupos infectados e tratados com MBZ ou NTZ, aos 10 e 60 dpi. Os valores da recuperação larval foram similares nos grupos tratados com NTZ e MBZ 10 dpi. MBZ mostrou melhor eficácia aos 60 dpi, com redução de 72,6% da carga parasitária comparada com NTZ, que mostrou redução somente de 46,5%. Concluímos que a administração destes anti-helmínticos não modificou a resposta humoral na infecção experimental por T. canis. Não foi observada cura parasitológica com nenhuma das drogas; porém maior redução na carga parasitária foi obtida após o tratamento com MBZ.

Trichuris trichiura in a post-Colonial Brazilian mummy

Trichuris trichiura is a soil-transmitted helminth which is prevalent in warm, moist, tropical and subtropical regions of the world with poor sanitation. Heavy whipworm can result either in Trichuris dysenteric syndrome - especially in children - or in a chronic colitis. In heavy infections, worms can spread proximally and may cause ileitis. Here we provide first microscopic evidence for a T. trichiura adult worm embedded in the rectum of a post-Colonial Brazilian adult mummy. During Colonial and post-Colonial times, many European chroniclers described a parasitic disease named Maculo whose symptomatology coincides with heavy helminthiasis. Based on our findings and on comparison of ancient textual evidence with modern description of heavy whipworm, we feel confident in considering that the two syndromes are expressions of the same pathological condition.

Membrane fractions from Strongyloides venezuelensis in the immunodiagnosis of human strongyloidiasis / Frações de membrana de Strongyloides venezuelensis para o imunodiagnóstico da estrongiloidíase humana

Strongyloides venezuelensis is a parasitic nematode of rodents frequently used to obtain heterologous antigens for the immunological diagnosis of human strongyloidiasis. The aim of this study was to evaluate membrane fractions from S. venezuelensis for human strongyloidiasis immunodiagnosis. Soluble and membrane fractions were obtained in phosphate saline (SS and SM) and Tris-HCl (TS and TM) from filariform larvae of S. venezuelensis. Ninety-two serum samples (n = 92) were obtained from 20 strongyloidiasis patients (Group I), 32 from patients with other parasitic diseases (Group II), and 40 from healthy individuals (Group III), and were analyzed by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Soluble fractions (SS and TS) showed 90.0% sensitivity and 88.9% specificity, whereas the membrane fractions (SM and TM) showed 95.0% sensitivity and 94.4% specificity. The present results suggest the possible use of membrane fractions of S. venezuelensis as an alternative antigen for human strongyloidiasis immunodiagnosis.

Strongyloides venezuelensis é um nematódeo parasita de roedores, frequentemente usado como antígeno heterólogo para o diagnóstico imunológico da estrongiloidíase humana. O objetivo deste estudo foi avaliar frações de membrana de S. venezuelensis para o imunodiagnóstico da estrongiloidíase humana. Para tanto, frações solúveis e de membrana foram obtidas em solução salina fosfato (SS e MS) e Tris-HCl (ST e MT) de larvas filarioides de S. venezuelensis. Amostras de soro de 92 indivíduos, sendo 20 com estrongiloidíase (Grupo I); 32 com outras parasitoses (Grupo II), e 40 indivíduos saudáveis (Grupo III), foram analisadas pelo teste Imunoenzimático (ELISA). As frações solúveis (SS e ST) apresentaram 90,0% e 88,9%, enquanto que as frações de membrana (MS e MT) demonstraram 95,0% e 94,4%, de sensibilidade e especificidade, respectivamente. Os resultados obtidos permitem indicar as frações de membranas como antígeno alternativo para o diagnóstico da estrongiloidíase humana.

BEHAVIORAL AND MEMORY CHANGES IN Mus musculus COINFECTED BY Toxocara canis AND Toxoplasma gondii / Alterações comportamentais e na memória de Mus musculus coinfectado por Toxocara canis e Toxoplasma gondii

Several researchers have stated that parasites can alter the behavior of their hosts, in order to increase the transmission rate, principally when prey-predator relationships are a reliable way of infection transmission. The aim of this study was to verify the occurrence of changes in anxiety and short-term memory patterns in experimentally infected Mus musculus by Toxocara canis and/or Toxoplasma gondii. Forty male Mus musculus (Balb/c) eight-week-old were divided into four groups of 10 mice each. One group was infected with 300 eggs of Toxocara canis; a second group was submitted to infection with 10 cysts of Toxoplasma gondii; a third group was concomitantly infected with both parasites with the same inoculums and the last group was maintained without infection. The anxiety levels were evaluated using an elevated plus maze and an actometer; the short-term memory was determined by a two-way active avoidance equipment. The determination of anxiety levels were conducted 40 and 70 days after infection and the short-term memory was evaluated 140 days after infection. Mice chronically infected by Toxoplasma gondii showed impaired learning and short-term memory, but no significant differences were found in mice infected by Toxocara canis or concomitantly infected by Toxocara canis and Toxoplasma gondii when compared to non infected mice.

Pesquisadores afirmam que parasitos podem alterar o comportamento de seus hospedeiros a fim de aumentar a sua taxa de transmissão. O objetivo deste estudo foi verificar a ocorrência de alterações na ansiedade e padrões de memória de curta duração em Mus musculus experimentalmente infectados por Toxocara canis e/ou Toxoplasma gondii. Utilizaram-se 40 camundongos da espécie Mus musculus machos (Balb/c) com oito semanas de idade, divididos em quatro grupos de 10 ratos cada. Um grupo foi infectado com 300 ovos de Toxocara canis, um segundo grupo foi submetido à infecção com 10 cistos de T. gondii, um terceiro grupo foi infectado concomitantemente com ambos os parasitas e o último grupo foi mantido sem infecção. Os níveis de ansiedade foram avaliados por meio de labirinto em cruz elevado e actômetro, a memória de curta duração foi determinada por esquiva aversiva. A determinação dos níveis de ansiedade foi realizada 40 e 70 dias após infecção e a memória de curto prazo foi avaliada 140 dias após a infecção. Camundongos cronicamente infectados por Toxoplasma gondii mostraram deficiência de aprendizagem e memória de curto prazo, mas não foram encontradas diferenças significantes em camundongos infectados por Toxocara canis ou concomitantemente infectados por Toxocara canis e Toxoplasma gondii quando comparados com camundongos não infectados.

Paleoparasitology: the origin of human parasites / Paleoparasitologia: a origem dos parasitas humanos

Parasitism is composed by three subsystems: the parasite, the host, and the environment. There are no organisms that cannot be parasitized. The relationship between a parasite and its host species most of the time do not result in damage or disease to the host. However, in a parasitic disease the presence of a given parasite is always necessary, at least in a given moment of the infection. Some parasite species that infect humans were inherited from pre-hominids, and were shared with other phylogenetically close host species, but other parasite species were acquired from the environment as humans evolved. Human migration spread inherited parasites throughout the globe. To recover and trace the origin and evolution of infectious diseases, paleoparasitology was created. Paleoparasitology is the study of parasites in ancient material, which provided new information on the evolution, paleoepidemiology, ecology and phylogenetics of infectious diseases.

O parasitismo é composto por três subsistemas: o parasito, o hospedeiro e meio ambiente. Não existe organismo que não possa ser parasitado. A relação entre um parasito e suas espécies de hospedeiro não resulta, na maior parte das vezes, em dano ou doença ao hospedeiro. Entretanto, numa doença parasitária, a presença de um determinado parasito é sempre necessária, pelo menos em um determinado momento da infecção. Algumas espécies de parasitos que infectam humanos foram herdados dos pré-hominídeos, e foram compartilhados com outras espécies de hospedeiro filogeneticamente próximas, mas outras espécies foram adquiridas pelo meio ambiente à medida que os humanos se desenvolveram. As migrações humanas espalharam os parasitos adquiridos por todo o mundo. Para recuperar e traçar a origem e evolução das doenças infecciosas foi criada a paleoparasitologia. Paleoparasitologia é o estudo dos parasitos em materiais antigos, que trouxe novas informações na evolução, paleoepidemiologia, ecologia e filogenética das doenças infecciosas.

IgG Antibody responses in mice coinfected with Toxocara canis and other helminths or protozoan parasites / Anticorpos IgG em camundongos coinfectados por Toxocara canis e outros helmintos e por protozoários parasitos

The immune response expressed by IgG antibodies in BALB/c mice experimentally infected with Toxocara canis, was studied with the aim of verifying the possible in vivo cross-reactivity between antigens of T. canis and other parasites (Ascaris suum, Taenia crassiceps, Schistosoma mansoni, Strongyloides venezuelensis and Toxoplasma gondii). Experiments included three groups of mice: one infected only by T. canis, another with one of the other species of parasites and a third concomitantly infected with T. canis and the other species in question. Animals were bled by orbital plexus at 23, 38 and 70 days post infection (p.i.). Sera were analyzed for anti-Toxocara antibodies by ELISA and Immunoblotting, using excretion-secretion antigens (ES), obtained from culture of third-stage larvae of T. canis. For all experiments a control group comprised by ten non-infected mice was used. Only in the case of A. suum infection, in these experimental conditions, the occurrence of cross-reactivity with T. canis was observed. However, in the case of co-infection of T. canis - S. mansoni, T. canis - S. venezuelensis and T. canis - T. crassiceps the production of anti-Toxocara antibodies was found at levels significantly lower than those found in mice infected with T. canis only. Co-infection with S. mansoni or S. venezuelensis showed lower mortality rates compared to what occurred in the animals with single infections. Results obtained in mice infected with T. canis and T. gondii showed significant differences between the mean levels of the optical densities of animals infected with T. canis and concomitantly infected with the protozoan only in the 23rd day p.i.

Estudou-se a resposta imune humoral expressa por anticorpos da classe IgG em camundongos BALB/c experimentalmente infectados com Toxocara canis em duas situações distintas. Na primeira, com o objetivo de verificar in vivo a possível reatividade cruzada entre Toxocara canis e outros parasitos (Ascaris suum, Taenia crassiceps, Schistosoma mansoni, Strongyloides venezuelensis e Toxoplasma gondii), foram realizados experimentos constituídos por três grupos de camundongos: um infectado apenas por Toxocara canis, outro com uma das demais espécies de parasitos estudados e um terceiro concomitantemente infectado por Toxocara canis e a espécie em questão. Todos os animais foram sangrados, através do plexo orbitário, 23, 38 e 70 dias após infecção. Os soros foram analisados para a presença de anticorpos anti-Toxocara por meio de teste imunoenzimático (ELISA) e por Immunoblotting, empregando-se antígeno de excreção-secreção (ES), obtido a partir da cultura de larvas de terceiro estádio de Toxocara canis. Para todos os experimentos utilizou-se grupo controle negativo constituído por 10 camundongos não infectados. Apenas no caso da infecção por Ascaris suum, nas condições experimentais observadas, logrou-se demonstrar ocorrência de reatividade cruzada com antígenos de Toxocara canis. Verificou-se, entretanto, no caso das coinfecções entre Toxocara canis-Schistosoma mansoni, Toxocara canis-Strongyloides venezuelensis e Toxocara canis-Taenia crassiceps produção de anticorpos anti-Toxocara em níveis significativamente inferiores do que os encontrados nos camundongos infectados somente por Toxocara canis. Nas coinfecções com Schistosoma mansoni ou Strongyloides venezuelensis observou-se, também, menor taxa de letalidade quando comparada à ocorrida nos animais com as respectivas infecções simples.

Nephrotic syndrome associated with toxoplasmosis: report of seven cases / Síndrome nefrótica associada à toxoplasmose: relato de sete casos

The concomitance of nephrotic syndrome and acute infection by Toxoplasma gondii is a rare occurrence in humans. In this paper seven cases of children, ranging from 11 months to 7 year-old, with concomitant nephrotic syndrome and asymptomatic acute T. gondii infection are reported. In one of those patients only the administration of anti-Toxoplasma therapy was enough to control the clinical and laboratory manifestations of the disease. In the other patients it was necessary to introduce corticosteroids or other immunosuppressant drugs. Three patients had complete clinical and laboratory improvement and the remaining showed only a partial response.

Ocorrência concomitante de síndrome nefrótica e infecção aguda por Toxoplasma gondii em seres humanos é situação pouco frequente. No presente trabalho são relatados sete casos de crianças, com idade variável entre 11 meses e sete anos, que apresentavam síndrome nefrótica e infecção aguda por T. gondii assintomática. Em um dos pacientes o tratamento específico anti-Toxoplasma foi suficiente para controlar clínica e laboratorialmente as manifestações da doença. Nos demais foi preciso administrar corticosteróides ou outras drogas imunossupressoras. Após introdução desse esquema três pacientes apresentaram remissão completa dos sintomas; os demais apenas remissão parcial.

Human toxocariasis: contribution by Brazilian researchers / Toxocaríase humana: contribuição dos pesquisadores brasileiros

In the present paper the main aspects of the natural history of human infection by Toxocara larvae that occasionally result in the occurrence of visceral and/or ocular larva migrans syndrome were reviewed. The contribution by Brazilian researchers was emphasized, especially the staff of the Tropical Medicine Institute of São Paulo (IMT).

São abordados os principais aspectos da história natural da infecção humana por larvas de Toxocara que pode resultar na ocorrência da síndrome de larva migrans visceral e/ou ocular. Deu-se destaque, principalmente, à contribuição de pesquisadores brasileiros e, em especial, aos pertencentes ao quadro do Instituto de Medicina Tropical de São Paulo.

Lagochilascariasis leading to severe involvement of ocular globes, ears and meninges / Infecção humana por Lagochilascaris minor com envolvimento ocular, auditivo e das meninges

A case report of a 31 year-old woman from Paraíba State (North-Eastern Brazil) that presented severe involvement of ocular globes, ears and meninges. Diagnosis was established after enucleation of her left eye, when adult worms were seen in the midst of a granulomatous inflammatory process. Her response to the initial treatment with levamisole and cambendazole was good, but there was a relapse after the fifth month of treatment even with maintenance doses of both medications. She later received ivermectin and albendazol and responded well.

Paciente do sexo feminino, com 31 anos, procedente da Paraíba, apresentava envolvimento severo de ambos os globos oculares, com perda da visão à esquerda, comprometimento da audição e das meninges. Após enucleação do olho esquerdo fragmento de helminto identificado como Lagochilascaris minor foi observado em processo inflamatório granulomatoso. Inicialmente a paciente foi tratada com levamisol e cambendazol, com bom resultado. Verificou-se, todavia, piora do quadro após cinco meses, com eliminação de larvas do ascarídeo em lesão presente na órbita esquerda, embora a medicação fosse mantida com administração periódica. Houve boa resposta terapêutica, com regressão do quadro, após substituição dos anti-helmínticos anteriores pela associação ivermectina e albendazol.

Alterações na estrutura epidemiológica da ancilostomose no estado de São Paulo, Brasil (1900-1987) / Changes in the epidemiological aspects of hookworm infection in São Paulo State, Brazil (1900-1987)

Neste trabalho, analisam-se aspectos da ocorrência de infecção por Ancilostomídeos no estado de São Paulo desde o início do século passado até 1987, chamando atenção para o significativo decréscimo da frequência de infecção a partir da segunda metade do século, provavelmente em decorrência de alterações ambientais, de transformações na estrutura social e da disponibilidade de drogas eficazes para o tratamento.

Parasitoses intestinais em áreas sob risco de enchente no município de Campinas, estado de São Paulo, Brasil / Intestinal parasitosis in flood risk areas from Campinas, São Paulo State, Brazil

Objetivo: Determinar a freqüência de enteroparasitos em população residente em áreas periféricas do município de Campinas (SP) e sua associação com variáveis de ordem socioeconômica. Métodos: Moradores de 40 residências sorteadas responderam a questionário semi-estruturado e foram submetidos a exames de fezes utilizando-se os métodos de Ritchie, Rugai, Kato-Katz e colorações por safranina-azul de metileno e hematoxilina férrica. Foram ainda examinadas 57 amostras de solo coletadas no peridomicilio das casas sorteadas. Resultados/Conclusões: Dentre 164 indivíduos examinados 98 (59,8por cento) revelaram infecção por algum enteroparasito. As espécies patogênicas mais freqüentes foram Giardia intestinalis (15,8por cento), Ascaris lumbricoides (16,4por cento) e Trichuris trichiura (10,9por cento). Observou-se aumento do número de eosinófilos sangüíneos em 44,4por cento e anemia em 30,5por cento dos 72 indivíduos que foram submetidos a hemograma. Renda familiar até dois salários mínimos e ausência de tratamento de água associaram-se significativamente à maior freqüência de enteroparasitismo.

Frequency of soil contamination by Toxocara canis eggs in the south region of São Paulo municipality (SP, Brazil) in a 18 month period

Soil contamination by embryonic eggs of Toxocara canis is the main source of human infection by this ascarid larvae resulting, sometimes, in the occurrence of visceral larva migrans syndrome. The objective of the present research is to determine the frequency of T. canis eggs in soil samples monthly collected in nine public places, located at the South Region of São Paulo municipality in a 18-month period, from February 2004 to July 2005. The soil samples collected were treated with a 30 percent antiformine solution and with a sodium dichromate solution (d = 1.40) and microscopic slides were prepared and examined under light microscopy for searching T. canis eggs. Two peaks of higher frequency had been found, one in February - May 2004 and the other in April - July 2005.

A contaminação do solo por ovos larvados de Toxocara canis é a principal fonte de infecção de seres humanos por larvas desse ascarídeo que, com freqüência, determinam ocorrência da síndrome de larva migrans visceral. No presente trabalho procurou-se investigar a freqüência com que são recuperados ovos de T. canis em amostras de solo, coletadas mensalmente, em nove localidades públicas, situadas na região sul do município de São Paulo, durante o período compreendido por fevereiro de 2004 e julho de 2005. As amostras coletadas foram inicialmente tratadas com solução de antiformina a 30 por cento, e, a seguir, com solução saturada de dicromato de sódio (d = 1,40), preparando-se lâminas com alíquotas da camada superficial da solução final onde se pesquisou, com auxílio de microscópio óptico, a presença de ovos de T. canis. Observou-se a ocorrência de duas ocasiões em que foi maior a freqüência de ovos nas amostras analisadas: uma no período compreendido entre fevereiro e maio de 2004 e outra entre os meses de abril e julho de 2005.