RESUMEN
En este trabajo se emplean células de Saccharomyces cerevisiae, portando dos construcciones genéticas para la secreción de interferón *-2. Se estudian los cultivos de las células libres (en reactores convencionales) e inmovilizadas en alginato de sodio. Se alcanzan niveles de interferón *-2. Se estudian los cultivos de las células libres (en reactores convencionales) e inmovilizadas en alginato de sodio. Se alcanzan niveles de interferón *-2 extracelular de 4-8 X 10e6 UI/ml, y productividades de hasta 15 mg de interferón por litro de volumen útil de reactor y por hora cuando se emplea una concentración celular de 0,05 g de biomasa húmeda por mililitro de gel en la inmovilización
Asunto(s)
Medios de Cultivo , Interferón Tipo I , Saccharomyces cerevisiae/citologíaRESUMEN
La enzima ß-galactosidasa producida por vía recombinante en E. Coli fue purificada por cromatografía de intercambio iónico y filtración por gel, lográndose una preparación de enzima de más del 95 % de pureza. Su capacidad como enzima marcadora en inmunoensayo enzimático sobre fase sólida (ELISA), fue probada comparándose con peroxidasa, la cual ha sido ampliamente usada en estos ensayos. Se realizaron conjugados con anticuerpo monoclonal anti-rotavirus para un sistema de detección de rotavirus, utilizando el agente heterobifuncional SPDP. Se obtuvieron niveles similares de sensibilidad para los conjugados realizados con peroxidasa y ß-galactosidasa; igualmente no se observaron diferencias significativas en el parámetro unión específica/unión no específica. En el presente trabajo mostramos los resultados obtenidos en la purificación de la enzima, su seguimiento por actividad enzimática y su uso como enzima marcadora en inmunoensayo enzimático