Thickness and immunohistochemistry of LASIK flaps created by different femtosecond lasers in eye-bank corneas / Espessura e imunohistoquímica de flap de LASIK criado com diferentes laseres de femtosegundo em córneas de banco de olhos

ABSTRACT Purpose: The aim of this study was to compare the corneal cell viability and thickness of LASIK flaps created by 3 femtosecond lasers in eye-bank human corneas. Methods: Forty-five eye-bank human sclerocorneal buttons (15 corneas in each group) were examined after the creation of 120 mm-thick laser-assisted keratomileusis (LASIK) flaps with 150kHz iFS In­traLase™ (IL), Z6 Femto LDV™ (LDV), or 200kHz Wavelight™ FS200 (FS200). The thickness of the flaps was measured using anterior segment optical coherence tomography (AS-OCT; Visante™). Cell viability was blindly evaluated with immunohistochemistry for keratocyte apoptosis using anti-caspase 3 antibodies. Results: The standard deviation from the intended flap thickness was less than 10 mm in all the groups. There was a statistically significant difference in corneas treated with LDV and IL with regard to the flap thickness horizontally at +3.00 mm (p=0.0124), -0.5 mm (p=0.0082), and -1.00 mm (p=0.0425) from the corneal vertex and +0.5 mm from the flap edge (p=0.0240), and those treated with LDV and FS200 with regard to the flap thickness horizontally at -0.5 mm from the corneal vertex (p=0.0082). The mean keratocyte apoptosis numbers were 13.09 ± 1.10, 15.59 ± 3.28, and 17.72 ± 1.49 in corneas treated with IL, FS200, and LDV, respectively (p<0.001). Conclusion: All 3 assessed femtosecond lasers provided predictable LASIK flap thickness. The mean stromal keratocyte apoptosis number was low in all groups.

RESUMO Objetivos: Comparar a viabilidade celular e a espessura do disco de LASIK confeccionado por três laseres de femtosegundo, em córneas humanas de banco de olhos. Métodos: Quarenta e cinco botões córneo-esclerais humanos de banco de olhos (15 córneas em cada grupo) foram examinados, após a criação de disco de LASIK com 120 mm de espessura, utilizando-se o iFS IntraLase® 150kHz (IL), o Femto LDV® Z6 (LDV), ou o Wavelight® FS200 200kHz (FS200). Tomografia de coerência óptica do seguimento anterior (OCT Visante®) foi usada para medir a espessura dos discos. A viabilidade celular foi avaliada por meio de imuno-histoquímica para apoptose dos ceratócitos, com anti-caspase 3. Resultados: O desvio padrão da espessura planejada do disco foi inferior a 10 mm em todos os grupos. Houve diferença estatisticamente significante da espessura do disco horizontalmente a +3,00 mm (p=0,0124), -0,5 mm (p=0,0082) e -1,00 mm (p=0,0425), a partir do vértice corneal, e a +0,5 mm (p=0,0240), a partir da borda do disco, em córneas tratadas por LDV e IL, e horizontalmente a -0,5 mm a partir do vértice corneal, entre LDV e FS200 (p=0,0082). A média de apoptose dos ceratócitos foi (13,09 ± 1,10), (15,59 ± 3,28) e (17,72 ± 1,49), em córneas tratadas pelo IL, FS200 e LDV, respectivamente (p<0,001). Conclusão: Todos os três laseres de femtosegundo estudados produziram disco de LASIK com predictibilidade de espessura. A média de apoptose dos ceratócitos foi baixa em todos os grupos.