Description of microsporidia in simulids: molecular and morphological characterization of microsporidia in the larvae of Simulium pertinax Kollar (Diptera: Simuliidae)

Introduction Microsporidia constitute the most common black fly pathogens, although the species' diversity, seasonal occurrence and transmission mechanisms remain poorly understood. Infections by this agent are often chronic and non-lethal, but they can cause reduced fecundity and decreased longevity. The objective of this study was to identify microsporidia infecting Simulium (Chirostilbia) pertinax (Kollar, 1832) larvae from Caraguatatuba, State of São Paulo, Brazil, by molecular and morphological characterization. Methods Larvae were collected at a single point in a stream in a rural area of the city and were kept under artificial aeration until analysis. Polydispyrenia spp. infection was characterized by the presence of at least 32 mononuclear spores measuring 6.9 ± 1.0 × 5.0 ± 0.7µm in persistent sporophorous vesicles. Similarly, Amblyospora spp. were characterized by the presence of eight uninucleate spores measuring 4.5 × 3.5µm in sporophorous vesicles. Results The molecular analysis confirmed the presence of microsporidian DNA in the 8 samples (prevalence of 0.51%). Six samples (Brazilian larvae) were related to Polydispyrenia simulii and Caudospora palustris reference sequences but in separate clusters. One sample was clustered with Amblyospora spp. Edhazardia aedis was the positive control taxon. Conclusions Samples identified as Polydispyrenia spp. and Amblyospora spp. were grouped with P. simulii and Amblyospora spp., respectively, corroborating previous results. However, the 16S gene tree showed a considerable distance between the black fly-infecting Amblyospora spp. and the mosquito-infecting spp. This distance suggests that these two groups are not congeneric. Additional genomic region evaluation is necessary to obtain a coherent phylogeny for this group. .

Direito ao tratamento de saúde com medicamentos não fornecido pelo SUS: uma análise à luz do princípio da reserva do possível e do estado democrático de direito / The right to receive a medical treatment not provided by SUS: an analysis under the perspective oh the principle of the possible reserve and of the democratic law state

O presente artigo tem por objetivo analisar a pertinência das decisões judiciais que determinam o fornecimentode medicamento não constante na lista do Sistema Único de Saúde - SUS. Para tanto partir-se-á de um caso concreto, no qual o Poder Judiciário de Minas Gerais determinou o forncecimento de medicamento para o tratamento de câncer, como alternativa àquele recomendado e disponibilizado pelo Ministério da Saúde. Partindo de tal caso, será feita uma análise da configuração constitucional do direito à saúde, levando-se em conta o princípio da reserva do possível, tanto em sua perspectiva negativa quanto positiva. Em seguida, será apresentada a idéia de núcleo essencial dos direitos fundamentais, como âmbito inevitável de proteção, na medida em que reflexo da dignidade da pessoa humana. Por fim, far-se-á uma anhálise crítica das decisões judiciais de fornecimento de medicamento não constantes da lista do Sistema Único de Saúde - SUS, com o intuito de traçar os limites dentro dos quais a sua prolação é juridicamente adequada à Constituição Federal.

Evaluation of Leishmania (Leishmania) chagasi strains isolated from dogs originating from two visceral leishmaniasis-endemic areas in Brazil using multilocus enzyme electrophoresis / Avaliação de amostras de Leishmania (Leishmania) chagasi isoladas de cães oriundos de duas áreas endêmicas de leishmaniose visceral no Brasil através da eletroforese de isoenzimas

INTRODUCTION: Domestic dogs are the most important reservoir in the peridomestic transmission cycle of Leishmania (Leishmania) chagasi. The genetic variability of subpopulations of this parasite circulating in dogs has not been thoroughly analyzed in Brazil, even though this knowledge has important implications in the clinical-epidemiological context. METHODS: The objective of this study was to evaluate and compare the phenotypic variability of 153 L. chagasi strains isolated from dogs originating from the municipalities of Rio de Janeiro (n = 57) and Belo Horizonte (n = 96), where the disease is endemic. Strains isolated only from intact skin were selected and analyzed by multilocus enzyme electrophoresis using nine enzyme systems (6PG, GPI, NH1 and NH2, G6P, PGM, MDH, ME, and IDHNADP). RESULTS: The electrophoretic profile was identical for all isolates analyzed and was the same as that of the L. chagasi reference strain (MHOM/BR/74/PP75). Phenetic analysis showed a similarity index of one for all strains, with the isolates sharing 100 percent of the characteristics analyzed. CONCLUSIONS: The results demonstrate that the L. chagasi populations circulating in dogs from Rio de Janeiro and Belo Horizonte belong to a single zymodeme.

INTRODUÇÃO: Cães domésticos são considerados os reservatórios mais importantes no ciclo peridoméstico de transmissão de Leishmania (Leishmania) chagasi. No entanto, a variabilidade genética de sub-populações que circulam neste hospedeiro é ainda pouco explorada no Brasil, sendo tal conhecimento de grande importância no contexto clínico-epidemiológico. MÉTODOS: O objetivo deste estudo foi avaliar e comparar a variabilidade fenotípica de 153 amostras de L. chagasi isoladas de cães oriundos dos municípios do Rio de Janeiro (n = 57) e Belo Horizonte (n = 96), onde a doença é endêmica. Foram selecionadas somente amostras isoladas de pele íntegra e analisadas por eletroforese de isoenzimas (MLEE) empregando nove sistemas enzimáticos (6PG, GPI, NH1 e NH2, G6P, PGM, MDH, ME, IDHNADP). RESULTADOS: Todas as amostras analisadas apresentaram perfil eletroforético idêntico entre si e com a amostra de L. chagasi utilizada como referência neste estudo (MHOM/BR/74/PP75). A análise fenética demonstrou índice de similaridade igual a um para todas as amostras, revelando um compartilhamento de 100 por cento dos caracteres avaliados. CONCLUSÕES: A partir desses resultados, podemos inferir que as populações de L. chagasi que estão circulando nos cães do Rio de Janeiro e Belo Horizonte podem ser agrupadas em um único zimodema.

Avaliação da variabilidade fenotípica de amostras de Leishmania (Leishmania) chagasi isoladas de cães oriundos de duas áreas endêmicas de leishmaniose visceral no Brasil / Evaluation of phenotypic variability of Leishmania (Leishmania) chagasi isolated from dogs in two endemic areas of visceral leishmaniasis in Brazil

Entre as doenças causadas por protozoários, as leishmanioses possuem um papel de destaque devido à sua ampla distribuição geográfica, severidade das manifestações clínicas e grande incidência. Na leishmaniose visceral (LV), os cães domésticos são os reservatórios mais importantes e, talvez, os responsáveis pela mudança no perfil epidemiológico da doença em diferentes regiões do Brasil, principalmente pelo constante movimento migratório, facilitando a expansão da doença para áreas consideradas indenes. A possível variabilidade genética de subpopulações de Leishmania (Leishmania) chagasi que circulam em diferentes ciclos naturais ainda é muito pouco explorada no Brasil, sendo tal conhecimento de grande importância em vários aspectos, principalmente no contexto epidemiológico e clínico. O objetivo deste estudo foi avaliar a variabilidade fenotípica de amostras de Leishmania chagasi isoladas de cães oriundos do município do Rio de Janeiro e de Belo Horizonte. Foram selecionadas cem (100) amostras, de ambas as localidades, criopreservadas no banco de amostras biológicas do Laboratório de Vigilância em Leishmanioses do Instituto de Pesquisa Clínica Evandro Chagas (Lab-Vigileish) e analisadas por eletroforese de isoenzimas (MLEE) empregando nove sistemas enzimáticos (6PG, GPI, NH1 e NH2, G6P, PGM MDH, ME, IDHNADP)

Das 200 amostras previamente selecionadas, 153 foram analisadas, das quais 96 foram obtidas de Belo Horizonte e 57 do Rio de Janeiro, tendo todas, apresentado perfil eletroforético idêntico entre si e com a amostra de referência de Leishmania chagasi (MHOM/BR/74/PP75). A análise fenética demonstrou índice de similaridade igual a um para todas as 153 amostras estudas, revelando dessa forma, um compartilhamento comum de 100% dos caracteres avaliados. Como conclusão deste estudo, podemos afirmar que a população de Leishmania chagasi que está circulando em cães do Rio de Janeiro e Belo Horizonte possuem características fenotípicas iguais entre si, sendo agrupadas em um único zimodema. Não foi possível correlacionar qualquer agrupamento geográfico de subpopulações ou com o status clínico do animal

Investigação de Salmonella spp., Listeria spp., Campylobacter spp. e Pseudomonas spp. no trato intestinal de avestruzes (Struthio camelus) criados no estado do Rio de Janeiro, Brasil / Investigation of Salmonella spp., Listeria spp., Campylobacter spp. and Pseudomonas spp. in ostriches (Struthio camelus) intestine from Rio de Janeiro State, Brazil

Na estrutiocultura, pesquisas relacionadas com a prevalência de micro-organismos patogênicos para esses animais e de importância em saúde pública ainda são escassas. O objetivo deste trabalho foi investigar a presença de Salmonella spp., Listeria spp., Campylobacter spp. e Pseudomonas spp. a partir de 60 amostras de suabes cloacais, provenientes de quatro criatórios de avestruzes e avaliar o perfil de susceptibilidade destes micro-organismos frente aos antimicrobianos. Os micro-organismos dos gêneros Salmonella, Listeria e Campylobacter não foram encontrados nas amostras analisadas. Pseudomonas aeruginosa foi isolado a partir de 17 amostras (28,3,%), provenientes de animais de diferentes faixas etárias, oriundos dos quatro criatórios investigados. Adicionalmente, Escherichia coli foi isolado de 57 amostras (95%), Klebsiella spp., de cinco amostras (8,33%), Proteus mirabilis, Proteus vulgaris e Enterobacter spp. de uma amostra (1,66%). Das 17 cepas de P. aeruginosa submetidas ao teste de susceptibilidade aos antimicrobianos, todas (100%) apresentaram sensibilidade à Amicacina e à Ciprofloxacina e todas (100%) foram resistentes ao Sulfametoxazol/Trimetoprim e à Tetraciclina. Foram encontrados cinco perfis diferentes de resistência aos antimicrobianos, indicando uma variação da resistência entre as cepas de Pseudomonas isoladas, inclusive em animais do mesmo criatório e mantidos no mesmo piquete.

There has been limited research on the prevalence of ostrich intestinal pathogens and on the role of these animals as foodborne pathogens source. This study was conducted to estimate the frequence of Salmonella spp., Listeria spp., Campylobacter spp. and Pseudomonas spp. from intestinal swabs of ostriches and to investigate the antibiotic resistance of the isolates. Sixty samples collected from four ostrich farms were examined. Salmonella, Listeria and Campylobacter were not isolated from the samples investigated and Pseudomonas aeruginosa was isolated from 17 (28.3%) samples. Additionally, Escherichia coli was isolated from 57 samples, (95%), Klebsiella spp. from five (8.33%), and Proteus mirabilis, Proteus vulgaris and Enterobacter spp. from one sample (1,66%). All Pseudomonas isolates were susceptible to Amicacin and Ciprofloxacin, and all of them (100%) were resistant to Trimethoprin/Sulfametox and to Tetracicline. Five antimicrobial resistance profiles were found, showing a resistance diversity among the Pseudomonas isolates, even in the same farm and raised at the same pen.

Spatial and temporal distribution of blackflies (Diptera: Simuliidae) in the Itatiaia National Park, Brazil

The distribution of the blackfly larval taxocenoses of different altitudes in the Itatiaia National Park (located in the southeast of Rio de Janeiro state, Brazil 44°34' - 44°42' W , 22°16' - 22°28' S) was investigated on four campaigns, one in each season of 2003. On each campaign 60 samples were collected, using 30 x 30 cm wooden quadrats, distributed at four sites: Taquaral, Véu da Noiva, Três Picos and Brejo da Lapa. The winter and spring campaigns included two additional sampling sites: Alsene and Agulhas Negras. A total of 3578 larvae and 292 pupae were sampled, representative of six species: Simulium clavibranchium Lutz, S. subnigrum Lutz, S. rappae Py-Daniel, S. incrustatum Lutz, S. stellatum Gil-Azevedo, Figueiró & Maia-Herzog and Lutzsimulium pernigrum Lutz 1910. The highest larvae abundance and diversity were reported at the intermediate altitude site, Brejo da Lapa. Principal Components Analysis (PCA) revealed that L. pernigrum, S. stellatum and S. incrustatum were associated with the smaller breeding sites, the first two species being associated with sunny sites, while S. incrustatum occurred in sites with little sunlight.

A distribuição das taxocenoses de larvas de simulídeos (Diptera: Simuliidae) de diferentes altitudes no Parque Nacional de Itatiaia ( localizado no sudeste do estado do Rio de Janeiro, Brasil 44°34' - 44°42' W , 22°16' - 22°28' S ) foi investigada ao longo de quatro campanhas, cada uma em uma diferente estação do ano de 2003. Cada campanha foi composta de 60 amostras, obtidas a partir de "quadrats" de madeira de 30 x 30 cm, distribuídos através de quatro áreas: Taquaral, Véu da Noiva, Três Picos e Brejo da Lapa. Nas campanhas do inverno e da primavera, dois outros sítios, Alsene e Agulhas Negras, foram adicionados. Foram coletadas 3578 larvas e 292 pupas, sendo identificadas seis espécies: Simulium clavibranchium Lutz, S. subnigrum Lutz, S. rappae Py-Daniel, S. incrustatum Lutz, S. stellatum Gil-Azevedo, Figueiró & Maia-Herzog e Lutzsimulium pernigrum Lutz. As maiores abundância e diversidade foram encontradas no sítio de altura intermediária, o Brejo da Lapa. A análise de componentes principais (PCA) revelou que L. pernigrum, S. stellatum e S. incrustatum se mostraram associadas a rios de menor porte, com as duas primeiras espécies associadas a sítios com maior insolação e S. incrustatum com pouca insolação.

A new black fly isolate of Bacillus thuringiensis autoagglutinating strain highly toxic to Simulium pertinax (Kollar) (Diptera, Simuliidae) larvae

Formulations containing the entomopathogenic Bacillus thuringiensis serovar israelensis strain IPS-82 has been widely applied for mosquito control around the world. Strain IPS-82 is highly active against Aedes aegypti but less active against other well-known vectors such as Culex quinquefasciatus and Simulium spp. larvae. Eighteen strains of B. thuringiensis were isolated from Simulium pertinax larvae naturally occurring in rivers of Southeast Brazil with one demonstrating special toxic effects. Simulated field tests against S. pertinax larvae showed that the native Brazilian autoagglutinanting B. thuringiensis (LFB-FIOCRUZ 1035) has an LC50 at least 25 times lower than the standard IPS-82 strain. The same bacterial preparation was also tested against Ae. aegypti larvae in laboratory trials and the LC50 values obtained with LFB-FIOCRUZ 1035 were at least three times lower than the one for the IPS 82 strain. The results indicate that this strain is more toxic than the standard B. thuringiensis serovar israelensis (H14) in the two Dipteran species tested. It is noteworthy that differences between LC50 values were more pronounced in S. pertinax larvae, the source of the original isolation.

A bioassay method for black flies (Diptera: Simuliidae) using larvicides

Esta nota apresenta um método alternativo para bioensaios com larvas de simulídeos, com que se espera proporcionar aos pesquisadores uma ferramenta mais simples, porém igualmente efetiva para a obtenção de dados referentes à eficácia de larvicidas.

Evaluation of the impact of Bacillus thuringiensis serovar israelensis and Temephos, used for the control of Simulium (Chirostilbia) pertinax Kollar, 1832 (Diptera, Simuliidae) on the associated entomofauna, Paraty, state of Rio de Janeiro, Brazil

The study was set up to evaluate the impact of two commercial larvicide formulations, Bacillus thuringiensis serovar israelensis base (Bti) at 15 ppm/1 min and temephos at 0.03 ppm of active ingredient, used to control Simulium pertinax populations, on associated non-target entomofauna occupying the same breeding sites. The experiments were carried out on the Pedra Branca and Muricana rivers, on the slopes of Serra do Mar massif, municipality of Paraty, state of Rio de Janeiro, Brazil. Bti was applied to the river Pedra Branca and temephosto theriver Muricana. On both rivers, treatment and control sections were labeled as such, each one with two observation posts: slow moving water and fast water regions respectively. Artificial substrata was used to evaluate the abundance of associated entomofauna. Attached immature stages of arthropods were removed from both of its surfaces fortnightly. Were collected, from the two rivers, 28 477 specimens of the entomofauna associated with S. pertinax. The families Hydropsychidae, Chironomidae, Bactidae, Simuliidae, Blephariceridae and Megapodagrionidae were represented. These was an impact of temephos on the entomofauna associated with S. pertinax only in Simuliidae and Chironomidae, and to Bti only in Simuliidae. However, the reduction in their numbers was not statistically significant