RESUMEN
Resumo Objetivo A acidose tubular renal distal (ATRd) é caracterizada por acidose metabólica devido à excreção renal de ácido prejudicada. O objetivo deste artigo é apresentar o diagnóstico genético de quatro crianças com ATRd com uso do sequenciamento total do exoma. Métodos Selecionamos duas famílias não relacionadas, quatro crianças com ATRd e seus pais, para fazer o sequenciamento total do exoma. A audição foi preservada em ambas as crianças da família um, porém em nenhuma criança da família dois, na qual um par de gêmeas teve perda auditiva severa. Fizemos o sequenciamento total do exoma em dois conjuntos de amostras e confirmamos os achados com o método de sequenciamento de Sanger. Resultados Duas mutações foram identificadas nos genes ATP6V0A4 e ATP6V1B1. Na família um, detectamos uma nova mutação no éxon 13 do gene ATP6V0A4 com uma alteração em um nucleotídeo único GAC → TAC (c.1232G>T) que causou substituição de ácido aspártico por tirosina na posição 411. Na família dois, detectamos uma mutação recorrente do homozigoto com inserção de um par de bases (c.1149_1155insC) no éxon 12 do gene ATP6V1B1. Conclusão Nossos resultados confirmam o valor do sequenciamento total do exoma para o estudo de nefropatias genéticas complexas e permitem a identificação de mutações novas e recorrentes. Adicionalmente, demonstramos claramente pela primeira vez a aplicação desse método molecular em doenças tubulares renais.
Abstract Objective Distal renal tubular acidosis (dRTA) is characterized by metabolic acidosis due to impaired renal acid excretion. The aim of this study was to demonstrate the genetic diagnosis of four children with dRTA through use of whole-exome sequencing. Methods Two unrelated families were selected; a total of four children with dRTA and their parents, in order to perform whole-exome sequencing. Hearing was preserved in both children from the first family, but not in the second, wherein a twin pair had severe deafness. Whole-exome sequencing was performed in two pooled samples and findings were confirmed with Sanger sequencing method. Results Two mutations were identified in the ATP6V0A4 and ATP6V1B1 genes. In the first family, a novel mutation in the exon 13 of the ATP6V0A4 gene with a single nucleotide change GAC → TAC (c.1232G>T) was found, which caused a substitution of aspartic acid to tyrosine in position 411. In the second family, a homozygous recurrent mutation with one base-pair insertion (c.1149_1155insC) in exon 12 of the ATP6V1B1 gene was detected. Conclusion These results confirm the value of whole-exome sequencing for the study of rare and complex genetic nephropathies, allowing the identification of novel and recurrent mutations. Furthermore, for the first time the application of this molecular method in renal tubular diseases has been clearly demonstrated.
Asunto(s)
Adolescente , Niño , Femenino , Humanos , Lactante , Masculino , Acidosis Tubular Renal/diagnóstico , Exones/genética , Pérdida Auditiva Sensorineural/diagnóstico , ATPasas de Translocación de Protón Vacuolares/genética , Acidosis Tubular Renal/genética , Análisis Mutacional de ADN , Pérdida Auditiva Sensorineural/genética , Índice de Severidad de la EnfermedadRESUMEN
PURPOSE: To investigate protein expression and mutations in phosphatase and tensin homolog (PTEN) in patients with stage IB cervical squamous cell carcinoma (CSCC) and the association with clinical-pathologic features, tumor p53 expression, cell proliferation and angiogenesis. METHODS: Women with stage IB CSCC (n=20 - Study Group) and uterine myoma (n=20 - Control Group), aged 49.1±1.7 years (mean±standard deviation, range 27-78 years), were prospectively evaluated. Patients with cervical cancer were submitted to Piver-Rutledge class III radical hysterectomy and pelvic lymphadenectomy and patients in the Control Group underwent vaginal hysterectomy. Tissue samples from the procedures were stained with hematoxylin and eosin for histological evaluation. Protein expression was detected by immunohistochemistry. Staining for PTEN, p53, Ki-67 and CD31 was evaluated. The intensity of PTEN immunostaining was estimated by computer-assisted image analysis, based on previously reported protocols. Data were analyzed using the Student's t-test to evaluate significant differences between the groups. Level of significance was set at p<0.05. RESULTS: The PTEN expression intensity was lower in the CSCC group than in the Control (benign cervix) samples (150.5±5.2 versus 204.2±2.6; p<0.001). Our study did not identify any mutations after sequencing all nine PTEN exons. PTEN expression was not associated with tumor expression of p53 (p=0.9), CD31 (p=0.8) or Ki-67 (p=0.3) or clinical-pathologic features in patients with invasive carcinoma of the cervix. CONCLUSIONS: Our findings demonstrate that the PTEN protein expression is significantly diminished in CSCC. .
OBJETIVO: O objetivo do estudo foi investigar a expressão e mutações do PTEN em pacientes com Carcinoma de Células Escamosas (CCE) de Colo do Útero com estadiamento IB e sua associação com fatores prognósticos, expressão do p53, proliferação celular e angiogênese. MÉTODOS: Mulheres com diagnóstico de CCE de colo uterino em estágio IB (n=20) (casos) e mioma uterino (n=20) (controle) com idade de 49.1±1.7 foram acompanhadas. As pacientes com câncer de colo do útero foram submetidas a histerectomia Piver-Rutledge classe III associada a linfadenectomia pélvica e aquelas com mioma uterino a histerectomia vaginal. Amostras de tumor e colo normal foram retiradas para avaliação histológica e marcação imuno-histoquímica das proteínas PTEN, p53, ki-67 e CD 3. A intensidade imuno-histoquímica do PTEN foi estimada por processamento de imagem digital a partir de protocolos pré-estabelecidos. Os dados foram analisados através do teste de qui - quadrado (χ2). O nível de significância foi considerado quando p < 0,05. RESULTADOS: A expressão do PTEN estava diminuída no grupo de pacientes com CCE em comparação ao grupo controle (150.5±5.2 versus 204.2±2.6; p<0.001). Nenhuma mutação no seqüenciamento genético dos nove exons do PTEN foi encontrada. Não houve associação estatisticamente significativa entre a expressão do PTEN e a expressão do p53 (p=0,969), Ki-67 (p=0.283) e CD 31 (p=0.817) ou fatores prognósticos anátomo-clínicos nas pacientes com carcinoma invasor do colo uterino. CONCLUSÕES: Este estudo demonstrou que o PTEN estava significativamente diminuído nas pacientes com CCE. .
Asunto(s)
Adulto , Anciano , Femenino , Humanos , Persona de Mediana Edad , /biosíntesis , Carcinoma de Células Escamosas/genética , Fosfohidrolasa PTEN/biosíntesis , Fosfohidrolasa PTEN/genética , Neoplasias del Cuello Uterino/genética , Regulación Neoplásica de la Expresión Génica , /biosíntesis , Mutación , Estudios Prospectivos , /biosíntesis , Neoplasias del Cuello Uterino/patologíaRESUMEN
Age-related macular degeneration (AMD) is a degenerative disorder that affects the central retina and involves the Bruch's membrane, the retinal pigment epithelium and the photoreceptors. Recent studies have shown that polymorphisms of the CFH, LOC387715 and VEGF genes are associated with AMD. Herein, we review the literature to analyze the association between the main genetic polymorphisms and the response to the existing therapeutic modalities. Patients with CFH high-risk alleles show a poorer response to preventive treatment of AMD with antioxidants and zinc.The association between genetic polymorphisms and response to photodynamic therapy and antiangiogenic drugs, however, is controversial until now.
A degeneração macular relacionada à idade (DMRI) é uma doença degenerativa que afeta a retina central e envolve a membrana de Bruch, o epitélio pigmentar da retina e os fotorreceptores. Estudos recentes têm mostrado que polimorfismos dos genes CFH, LOC387715 e VEGF estão associados com a DMRI. Neste trabalho, é feita uma revisão da literatura para análise da associação entre os principais polimorfismos genéticos e a resposta às diferentes modalidades terapêuticas existentes. Observa-se que os pacientes portadores dos alelos de risco do gene CFH apresentam uma pior resposta ao tratamento preventivo da DMRI com antioxidantes e zinco. Já a associação entre o polimorfismo genético e a resposta à terapia fotodinâmica e às drogas antiangiogênicas é, até o momento, controversa.
Asunto(s)
Humanos , Polimorfismo Genético/genética , Predisposición Genética a la Enfermedad , Inhibidores de la Angiogénesis/uso terapéutico , Degeneración Macular/genética , Degeneración Macular/tratamiento farmacológico , Antioxidantes/uso terapéutico , Fotoquimioterapia/métodos , Zinc/uso terapéutico , Envejecimiento/genética , Fármacos Fotosensibilizantes/uso terapéutico , Factor H de Complemento/genética , Neovascularización Coroidal/genética , Factor A de Crecimiento Endotelial Vascular/genética , Bevacizumab/uso terapéutico , Ranibizumab/uso terapéutico , Genotipo , Degeneración MacularRESUMEN
RNA splicing is an essential, precisely regulated process that occurs after gene transcription and before mRNA translation, in which introns may be removed and exons, retained. Variability in splicing patterns is a major source of protein diversity from the genome and function to generate a tremendously diverse proteome from a relatively small number of genes. Changes in splice site choice can determine different effects on the encoded protein. Small changes in peptide sequence can alter ligand binding, enzymatic activity, allosteric regulation, or protein localization. Errors in splicing regulation have been implicated in a number of different disease states. This study reviewed the mechanisms of splicing and their repercussion in endocrinology, emphasizing its importance in some thyroid physiological and pathological conditions.
Após a transcrição genética e antes da tradução do mRNA, ocorre o splicing do RNA, que consiste em um processo essencial, precisamente regulado, por meio do qual podem ocorrer excisões de íntrons e retenções de éxons. A variabilidade dos padrões de splicing é a principal fonte de diversidade de proteínas geradas por um pequeno número de genes. Alterações na escolha do sítio de splicing podem determinar efeitos diferentes nas proteínas codificadas. Pequenas alterações na sequência peptídica podem alterar o seu sítio de ligação de substratos, sua atividade enzimática, a regulação alostérica ou a localização proteica. Erros na regulação do splicing têm sido implicados em grande número de doenças. Nessa revisão, foram descritos os mecanismos de splicing enfatizando sua importância em algumas condições fisiológicas e patológicas envolvendo a tireoide.
Asunto(s)
Humanos , Empalme del ARN/genética , Glándula Tiroides , Hormonas Tiroideas/genética , Neoplasias de la Tiroides/genética , Empalme Alternativo/genética , Receptores de Hormona Tiroidea/fisiología , Glándula Tiroides/fisiología , Hormonas Tiroideas/metabolismo , Neoplasias de la Tiroides/metabolismo , Tirotropina/fisiologíaRESUMEN
INTRODUCTION: Nephrogenic diabetes insipidus is characterized by a lack of response in the distal nephron to the antidiuretic hormone arginine vasopressin. Manifestations include polyuria, polydipsia, hyposthenuria, recurrent episodes of dehydration and fever and growth failure. Most cases are caused by mutations in the AVPR2 gene. The mutant receptors are trapped intracellularly. METHOD: We studied five boys using clinical, laboratory and molecular data. The mean age at diagnosis was 14.6 months (range 6 to 24) and 12.2 years (7.8 to 19) after the follow-up period. The mean period of follow-up was 132.2 ± 50.9 months. RESULTS: The geometric means of the z-scores of weight and stature were -4.5 and -3.6, respectively, at diagnosis. At the last medical appointment, the z-scores of weight and stature were -0.3 and -0.9, respectively. Three patients were diagnosed with ureterohydronephrosis and exhibited increased post-void urine volume. Mutations in the AVPR2 gene were found in all patients, and the carrier status was confirmed in four of five cases. Two unrelated children presented identical mutations (S167L) in arginine vasopressin R2. Two of the patients had a mutation that has already been described in other Brazilian families (R337X), and one patient showed a de novo mutation (Y128D) in arginine vasopressin R2, since his mother's molecular analysis was normal. The recurrence risk for this family was significantly reduced. CONCLUSION: This study reports the clinical and laboratory characterization of Nephrogenic diabetes insipidus and reiterates the importance of the genetic basis that underlies the disease diagnosis and genetic counseling.
Asunto(s)
Adolescente , Niño , Humanos , Masculino , Adulto Joven , Diabetes Insípida Nefrogénica/genética , Diabetes Insípida Nefrogénica/patología , Brasil , Estatura/fisiología , Peso Corporal/fisiología , Estudios de Seguimiento , Mutación/genética , Receptores de Vasopresinas/genética , Adulto JovenRESUMEN
It is still debatable which is the best management to familial forms of hyperparathyroidism. Conservative, minimally invasive or aggressive surgical approaches have been proposed from different groups around the world. Our objective was to study the gene mutation, expression of HRPT2 and the clinical outcome after 32 years of follow-up in one Brazilian kindred with familial isolated hyperparathyroidism (FIHP). Clinical and biochemical data, direct sequencing of the HRPT2 gene, analysis of parafibromin expression using RT-PCR, and immunohistochemistry were done. A nonsense mutation was found in exon 1 (c.96G>A)(p.Trp32X) in all affected members studied. Using RT-PCR, mRNA transcription was altered with complete absence of both transcripts in tumor tissue. Immunohistochemical analysis of tumors showed loss of parafibromin immunoreactivity. In this kindred there was a high prevalence of recurrence (75 percent), or persistence after less than subtotal parathyroidectomy that led us to consider a more aggressive surgical approach should be discussed among the affected family members, once surgical criteria was met. We concluded that it is necessary to individualize the surgical approach for HRPT2-related hyperparathyroidism until we can gather a better phenotype-genotype correlation in larger series, to best define their treatment.
A melhor conduta nas formas familiares de hiperparatireoidismo relacionadas a mutações no gene HRPT2 ainda é controvertida. Cirurgias conservadoras, minimamente invasivas ou mais agressivas já foram propostas por diferentes grupos. Objetivamos estudar a seqüência e a expressão do gene HRPT2, além do desfecho clínico, após seguimento de até 32 anos de uma família brasileira com hiperparatireodismo familiar isolado (FIHP). Utilizamos dados clínicos e bioquímicos, seqüenciamento direto do HRPT2 além de análise da expressão da parafibromina através da RT-PCR e imunohistoquímica. Foi identificada mutação nonsense no éxon 1 (c.96G>A)(p.Trp32X) em todos os membros afetados que foram estudados. A análise do mRNA transcrito, através da RT-PCR, demonstrou ausência do transcrito no tecido tumoral. A imunohistoquímica também evidenciou ausência da parafibromina. Nessa família houve alta (75 por cento) prevalência de recorrência ou persistência da doença após paratireoidectomia parcial o que nos levou a considerar fundamental discutir uma abordagem cirúrgica mais agressiva com os outros familiares portadores da mutação caso critérios de indicação cirúrgica sejam atingidos. Dessa maneira, até que estudos mais amplos estabeleçam uma correlação genótipo-fenótipo no hiperparatireoidismo familiar relacionado a mutações no HRPT2, a abordagem cirúrgica deverá ser individualizada.
Asunto(s)
Adolescente , Adulto , Anciano , Femenino , Humanos , Masculino , Persona de Mediana Edad , Adulto Joven , Adenoma/genética , Hiperparatiroidismo/genética , Linaje , Neoplasias de las Paratiroides/genética , Proteínas Supresoras de Tumor/genética , Adenoma/cirugía , Codón sin Sentido , Toma de Decisiones , Procedimientos Quirúrgicos Endocrinos/métodos , Expresión Génica , Hiperparatiroidismo/cirugía , Recurrencia Local de Neoplasia , Neoplasias de las Paratiroides/cirugía , ARN Mensajero/análisis , Adulto JovenRESUMEN
Introdução: tensão pré-menstrual (TPM), Síndrome pré-menstrual (SPM) ou transtorno disfórico pré-menstrual (TDPM) constituem o conjunto de sintomas emocionais, cognitivos e físicos relacionado com o ciclo menstrual e que acometem milhares de mulheres em idade reprodutiva. Caracterizam-se por irritabilidade intensa, frequentemente acompanhada de humor depressivo, assim como inúmeras queixas mentais e somáticas. O TDPM é um variante da síndrome pré-menstrual, mais intenso, com a oscilação do humor apresentada com fator mais perturbador e debilitante no complexo de sintomas descritos. Esses sintomas interferem de maneira significativa no funcionamento social, ocupacional e sexual dessas mulheres. Este estudo objetivou diagnosticar prospectivamente quadros de SPM/TDPM segundo critérios da CID 10 e DSM IV, descrever e classificar esses quadros de acordo com a sua gravidade e co-morbidade. Métodos: as pacientes com sintomas de disforia pré-menstrual foram admitidas por profissionais treinados para a avaliação diagnóstica, preenchimento de questionários, escalas e acompanhamento em psicoterapia de grupo cognitiva comportamental durante dois a três meses durante os quais foram solicitadas e orientadas a preencher diário de sintomas. A análise descritiva com os testes X² e teste t de Student foi realizada para avaliar as variáveis categóricas e contínuas, respectivamente, quando os dois grupos (casos e controles) foram comparados. Resuldados: constataram-se aumento de sintomas de transtornos do humor e impulsividade quando comparados com o grupo-controle. Conclusão: a compreensão do tratamento para TDPM deve priorizar a correlação entre neurotransmissão e hormônios gonadais.
Asunto(s)
Humanos , Femenino , Adulto , Persona de Mediana Edad , Síndrome Premenstrual/diagnóstico , Ciclo Menstrual , Factores Socioeconómicos , Encuestas y Cuestionarios , Síndrome Premenstrual/etiología , Síndrome Premenstrual/tratamiento farmacológicoRESUMEN
Doenças psiquiátricas são patologias crônicas, recorrentes e promotoras de desarranjo e custo social extenso. A psicofarmacologia apresenta um número crescente de medicações eficazes e sua evolução acontece no sentido de aumentar a eficácia do tratamento de pacientes refratários, assim como reduzir os freqüentes efeitos colaterais associados com as medicações tradicionais. A farmacogenética é uma ciência relativamente recente que estuda as influências genéticas na resposta a droga e que pode vir a ser ferramenta essencial para o entendimento do funcionamento de drogas, assim como dos efeitos colaterais de medicações. Nessa revisão foram levantados os principais achados farmacogenéticos com antipsicóticos e antidepressivos e comentadas as perspectivas da farmacogenética na comunidade científica e clínica no Brasil.
Asunto(s)
Antipsicóticos , Antidepresivos , Farmacogenética , PsicofarmacologíaRESUMEN
O diabetes insipidus nefrogênico (DIN) é uma doença rara caracterizada pela incapacidade do rim de concentrar a urina, a despeito de concentrações normais ou aumentadas do hormônio antidiurético arginina-vasopressina (AVP). Recentes avanços da fisiopatologia renal mostraram que, após a ligação do AVP ao seu receptor AVPR2 (receptor de vasopressina tipo 2), uma cascata de eventos culmina com a reabsorção de água no túbulo coletor, por meio de canais permeáveis exclusivamente à água e localizados nas membranas apicais do túbulo coletor, sendo o mais importante deles a aquaporina-2 (AQP2). A identificação, caracterização e análise mutacional dos genes AVPR2 e AQP2 permitiram estabelecer as bases moleculares de vários tipos hereditários de diabetes insipidus nefrogênico. Aproximadamente 90 por cento desses pacientes apresentam mutações do AVPR2, 8 por cento apresentam mutações no AQP2 e o restante não tem causas identificadas. Nessa revisão apresentamos exemplos de alterações genéticas e sugerimos que o uso de técnicas de biologia molecular pode minimizar as complicações dessa doença heterogênea mas com fenótipo bastante semelhante.
Asunto(s)
Humanos , Masculino , Femenino , Diabetes Insípida Nefrogénica/diagnóstico , Diabetes Insípida Nefrogénica/fisiopatología , Acuaporinas/genética , Arginina Vasopresina/fisiología , Diabetes Insípida Nefrogénica/genética , Mutación , Linaje , Receptores de Vasopresinas/genéticaRESUMEN
As bases moleculares da forma esporadica da doenca de Alzheimer (DA) permanecem ainda desconhecidas. Nos formulamos a hipotese de que, em alguns casos esporadicos de DA, uma mutacao somatica nos genes da proteina precursora amiloide (APP), da presenilina 1 (PS-1) e 2 (STM2) (genes envolvidos na DA forma familiar) em uma celula embrionaria comprometida com o desenvolvimento neuronal, pode resultar em fenotipo da DA. Usando a tecnica de PCR, eletroforese em gel de gradiente desnaturante (DGGE), analise de restricao e sequenciamento direto de DNA, nos analisamos esses genes em 99 tecidos encefalicos de pacientes com DA comprovada histologicamente. Uma amostra de tecido encefalico mostrou uma mutacao no gene PS-1 (His 163 Arg), que mais tarde foi demonstrada ser uma mutacao de celulas germinativas. Nenhuma outra anormalidade de migracao foi demonstrada, em qualquer amostra, nos exons 16 ou 17 do gene APP, nos exons codificadores da PS-1 ou qualquer padrao anormal de digestao pela analise de restricao no gene PS-2...