Efecto de la toxina pertussis sobre la actividad guanilil ciclasa dependiente de Mg²+ en el músculo liso traqueal de bovino / Effect of the pertussis toxins on the guanylate cyclase dependent activity of Mg² + in the tracheal musde smooth of bovine

Las membranas plasmáticas de músculo liso traqueal de bovino presentan una actividad de guanililciclasa dependiente de Mg²+, determinada utilizando radioinmunoensayo para GMPc, sobre la cual se estudió el efecto de la toxina pertussis. Se observó un comportamiento bimodal dependiente de la concentración de Mg²+: efecto estimulatorio hasta una concentración de Mg²+ 2mM y efecto inhibitorio a concentraciones mayores del ión. El agonista carbamilcolina también mostró un efecto dual sobre esta actividad enzimática: estimulatorio hasta 10-9 M e inhibitorio a concentraciones mayores. La toxina pertussis produce un efecto bloqueador de la guanililciclasa dependiente de Mg²+ y eso permite concluir que dicha actividad es modulada por proteína Go/Gi en forma similar a lo descrito previamente para la actividad guanililciclasa dependiente de Mn²+ en la misma fracción de membranas, pero en el caso de la actividad dependiente de Mg²+, aparentemente se requiere del componente inhibitorio de la proteína G para ejercer su función

Presencia de guanilil ciclasas sensibles a los péptidos natriuréticos ANP y CNP en el músculo liso traqueal de bovino / Guanylyl cyclases sensibility to natriuretic peptide ANP and CNP in the tracheal muscle smooth of bovine

La producción de GMP cíclico en el músculo liso traqueobronquial de bovino (MLTB) es catalizada por guanilil ciclasas soluble (sGC) y particulada (mGC). Para la identificación de la mGC involucrada en la regulación muscarínica, via receptores M2 y M3 del tono de MTLB, se amplificó a partir de cDNA obtenido del MLTB una región conservada en el dominio catalítico de todas las GC. La secuenciación de los productos de RT-PCR reveló que el 76 por ciento de los transcriptos codifican para la subunidad ß1 de sGC y el 24 por ciento para la isoforma B (sensible al péptido CNP) de la mGc. RT-PCRs con oligonucléotidos isoforma-específicos mostraron que las isoformas sensibles a los péptidos ANP y guanilina también se expresan en el MLTB. La activación máxima de mGC obtenida con CNP resultó significativamente (p<0.001) superior a la lograda con ANP, indicando que la isoforma B es la mGC predominante en este tejido