Microbial additives in the composting process / Aditivos microbianos no processo de compostagem

ABSTRACT Composting is the process of natural degradation of organic matter carried out by environmental microorganisms whose metabolic activities cause the mineralization and partial humification of substances in the pile. This compost can be beneficially applied to the soil as organic fertilizer in horticulture and agriculture. The number of studies involving microbial inoculants has been growing, and they aim to improve processes such as composting. However, the behavior of these inoculants and other microorganisms during the composting process have not yet been described. In this context, this work aimed to investigate the effects of using a microbial inoculum that can improve the composting process and to follow the bacterial population dynamics throughout the process using the high-resolution melt (HRM) technique. To do so, we analysed four compost piles inoculated with Bacillus cereus, Bacillus megaterium, B. cereus + B. megaterium and a control with no inoculum. The analyses were carried out using samples collected at different stages of the process (5th to 110th days). The results showed that the bacterial inocula influenced the process of composting, altering the breakdown of cellulose and hemicelluloses and causing alterations to the temperature and nitrogen levels throughout the composting process. The use of a universal primer (rDNA 16S) allowed to follow the microbial succession during the process. However, the design of a specific primer is necessary to follow the inoculum throughout the composting process with more accuracy.

RESUMO A compostagem é um processo de degradação natural da matéria orgânica realizado por microrganismos presentes no ambiente, levando a mineralização e humificação parcial das substâncias presentes na pilha, esse composto formado pode ser beneficamente aplicado ao solo como fertilizante orgânico na horticultura e agricultura. O número de estudos envolvendo inoculantes microbianos é crescente, os quais tem por objetivo a otimização de processos de compostagem. Contudo, o comportamento desses inoculantes e da microbiota ao longo do processo não tem sido caracterizado. Nesse contexto, este trabalho foi realizado com o objetivo de avaliar o efeito da utilização de um inóculo bacteriano que promova melhorias no processo de compostagem, bem como o de acompanhar a dinâmica populacional bacteriana ao longo de todo o processo através da técnica de High Resolution Melt (HRM). Para isso foram analisados quatro pilhas de compostagem inoculadas com Bacillus cereus, Bacillus megaterium, B. cereus + B. megaterium e o controle sem adição de inóculo. Foram realizadas análises químicas e moleculares (HRM) das amostras coletadas em diferentes períodos da compostagem (5º ao 110º dias). Os resultados mostraram que os inóculos bacterianos influenciaram no processo de compostagem com alteração na degradação de celulose, hemicelulose bem como alteração da temperatura e níveis de nitrogênio ao longo da compostagem. A utilização de um primer universal (rDNA 16S) permitiu acompanhar a sucessão bacteriana ao longo do processo, nos tratamentos. Contudo a construção de um primer específico é necessário para acompanhar de maneira mais precisa o inóculo durante o desenvolvimento da compostagem.

Essential oils in the control of dry bubble disease in white button mushroom / Óleos essenciais no controle da doença bolha seca em champignon

ABSTRACT: Lecanicillium fungicola, which causes Dry bubble disease, induces infections and inflicts major losses in champignon production. The control can be managed through measures of hygiene and use of fungicides; however, in Brazil there are no registered products. This study aimed to estimate the influence of various essential oils extracted from Melissa officinalis, Thymus vulgaris, Origanum vulgare, Eucalyptus globulus, Cinnamomum zeylanicum and Syzygium aromaticum on the in vitro development and their uses. Therefore, analysis was performed of the L. fungicola isolates in vitro and the best oils were tested in vivo. Besides, the Agaricus bisporus - L. fungicola interaction was confirmed by scanning electron microscopy (SEM). Cinnamon and clove oils in concentrations of 0.4% and thyme oil of 0.8% were identified as good growth inhibitors of the pathogenic mycelium. Effective inhibition of the conidial germination was seen in all concentrations by cinnamon oil, and by clove and thyme oils only at 0.4% and 0.8%, respectively. When the essential oils were applied post-infestation in the in vivo experiments the incidence of the disease in the mushrooms was much lower. From the SEM it was clear that 19 hours after the inoculation of A. bisporus with L. fungicola, the spores had already completely germinated, revealing the presence of the infection. Therefore, the findings of this study indicated that the oil extracts of cinnamon, clove and thyme are potential and efficient alternatives in the control of dry bubble disease.

RESUMO: A doença bolha seca, causada pelo fungo Lecanicillium fungicola, provoca infecções graves que resultam em perdas significativas na produção de champignon. O controle se dá através de práticas sanitárias e do uso de fungicidas, porém no Brasil não há produtos registrados. Desta forma, este estudo objetivou avaliar o efeito de óleos essenciais extraídos de Melissa officinalis, Thymus vulgaris, Origanum vulgare, Eucalyptus globulus, Cinnamomum zeylanicum e Syzygium aromaticum sobre o desenvolvimento in vitro de isolados de L. fungicola e aplicação dos melhores óleos em teste in vivo. Além disso, a interação entre Agaricus bisporus e L. fungicola foi verificada por meio de microscopia eletrônica de varredura (MEV). Os óleos de canela e cravo a partir da concentração 0.4% e tomilho a 0.8% inibiram o crescimento micelial do patógeno. Já a germinação de conídios foi inibida pelo óleo de canela em todas as concentrações, bem como pelos óleos de cravo e tomilho, a 0.4% e 0.8%, respectivamente. No experimento in vivo, a aplicação dos óleos essenciais pós-infestação apresentou menor incidência da doença nos cogumelos produzidos. A MEV revelou que após 19 horas da inoculação de L. fungicola em A. bisporus, os esporos já estavam completamente germinados, o que indicava a ocorrência da infecção. Assim, os resultados deste trabalho sugerem que os óleos de canela, cravo e tomilho são alternativas potenciais para o controle da doença bolha seca.

Cultivo do champignon em função da temperatura / Buton mushroom cultivation in function of temperature

O cogumelo Agaricus bisporus é um cogumelo de clima temperado que requer baixa temperatura para a indução da frutificação. Essa exigência limita o seu cultivo no Brasil nos meses mais frios do ano ou exige a utilização de ambiente controlado, onerando muito a produção. Por isso, este trabalho teve como objetivo avaliar a produtividade de diferentes linhagens em função da temperatura de cultivo após a indução da frutificação. Diferentes linhagens de A. bisporus foram avaliadas quanto ao efeito da temperatura sobre a colonização do composto e a produtividade do cogumelo. As temperaturas de 21 e 25°C foram utilizadas durante a colonização do composto e, após a indução da frutificação, durante o ciclo de cultivo. Para todas as linhagens testadas, a temperatura de 25°C proporcionou maior velocidade de colonização do composto, favorecendo ciclos de cultivo mais curtos. Além disso, após a indução da frutificação a 18°C, a manutenção do ambiente de cultivo a 25°C proporcionou maior produtividade, quando comparada ao cultivo a 21°C. Para a linhagem mais produtiva, os três primeiros fluxos foram responsáveis por mais de 50% da produção total. Portanto, para um cultivo comercial em que é necessário manter volumes constantes de produção, os ciclos de cultivo poderiam ser limitados a três fluxos de produção.

The Agaricus bisporus is a button mushroom that requires low temperature to induce fruiting. This requirement limits our cultivation in Brazil during the coldest months of the year and requires the use of controlled environment. Therefore, this study aimed to assess the productivity of different strains depending on the growth temperature after induction of fruiting. A. bisporus strains were evaluated for the effect of temperature on the colonization of compost and mushroom productivity. Temperatures of 21 and 25°C were used for the substrate colonization and after induction of fruiting crop cycle. For all strains tested, temperature 25°C gave a quickly colonization of the compound, favoring shorter production cycles. Furthermore, after induction of fruiting at 18°C, maintaining the culture environment at 25°C gave a higher productivity to contrast with culture at 21°C. For the most productive strain, the first three streams were responsible for over 50% of total production. Thus, for a cash crop where it is necessary to maintain constant volumes of production, crop cycles could be limited to three productions flows.

Nutritional Requirements for Growth of Agaricus brasiliensis / Requerimentos nutricionais para o crescimento micelial de Agaricus brasiliensis

The nutritional requirements of A. brasiliensis in culture media were assessed by supplementing a basal medium (g L-1): (glucose, 10, KH2PO4, 1, MgSO4.7H2O, 0.5, [NH4]2SO4, 1, pH 5.5) with CaCl2, trace elements (FeSO4.7H2O; MnCl2.4H2O; ZnSO4.7H2O; CuSO4.5H2O), casein, yeast extract, peptone, B-vitamins or amino acids. Evaluations were based on the mycelial growth in solid or liquid culture (mm day-1 or mg day-1) and visual analysis of the colony. The addition of CaCl2 and trace elements was very important for the major mycelial growth of the fungi. The addition of casein and inositol to the medium did not have a significant effect on growth. The best growth result in solid medium was obtained with the basal medium plus the addition of yeast extract and peptone. In relation to the other nutrient sources, the mycelial growth in the presence of amino acids darkened the medium after two weeks. The addition of B-vitamins to the basal medium lead to slower mycelial growth; however, growth was more visually dense when compared to other nutritional sources. B-vitamins added separately did not have the same result, suggesting that the fungus requires two or more vitamins at the same time for better mycelial growth.

Os requerimentos nutricionais de A. brasiliensis foram avaliados, com a suplementação de um meio basal (g L-1): (glicose, 10, KH2PO4, 1, MgSO4.7H2O, 0.5, [NH4]2SO4, 1, pH 5.5) com CaCl2, micronutrientes (FeSO4.7H2O; MnCl2.4H2O; ZnSO4.7H2O; CuSO4.5H2O), caseína, extrato de levedura, peptona, vitaminas do complexo B ou aminoácidos. O crescimento micelial foi avaliado em meio sólido e líquido, considerando velocidade de crescimento e produção de massa micelial (mm dia-1 ou mg dia-1) e análise visual da colônia. A adição de CaCl2 e micronutrientes foi muito importante para o melhor crescimento micelial do fungo, enquanto que a adição de caseina e inositol não apresentou efeito significativo sobre o crescimento. O melhor crescimento em meio sólido foi obtido quando o meio basal foi suplementado com extrato de levedura e peptona. Quando o fungo foi cultivado no meio basal suplementado com aminoácidos, observou-se um escurecimento do meio após duas semanas de cultivo. A adição de vitaminas proporcionou um crescimento micelial mais lento no meio sólido, entretanto, mais denso em relação ao meio suplementado com outros nutrientes. Quando as vitaminas do complexo B foram adicionadas separadamente não se observou o mesmo resultado, o que sugere que o fungo requer duas ou mais vitaminas no meio para melhorar o crescimento micelial.

Mushroom cultivation in Brazil: challenges and potential for growth / Cultivo de cogumelos no Brasil: desafios e potencialidades

Mushroom cultivation is rapidly expanding in Brazil because Brazilians have discovered the medicinal and culinary value of mushrooms and their economic situation has improved. However, the horticultural technology for cultivating mushrooms under Brazilian conditions is lacking. For many years, the mushroom cultivation technology used in Brazil was adapted from developed countries whose materials and climate were different from those of Brazil. In order to exploit the Brazilian potential for mushroom cultivation it is essential to develop cultivation technology for family owned and operated rustic farms as well as for modern large scale industrial operations. Mushroom species cultivated in Brazil are discussed and some approaches for future research are suggested.

O cultivo de cogumelos está em franca expansão no Brasil, graças à descoberta de suas propriedades medicinais e culinárias pelo povo brasileiro e também em função da melhoria das condições econômicas. Entretanto, há ainda uma necessidade de desenvolvimento de uma tecnologia de cultivo apropriada para as condições brasileiras. Durante muitos anos, a tecnologia de cultivo de cogumelos utilizada no Brasil foi uma adaptação daquela utilizada nos países desenvolvidos, cujas condições climáticas e disponibilidade de matéria-prima são diferentes do Brasil. Portanto, para que se possa desenvolver todo o potencial brasileiro para o cultivo de cogumelos, é essencial o desenvolvimento de tecnologias de cultivo mais apropriadas para a agricultura familiar, mas também é importante o desenvolvimento tecnológico voltado para o cultivo de cogumelos em escala industrial. As principais espécies de cogumelos cultivados no Brasil são discutidas neste trabalho, além da indicação das principais necessidades de pesquisa para o futuro.

Factors affecting the production and regeneration of protoplasts from Colletotrichum lindemuthianum / Fatores que afetam a produção e regeneração de protoplastos de Colletotrichum lindemuthianum

The present work reports factors affecting the production and regeneration of protoplasts from Colletotrichum lindemuthianum. The usefulness of protoplast isolation is relevant for many different applications and has been principally used in procedures involving genetic manipulation. Osmotic stabilizers, lytic enzymes, incubation time and mycelial age were evaluated in terms of their effects on protoplast yield. The optimal condition for protoplast production included the incubation of young mycelia (48 h) in 0.6 mol l-1 NaCl as the osmotic stabilizer, with 30 mg ml-1 Lysing Enzymes from Trichoderma harzianum for 3 h of incubation. In these conditions protoplasts production was higher than 10(6) protoplatos ml-1 in the digestion mixture, number suitable enough for experiments of transformation in fungi. Sucrose concentrations of 1.2 mol l-1 and 1 mol l-1 were the most suitable osmotic stabilizers for the regeneration after 48 h, with rates of 16.35 percent and 14.54 percent, respectively. This study produced an efficient method for protoplast production and reverted them into a typical mycelial morphology using a Colletotrichum lindemuthianum LV115 isolate.

O presente trabalho apresenta os fatores que afetam a produção e regeneração de protoplastos de Colletotrichum lindemuthianum. O isolamento de protoplastos é muito relevante para diferentes aplicações, principalmente, em procedimentos que envolvem a manipulação genética. Estabilizadores osmóticos, enzimas líticas, tempo de incubação e idade micelial foram testados com relação ao efeito na liberação de protoplastos. As condições otimizadas para produção de protoplastos foram incubação de micélio jovem (48 h) em estabilizador osmótico NaCl 0.6 mol l-1, acrescido de 30 mg ml-1 da enzima Lysing Enzymes de Trichoderma harzianum incubado, durante 3 h. Nessas condições, a obtenção de protoplastos foi maior que 10(6) protoplatos ml-1 na mistura de digestão, número suficientemente adequado para experimentos de transformação em fungos. Sacarose nas concentrações de 1.2 mol l-1 e 1 mol l-1 foram os estabilizadores mais apropriados para a regeneração, após 48 h, sendo as taxas de regeneração de 16.35 por cento e 14.54 por cento, respectivamente. Este estudo produziu um método eficiente para produção e reversão de protoplastos à morfologia micelial típica de Colletotrichum lindemuthianum utilizando o isolado LV115.

Avaliação do cultivo de Pleurotus sajor-caju (fries) sing. sobre o resíduo de algodão da industria têxtil para a produção de cogumelos e para alimentação animal / Evaluation of the cultivation of Pleurotus sajor-caju (fries) sing. on cotton textile mill waste for mushroom production and animal feeding

O resíduo proveniente do beneficiamento do algodão em lixadeiras na indústria têxtil é um material rico em lignocelulose, tem baixa digestibilidade e é pobre em proteínas e minerais, o que dificulta seu uso 'in natura' na alimentação de ruminantes. Neste tarbalho, objetivou-se avaliar a produtividade e eficiência biológica deste resíduo de algodão na produção do cogumelo comestível Pleurotus sajor-caju e avaliar as alterações promovidas no resíduo para alimentação de ruminantes. Foram realizados 5 tratamentos: T1- 80 por cento de serragem de eucalipto + 20 por cento de farelo de trigo (testemunha); T2- 50 por cento de resíduo de algodão + 50 por cento de serragem; T3- 45 por cento de resíduo + 45 por cento serragem + 10 por cento de farelo; T4- 40 por cento de resíduo + 40 por cento serragem + 20 por cento de farelo e T5- 80 por cento de resíduo + 20 por cento de farelo. O T5 apresentou os melhores resultados para produtividade (22,46 por cento) e eficiência biológica (71,48 por cento) do Pleurotus sajor-caju. O fungo alterou a constituição dos substratos nos estágios de produção do cogumelo, principalmente os constituintes da fibra e agregou N ao substrato. Dessa forma, o uso do resíduo de lixadeira de algodão no cultivo de Pleurotus sajor-caju pode se tornar uma alternativa viável para produção de cogumelo e melhorar a qualidade deste resíduo para alimentação animal.

The waste coming from cotton processing in mills in the textile industry is a lignocellulose-rich material, but has low digestibility, and is poor in proteins and minerals, making it inappropriate for ruminant feeding. This study was intended to evaluate the productivity and biologic efficiency of cotton textile mill waste in the production of the edible mushroom Pleurotus sajor-caju, and to evaluate the alterations brought about in the waste for use in ruminant feeding. Five treatments were undertaken in the following manner: T1- 80 percent eucalyptus sawdust + 20 percent wheat bran (control); T2- 50 percent waste + 50 percent sawdust; T3- 45 percent waste + 45 percent sawdust + 10 percent wheat bran; T4- 40 percent waste + 40 percent sawdust + 20 percent wheat bran and T5- 80 percent waste + 20 percent wheat bran. T5 showed the best results for productivity (22.46 percent) and biologic efficiency (71.48 percent). Fungus altered the constitution of the substrates in the stages of production of the mushroom. Therefore, the use of cotton textile mill waste in the cultivation of Pleurotus sajor-caju may become a viable alternative for mushroom production, and also improve the quality of this waste for use in animal feeding.

Microbial diversity in a bagasse-based compost prepared for the production of Agaricus brasiliensis / Diversidade microbiana em composto a base de bagaço de cana preparado para produção de Agaricus brasiliensis

Edible mushrooms are renowned for their nutritional and medicinal properties and are thus of considerable commercial importance. Mushroom production depends on the chemical composition of the basic substrates and additional supplements employed in the compost as well as on the method of composting. In order to minimise the cost of mushroom production, considerable interest has been shown in the use of agro-industrial residues in the preparation of alternative compost mixtures. However, the interaction of the natural microbiota present in agricultural residues during the composting process greatly influences the subsequent colonisation by the mushroom. The aim of the present study was to isolate and identify the microbiota present in a sugar cane bagasse and coast-cross straw compost prepared for the production of Agaricus brasilienses. Composting lasted for 14 days, during which time the substrates and additives were mixed every 2 days, and this was followed by a two-step steam pasteurisation (55 - 65ºC; 15 h each step). Bacteria, (mainly Bacillus and Paenibacillus spp. and members of the Enterobacteriaceae) were the predominant micro-organisms present throughout the composting process with an average population density of 3 x 10(8) CFU/g. Actinomycetes, and especially members of the genus Streptomyces, were well represented with a population density of 2 - 3 x 10(8) CFU/g. The filamentous fungi, however, exhibited much lower population densities and were less diverse than the other micro-organisms, although Aspergillus fumigatus was present during the whole composting process and after pasteurisation.

Os cogumelos comestíveis são apreciados pelas suas propriedades nutricionais e medicinais e, por essa razão, possuem alto valor econômico. A produção de cogumelos depende da composição química dos substratos básicos, dos suplementos utilizados e da preparação do composto no qual o fungo será cultivado. Considerando-se que os custos de produção precisam ser minimizados, os resíduos agroindustriais representam uma fonte alternativa e econômica para a preparação do composto. A interação da microbiota natural dos resíduos agrícolas durante o processo de compostagem influencia a subseqüente colonização do cogumelo. Visando-se a produção de A. brasiliensis, o presente trabalho objetivou isolar e identificar a microbiota presente no composto preparado a partir de bagaço de cana e capim coast-cross. O processo de compostagem durou 14 dias com reviragens da pilha a cada dois dias, o qual foi seguido de pasteurização (55 65 ºC) em duas fases por 15 h cada. As bactérias (principalmente Bacillus, Paenibacillus e espécies da família Enterobacteriaceae) foram os microrganismos predominantes durante todo o processo com uma densidade populacional média de 3.0 x 10(8) UFC/g. Os actinomicetos, principalmente os do gênero Streptomyces, estiveram bem representados, com uma densidade populacional de 2.0 a 3.0 x 10(8) UFC/g. Os fungos filamentosos foi a classe de microrganismos com menor densidade populacional e menor diversidade, embora a espécie Aspergillus fumigatus esteve presente durante todo o processo de compostagem e também após a pasteurização do composto.

Obtenção de protoplastos do fungo filamentoso Aspergillus ochraceus / Production of protoplasts from the filamentous fungus Aspergillus ochraceus

A obtenção de protoplastos é uma ferramenta importante para a transformação genética de fungos. Neste trabalho foi estudada a influência de fatores como idade micelial, tipo e concentração de enzimas e estabilizadores osmóticos na produção de protoplastos de Aspergillus ochraceus. Os melhores resultados de produção de protoplastos foram obtidos utilizando-se NH4Cl 0,8mol L-1 como estabilizador osmótico, micélio com 24h de crescimento e a combinação de Lysing Enzymes e Meicelase ambas, a 20mg mL-1. Entretanto, bons resultados foram também obtidos com a utilização apenas de Lysing Enzymes.

Production of protoplasts is an important tool for genetic transformation of fungi. A protocol for protoplasts production in Aspergillus ochraceus was developed, evaluating culture aging of mycelium, different commercial enzymes and osmotic stabilizers. The best results were obtained with NH4Cl 0.8mol L-1 as osmotic stabilizer, mycelial age of 24 hours and Lysing Enzymes (20mg mL-1) plus Meicelase (20mg mL-1) as lytic enzymes. Good results were also obtained with Lysing Enzymes alone.

Avaliação da produção de Pleurotus sajor-caju (Fr.) singer utilizando resíduo do beneficiamento têxtil do algodão como substrato / Evaluation of the production of Pleurotus sajor-caju in cotton textille mill waste

Realizou-se um ensaio objetivando investigar a viabilidade da produção do cogumelo comestível Pleurotus sajor-caju (Fr.) Singer em substratos cuja principal fonte de carbono fosse o resíduo do beneficiamento têxtil do algodão. Foram avaliadas duas composições de substrato: C1 (resíduo do beneficiamento têxtil do algodão, farelo de trigo, gesso e calcário) e C2 (resíduo do beneficiamento têxtil do algodão, farelo de trigo, palha de feijão, gesso e calcário). O experimento foi estabelecido em delineamento inteiramente casualizado, com nove repetições por tratamento e os dados de produção e eficiência biológica foram analisados utilizando-se o procedimento ANOVAG do pacote estatístico SAEG. O resíduo do beneficiamento têxtil do algodão, como principal ingrediente do substrato, mostrou-se eficiente para a produção do cogumelo P. sajor-caju, apresentando valores satisfatórios de produtividade (0,56 e 0,55 kg/kg substrato) e eficiência biológica (55,76 e 55,39 por cento), respectivamente para C1 e C2, podendo ser recomendado como alternativa menos onerosa de substrato comercial para a espécie Pleurotus sajor-caju.

The experiment was conducted to investigate the viability of the production of the edible fungus Pleurotus sajor-caju (Fr.) Singer in substrates in which main source of carbon was the cotton textille mill waste. Two substrates compositions were tested: C1 (cotton textille mill waste, wheat bran, plaster and limestone) and C2 (cotton textille mill waste, wheat bran, bean straw, plaster and limestone). A DIC experimental design was used, with nine repetitions for treatment and the production data and biological efficiency were analyzed being used the procedure ANOVAG of the statistical package SAEG. The cotton textille mill waste improvement, as the main ingredient of the substrate, was shown efficient for the production of the mushroom P. sajor-caju, presenting satisfactory values of productivity (0,56 and 0,55 kg/kg substratum) and biological efficiency (55,76 and 55,39 percent), respectively for C1 and C2. These results showed us that cotton textille mill waste, could be recommended as less onerous alternative of commercial substrate for the species Pleurotus sajor-caju.

Isolamento e identificação de bactérias presentes nos solos de cobertura utilizados no cultivo do cogumelo Agaricus blazei Murril / Isolation and identification of bacteria present in the casing layer utilized to the cultivation of the mushroom Agaricus blazei Murril

Este trabalho foi desenvolvido com o objetivo de isolar e identificar bactérias presentes nos solos utilizados como camada de cobertura do cultivo de Agaricus blazei Murril. Foi avaliada a eficiência da desinfestação com vapor d'água e formol nos solos de cobertura. O tratamento com formol apresentou maior redução no número de bactérias na terra de barranco (Latossolo Vermelho distroférrico) e solo de pastagens (Latossolo Amarelo distrófico), enquanto que no solo hidromórfico, oriundo de várzea (Gleissolo Melânico), nenhum dos tratamentos foi eficiente para reduzir a comunidade microbiana. Foram identificadas bactérias do gênero Pseudomonas, Salmonella, Enterobacter e Shigella, dentre outras, denotando que os tratamentos de desinfestação não eliminam bactérias potencialmente benéficas, mas também não eliminam bactérias potencialmente patogênicas. Além disso, os tratamentos de desinfestação também não afetaram a produtividade do cogumelo A. blazei nas condições testadas.

The objective of this work was to quantify and to isolate the bacteria present in casing layer used for the cultivation of the Agaricus blazei Murril. It was evaluated the efficiency of the steam and formaldehyde disinfestation in the casing layer. The formaldehyde disinfestation showed a reduction of the bacteria population on the ravine soils (distroferric Red Latosol) and grazing land soil (distrofic Yellow Latosol), while in the hydromorphic soil coming from lowland (Melanic G]/leysol) none of the treatments used were efficient to reduce the bacteria population. Bacteria of the genera Pseudomonas, Salmonella, Enterobacter, Shigella, among others, were identified in all treatments analysed. It was observed that the disinfestation treatments did not eliminate neither potentially beneficial bacteria nor pathogenic bacteria. There was no significant effect of the disinfestation treatments on productivity of A. blazei mushroom. Moreover, the disinfestation treatments did not affect the productivity of the A. blazei in the studied conditions.

Variabilidade genética de isolados do cogumelo Agaricus blazei por meio de marcadores RAPD / Genetic variability of mushroom isolates Agaricus blazei using markers rapd

Agaricus blazei (Murrill) ss. Heinem. é um cogumelo nativo do Brasil que vem despertando a atenção de vários pesquisadores em todo o mundo, devido às suas propriedades farmacológicas e nutricionais. Este trabalho teve por objetivo, analisar a variabilidade genética de alguns isolados utilizados comercialmente, por meio de marcadores RAPD. Foram analisados nove isolados de A. blazei, provenientes de diferentes regiões do Brasil e, como controle, dois isolados de A. bisporus. Todos eles fazem parte da coleção de fungos do Laboratório de Cogumelos Comestíveis e Medicinais do DBI/UFLA. Diferentes primers aleatórios foram utilizados, gerando um total de 139 bandas polimórficas. Procedeu-se a avaliação de similaridade genética entre os isolados pelo coeficiente de Dice e análise de agrupamento pelo método UPGMA. Os resultados revelaram que dos 9 isolados de A. blazei, 6 (CS1, CS3, CS4, CS6, CS8 e CS9) apresentaram uma alta similaridade genética, sendo considerados isolados de uma mesma origem ou clones. O isolado CS2 foi o que apresentou a maior divergência genética em relação aos demais, seguido dos isolados CS5 e CS7, os quais formaram cada um, um grupo a parte, com médias de 60,6 por cento, 88,7 por cento e 91,3 por cento de similaridade genética, respectivamente.

Agaricus blazei (Murrill) ss. Heinem. is a Brazilian native mushroom which has called the attention of several researchers all over the world due to its nutritional and pharmacological properties. The objective of this study was to evaluate the genetic variability of some isolates commercially used, using RAPD markers. Nine isolates of A. blazei were analyzed, from different regions in the country, and two isolates of the A. bisporus, which served as control group. All of them are part of the collection of mushroom of the Edible and Medicinal Mushroom Laboratory of DBI/UFLA. For RAPD analysis, different random primers were used, generating 139 polymorphic bands. The genetic similarity evaluation was proceeded between the isolates by means of Dice coefficient and grouping analysis through the UPGMA method. The results showed that from the 9 isolates of A. blazei, 6 (CS1, CS3, CS4, CS6, CS8 e CS9) have shown a high genetic similarity and these were considered isolates of the same origin or clones. The CS2 was the isolate which showed the higher genetic divergence in relation to the others, followed by the CS5 and CS7, with averages of 60.6 percent, 88.7 percent and 91.3 percent genetic similarity, respectively.

Genetic characterization of isolates of the Basidiomycete Agaricus Blazei by rapd

The genetic divergence of five isolates of Agaricus blazei was determined based on RAPD data. Results indicate that there is little genetic variability among the commercialized strains and that RAPD is a feasible and low cost technique that can be used to characterize this fungus.