Respuesta superovulatoria en vacas donantes Brahman usando ablación folicular previo a protocolos de superovulación / Superovulatory response in Brahman donor cows using follicular ablation before superovulation protocols

RESUMEN Objetivo. Determinar el efecto de la ablación folicular en el inicio de un protocolo de superovulación (SPO) sobre la respuesta superovulatoria en vacas donantes de raza Brahman. Materiales y métodos. Se utilizaron 20 vacas de raza Brahman, las cuales fueron distribuídas aleatoriamente en dos grupos: Grupo control (G1; n = 10), la sincronización de la onda de crecimiento folicular fue realizada mediante la combinación de estrógenos (2.5 mg, Benzoato de Estradiol) y progestágenos (1 gr, implante intravaginal); cuatro días después se inició el protocolo de SPO con la hormona folículoestimulante porcina (FSHp); y grupo ablación (G2; n = 10), se realizó la ablación folicular y un día después se inició el tratamiento de SPO con FSHp . En los dos grupos la colecta de los embriones se realizó siete días después de la primera inseminación artificial. Resultados. El G2 presentó una mayor proporción de embriones de calidad 1 (p<0.01) en comparación con el G1 (68.60%, 31.22%), mientras que los animales del grupo G1 presentaron una mayor proporción de embriones de calidad 2 (43.04%, 18.60%, p<0.01). Para las variables total de estructuras colectadas, y total de embriones transferibles, no se observaron diferencias significativas (p>0.05). Conclusiones. La ablación folicular aumentó el porcentaje de embriones de calidad 1, sugiriendo que la implementación de esta técnica, como estrategia para sincronizar el inicio de una nueva onda de crecimiento folicular en tratamientos de SPO, mejora la calidad de los embriones producidos en vacas donadoras Brahman.

ABSTRACT Objective. The objective of this study was to determine the effect of follicular ablation at the beginning of a superovulation protocol (SOP) on the superovulatory response of Brahman donor cows. Materials and methods. Twenty Brahman cows were used, randomly distributed in two groups: control group (G1, n = 10), synchronization of the follicular growth wave was performed by the combination of estrogens (2.5 mg, estradiol benzoate) and progestagens (1 gr intravaginal implant); four days after starting the SOP with porcine follicle stimulating hormone (FSHp); and the ablation group (G2, n = 10), follicular ablation was performed and one day after, the SOP treatment with FSHp was initiated. In both groups, embryo collection was performed seven days after the first artificial insemination. Results. The G2 had a higher proportion of quality 1 embryos (p<0.01) compared to G1 (68.60% vs. 31.22%), while animals of G1 group had a higher proportion of quality 2 embryos (43.04% vs. 18.60%, p<0.01). For the total of structures collected and the total of transferable embryos, no significant differences were observed (p>0.05). Conclusions. Follicular ablation increased the percentage of quality 1 embryos, suggesting that the implementation of this technique, as a strategy to synchronize the beginning of a new wave of follicular growth when using SOP, improve embryo quality in Brahman donor cows.

Effect of seasonality on the quality of bovine oocytes selected by the brilliant cresyl blue method / Efecto de la estacionalidad en la calidad de los ovocitos seleccionados por el método de azul cresil brillante / Efeito da sazonalidade na qualidade dos ovócitos bovinos selecionados pelo método azul cresil brilhante

Abstract Background: The brilliant cresyl blue (BCB) staining is a non-invasive test to select the best-suited oocytes for embryonic development. This makes it a useful tool to select best-quality oocytes at the times of the year when there is forage restriction. Objective: To evaluate the effect of seasonality on the nuclear maturation and quality of oocytes selected by the BCB test. Methods: The cumulus-oophorus complexes (COCs) were obtained in summer and winter of 2010 and 2011. Selected COCs were maintained for 90 min at 38.5 °C in a CO2 incubator, in TCM 199 medium containing 10% fetal bovine serum and antibiotics, and supplemented with 26 µM brilliant cresyl blue. Afterwards, they were divided according to the ooplasm staining (BCB+ -blue; BCB− -unstained). Subsequently, COCs were matured for 22 h. Nuclear maturation was evaluated at 22 h of culture. Results: The proportion of BCB− oocytes was higher in the winter of 2010, but there was no increase in this group in the winter of 2011. The percentage of oocytes that reached metaphase II was higher in control and BCB+ groups in relation to oocytes from BCB− group. Conclusion: The season of the year influences the percentage of oocytes best suited for embryonic production in situations in which oocyte donors receive pasture-based feeding, since the method was effective in determining the effect of seasonality on the competence of bovine oocytes to reach nuclear maturation.

Resumen Antecedentes: La tinción con azul cresil brillante (BCB) es un método no invasivo para seleccionar ovocitos aptos para el desarrollo embrionario. Por tanto, es una herramienta útil para selecionar los ovocitos de mejor calidad en temporadas de restricción de forraje. Objetivo: Evaluar el efecto de la estacionalidad sobre la maduración nuclear y calidad de los ovocitos seleccionados por el test BCB. Métodos: Los complejos cumulus-oophorus (CCOs) fueron obtenidos durante el verano y el invierno de 2010 y 2011. Los CCOs seleccionados se mantuvieron durante 90 min a 38,5 oC en una incubadora de CO2 en un medio TCM 199 con 10% de suero fetal bovino y antibióticos, suplementado con 26 µM de azul cresil brillante. Luego se separaron según el color del citoplasma (BCB+ -azul y BCB− -incoloro). Posteriormente, los CCOs se maduraron durante 22 h. La evaluación de la maduración nuclear se realizó a las 22 h de cultivo. Resultados: La proporción de ovocitos BCB− fue mayor en el invierno de 2010, pero no hubo un aumento de ese grupo en el invierno de 2011. El porcentaje de ovocitos que alcanzaron la etapa de metafase II fue mayor en el grupo control y BCB+ con respecto al grupo BCB−. Conclusión: La estación del año influye en el porcentaje de ovocitos más aptos para la producción de embriones en situaciones donde las donadoras de ovocitos reciben alimentación a base de pastos, ya que este método fue eficaz para determinar el efecto de la estacionalidad en la competencia de ovocitos bovinos en alcanzar la maduración nuclear.

Resumo Antecedentes: O método do azul cresil brilhante (BCB) não é invasivo e seleciona ovócitos mais aptos ao desenvolvimento embrionário. Portanto é ferramenta útil para selecionar ovócitos de melhor qualidade em épocas do ano que ocorre restrição de pastagem. Objetivo: Avaliar o efeito da sazonalidade sobre a maturação nuclear e a qualidade dos ovócitos selecionados pelo teste BCB. Métodos: Os complexos cumulus oophorus (CCOs) foram obtidos no verão e inverno de 2010 e 2011. Os CCOs selecionados foram mantidos por 90 min, a 38,5 °C, em incubadora de CO2, em meio TCM 199 contendo 10% de soro fetal bovino e antibióticos, e suplementado com 26 µM de azul cresil brilhante. Em seguida, estes foram divididos de acordo com a coloração do citoplasma (BCB+ -azuis e BCB− -incolores). Então os CCOs foram maturados durante 22 h. A avaliação da maturação nuclear foi realizada às 22 h de cultivo. Resultados: A proporção dos ovócitos BCB− foi maior no inverno de 2010, mas não houve aumento desse grupo no inverno de 2011. O percentual de ovócitos que atingiu o estágio de metáfase II foi maior no controle e no grupo BCB+ em relação ao grupo BCB−. Conclusão: A estação do ano influencia o percentual de ovócitos mais aptos a produção de embriões, em situações onde as doadoras de ovócitos recebem alimentação baseada em pastagens, já que o método se mostrou efetivo para determinação do efeito da sazonalidade sobre a competência de ovócitos bovinos em atingirem a maturação nuclear.