Canine visceral leishmaniosis in an area of fishing tourism, Bonito Municipality, Mato Grosso do Sul, Central-West Brazil / Leishmaniose visceral canina em área de turismo pesqueiro, município de Bonito, Mato Grosso do Sul, Centro-Oeste do Brasil

ABSTRACT: The study aimed to investigate Leishmania infection in a population of dogs (92 animals) in a fishing area of Bonito Municipality, and evaluate comparatively the serological methods used, immunoenzymatic assay (ELISA), indirect immunofluorescence antibody test (IFAT), and rapid Dual Path-Platform test (DPP®). Blood and aspirate of bone marrow samples were used and parasitological investigation was also performed, such as parasite isolation in Neal, Novy, Nicolle (NNN) medium culture, Woo technique, Giemsa stained smears and specific identification by polymerase chain reaction (PCR). IFAT revealed 56/92 seropositive, the ELISA 8/92 and the DPP®41/92. Regarding the agreement between the serological tests by the Kappa index, there was a slight agreement between ELISA/IFAT and ELISA/DPP®, and fair agreement in IFAT/DPP®. The NNN culture was positive in three out of 21 dogs, and identified by PCR as Leishmania infantum chagasi. No samples were positive by the Woo technique. Our results showed low agreements between the serological tests recommended by the Brazilian Ministry of Heath, and it is necessary to associate other diagnostic techniques, such as parasitological tests and PCR, to increase the sensitivity for canine visceral leishmaniosis diagnosis, mainly regarding asymptomatic dogs in endemic areas.

RESUMO: O estudo teve como objetivo verificar a infecção por Leishmania em uma população de cães (n=92 animais) de uma área de turismo de pesca no município de Bonito e avaliar comparativamente os métodos sorológicos utilizados, ensaio imunoenzimático (ELISA), reação de imunofluorescência indireta (RIFI) e teste rápido de plataforma dupla (DPP®). Testes parasitológicos também foram realizados, como o isolamento do parasita em meio de cultura Neal, Novy, Nicolle, técnica de Woo, esfregaços em lâminas coradas com Giemsa e identificação específica pela reação em cadeia da polimerase (PCR). A RIFI revelou sorologia positiva de 56/92, ELISA 8/92 e DPP®41/92. Quanto à concordância entre os testes sorológicos pelo índice Kappa, houve um ligeiro acordo entre ELISA/RIFI e ELISA/DPP®, e uma concordância razoável entre RIFI/DPP®. A cultura NNN foi positiva em três cães, e identificada por PCR como Leishmania infantum chagasi. Nenhuma amostra foi positiva pela técnica de Woo. Nossos resultados mostraram baixas concordâncias entre os testes sorológicos recomendados pelo Ministério da Saúde, sendo necessário associar a outras técnicas de diagnóstico, como testes parasitológicos e PCR, para aumentar a sensibilidade ao diagnóstico de leishmaniose visceral canina, principalmente, com relação aos cães assintomáticos em áreas endêmicas.

Behavior study of the doped castor bean polymer rod with bioactive glass and hidroxyapatite in mice femur medullary canal

Abstract Purpose To evaluate the polymer doped rods behavior with bioactive glass and hydroxyapatite for possible application as a fracture fixing method. Methods Twenty eight Rattus norvegicus Wistar underwent bone defect for access to the femoral medullary canal and distributed into three experimental groups: group A - doped castor bean polymer with bioactive glass; group B - castor bean polymer and; group C - castor bean polymer doped with bioactive glass and hydroxyapatite. After 15 and 60 evaluation days, the femurs were removed and sent for histology and scanning electron microscopy. Results Initially mild and moderate inflammatory infiltrate is observed that decreases as time goes by, and the presence of connective tissue capsule around the graft in all groups. Regarding the biomaterials resorption little was observed. The implanted rods did not favor the osteoconductive process in the femoral medullary canal which was observed only in the C15 group. Conclusions The association of castor bean polymer, bioactive glass and hydroxyapatite was biocompatible and osteointegrable. The osteoconductive only occurred in the presence of hydroxyapatite and bioactive glass (C15 Group) and little biodegradation was observed.

Antifungal potential and phytochemistry of Tetrapterys multiglandulosa CAV aerial parts / Potencial antifúngico e fitoquímica das partes aéreas de Tetrapterys multiglandulosa CAV

Tetrapterys spp. are considered toxic to grazing animals owing to the presence of a poisonous constituent cardiotonic glycoside. However, other chemicals within the plant have allelopathic, bactericidal, and fungicidal activities. The objective of this study was to search for natural products as alternatives in the control of plant pathogenic fungi, which diminish the crop productivity and cause damage to animal and human health. The phytochemical content of the stems and leaves was investigated alongside the fungitoxic potential of aqueous and ethanol extracts from aerial parts of T. multiglandulosa on Fusarium moniliforme and F. graminearum. The leaves and stems were obtained from 20 arrays of T. multiglandulosa from Batayporã City, south of Mato Grosso do Sul, and classified as young and mature. The botanical material was oven dried, crushed, and its aqueous and 20% ethanol extracts were used for qualitative and quantitative phytochemical assays. For in vitro tests of fungal growth inhibition, extract concentrations of 200, 400, 800, 1600, and 2000 µg L-1 were assayed, with two control groups. Phytochemical tests from aqueous and ethanol extracts of young and mature leaves indicated the presence of phenolic compounds, tannins, flavonoids, saponins, alkaloids, and cardiotonic glycosides. The aqueous extract of young leaves showed potential fungicidal activity against F. graminearum, with values ranging from 21.25% to 33.53% colony growth inhibition.

As espécies do gênero Tetrapterys são consideradas plantas tóxicas para animais de pastagem e um dos constituintes químicos responsáveis por estas intoxicações são os heterosideos cardiotônicos os quais também possuem atividade alelopática, bactericida, fungicida, dentre outras. Estes fatos e a busca por produtos naturais que possam ser empregados na agricultura familiar, como uma alternativa, no controle fungos fitopatogênicos que além de diminuir a produtividade podem causar danos à saúde animal e humana nos levou a investigar o potencial fungitóxico do extrato aquoso e etanólico das partes aéreas de Tetrapterys multiglandulosa sobre Fusarium moniliforme e F. graminearum e a determinar os fitoconstituintes. As folhas e caules foram obtidas de 20 matrizes de T. multiglandulosa na região de Batayporã, Mato Grosso do Sul e classificadas em jovens e adultas. O material botânico foi seco em estufa, triturado e os extratos aquoso e etanólico a 20% submetidos aos ensaios fitoquímicos quali e quantitativos. No teste in vitro de atividade de inibição de crescimento fúngico os extratos foram diluídos nas concentrações de 200, 400, 800, 1600 e 2000 µg mL-1 utilizando-se duas testemunhas. Testes fitoquímicos a partir de extratos aquosos e etanólicos de folhas e caules novos e maduros indicou a presença de compostos fenólicos taninos, flavonóides, alcalóides, saponinas e glicósideos cardiotônicos. O extrato aquoso das folhas jovens apresentou maior potencial fungicida contra F. graminearum com 33,53% de inibição de crescimento da colônia.

Effects of platelet-rich plasma gel on skin healing in surgical wound in horses / Efeitos do gel de plasma rico em plaquetas na cicatrização de feridas cirúrgicas na pele de cavalos

PURPOSE: To establish a low-cost method to prepare platelet-rich plasma (PRP) and evaluates the potential of platelet derived factors to enhance wound healing in the surgical wounds in equine. METHODS: To obtain a PRP gel, calcium gluconate and autologous thrombin were added to platelet-rich plasma. For the tests six saddle horses were used and two surgical incisions were made in each animal. Wounds were treated with PRP gel or untreated. Sequential wound biopsies collected at Treatment 1: at days 5 and 30 and Treatment 2: at days 15 and 45 post wounding permitted comparison of differentiation markers and wound repair. RESULTS: The optimal platelets enrichment over 4.0 time's baseline values was obtained using 300 g for 10 min on the first centrifugation and 640 g for 10 min on the second centrifugation. CONCLUSION: Wounds treated with PRP gel exhibit more rapid epithelial differentiation and enhanced organization of dermal collagen compared to controls in equine.

OBJETIVO: Estabelecer um método econômico na preparação de plasma rico em plaquetas (PRP) e avaliar se os fatores derivados destas plaquetas aceleram a cicatrização de feridas cirúrgicas em cavalos. MÉTODOS: Gluconato de cálcio e trombina autógena foram adicionados ao PRP para a obtenção do gel de PRP. Foram usados seis cavalos de sela, cada um dos quais sofreu duas incisões cirúrgicas. Uma destas incisões foi tratada com gel de PRP e a outra suturada de maneira tradicional (controle). A biópsia das feridas foi coletada de maneira seqüencial; Tratamento 1. nos dias 5 e 30 e Tratamento 2. nos dias 15 e 45 do período pós-operatório permitindo uma comparação na diferenciação epitelial e no reparo das feridas. RESULTADOS: O enriquecimento das plaquetas obtido através de uma primeira centrifugação usando 300 g por 10 minutos e uma segunda 640 g por 10 minutos acelerou quatro vezes a reparação tecidual em relação ao controle. CONCLUSÃO: As feridas tratadas com gel de PRP apresentaram uma mais rápida diferenciação epitelial e acelerou a organização do colágeno da derme comparado ao grupo controle em cavalos.

Experimental model of pulmonary carcinogenesis in Wistar rats

PURPOSE: To elaborate an experimental model of pulmonary carcinogenesis in Wistar rats. METHODS: Male Rattus norvegicus albinus, Wistar lineage was carried through an intra-pulmonary instillation of the Benzo[a]pyrene (B[a]P) dilution in alcohol 70 percent, a polycyclic aromatic hydrocarbon widely known by its power of tumoral induction. Three experimental groups had been formed with 08 animals each: Control Group (Alcohol 70 percent); B[a]P Group 10 mg/kg; e B[a]P Group 20mg/kg, submitted to euthanasia 08, 10, 12 and 14 weeks after the experimental procedure. The pulmonary sections had been colored by hematoxilin-eosin (HE) and submitted to the morphometrical analysis to describe the tissue alterations. RESULTS: The presence of diffuse inflammatory alterations was observed in all groups, however, at the analysis of the pulmonary tissue of the experimental groups, it had been observed hyperplasic alterations (BALT hyperplasia), and in one of the animals of the experimental group 20mg/kg (12 weeks), it was noticed the presence of cellular epithelial tracheal pleomorphism, suggesting the adenocarcinoma formation in situ. CONCLUSION: The main secondary alterations to the intra-pulmonary instillation of B[a]P in Wistar rats were: cellular proliferation, inflammatory alterations of several degrees and nodular lymphoid hyperplasias. The association of an activator agent of the pulmonary metabolic reply is necessary to establish the ideal reply-dose to the development of the lung cancer.

OBJETIVO: Elaborar um modelo experimental de carcinogênese pulmonar em ratos wistar. MÉTODOS: Rattus norvegicus albinus, linhagem Wistar foram submetidos a instilação intra-pulmonar da diluição em álcool 70 por cento de Benzo[a]pireno (B[a]P), um hidrocarboneto aromático policíclico amplamente conhecido por seu poder de indução tumoral. Foram formados três grupos experimentais com 08 animais cada: Grupo Controle (álcool 70 por cento); Grupo B[a]P 10 mg/kg; e Grupo B[a]P 20mg/kg, submetidos a eutanásia 08, 10, 12 e 14 semanas após o procedimento experimental. As secções pulmonares foram coradas por HE e submetidas a análise morfométrica para descrição das alterações teciduais. RESULTADOS: em todos os grupos observou-se a presença de alterações inflamatórias difusas, porém na análise do tecido pulmonar dos grupos experimentais, observou-se alterações hiperplásicas (hiperplasia de BALT), e em um dos animais do grupo experimental 20mg/kg (12 semanas) notou-se a presença de pleomorfismo celular epitelial traqueal, sugerindo a formação de adenocarcinoma in situ. CONCLUSÃO: as principais alterações secundárias à instilação intra-pulmonar de B[a]P em ratos Wistar foram: proliferação celular, alterações inflamatórias de diversos graus e hiperplasias nodulares linfóides. A associação de um agente ativador da resposta metabólica pulmonar pode ser necessária para estabelecimento da dose-resposta ideal ao desenvolvimento do câncer de pulmão.

Histological study of tendon healing in malnourished Wistar rats treated with ultrasound therapy

PURPOSE: To investigate the effects of therapeutic ultrasound on the healing of tendon injuries in malnourished rats. METHODS: After the intended nutritional states had been attained, the animals (N=36) were distributed into three groups, named: G1(N=12), control group; G2(N=12), malnourished rats treated with 3 MHz ultrasound at an intensity of 0.5 W/cm²; and G3 (N=12), normal animals treated with 3 MHz at 0.5 W/cm². The injuries were induced by means of an operation to expose the heel tendon and crush it using Allis forceps. RESULTS: The data obtained relating to leukocyte counts, fibroblasts, vessel neoformation, fibrosis and collagen were subjected to statistical treatment using analysis of variance (ANOVA) and Student's t test. Results of p < 0.05 were obtained for fibrosis and collagen. CONCLUSION: The ultrasound was shown to be effective in repairing the tendon, even in malnourished animals whose healing process was retarded.

OBJETIVO: Investigar os efeitos do ultrassom terapêutico na cicatrização de lesões tendíneas em ratos desnutridos. MÉTODOS: Após ser constatado o estado nutricional proposto, os animais (N=36) foram distribuídos em três grupos, denominados: G1(N=12) grupo controle, G2(N=12) desnutrido tratado com ultra-som 3 MHz a 0,5 w/cm² de intensidade e G3(N=12) animais normais tratados com 3 MHz a 0,5 w/cm². As lesões foram induzidas através de procedimento operatório para exposição e esmagamento com pinça Allis, do tendão calcâneo. RESULTADOS: Os dados obtidos em relação à quantidade de leucócitos, fibroblastos, neoformações de vasos, fibrose e colágeno foram submetidos ao tratamento estatístico pela análise de variância (ANOVA) e teste "t" obtendo-se p < 0,05 para fibrose e colágeno. CONCLUSÃO: O ultra-som mostrou-se eficaz no reparo tendíneo, mesmo nos animais desnutridos e com processo de cicatrização retardado.

Effect of 650 nm low-power laser on bone morphogenetic protein in bone defects induced in rat femors

PURPOSE:To investigate the influence of 650 nm GaAlAs laser on the action of bone morphogenetic protein (BMP) in bone defects produced in rat femurs. METHODS: The sample consisted of 12 male albino Wistar rats (Rattus norvegicus). The animals were randomly divided into four experimental groups. After undergoing anesthesia, the fur was removed from the lateral face of the right thigh and surgical dissection was performed to view the femur region. A bone defect was created using a spherical diamond-tipped drill bit. In groups 1 and 2, the defect was filled with a paste of Gen-Tech bone-inducing substance. The animals were treated with GaAlAs laser, at a predetermined dose of joules/cm² for 80 seconds, over an area of 1 cm². Groups 2 and 4 were used as controls. Bone samples were removed to perform histological procedures and morphometric analyses on the 7th, 14th and 21st days after the operation. The results obtained were subjected to statistical analysis using ANOVA variance according to two criteria, with four repetitions, followed by the post hoc t test. The rejection level for the nullity hypothesis was 0.05 or 5 percent (alpha <= 0.05). RESULTS: In comparisons between G1, G2, G3 and G4, p = 0.024 was observed. In statistical comparisons using the t test for paired samples, only G1 vs. G4 presented a statistically significant result (p = 0.021). CONCLUSION: The association of low-power laser application and Gen-Tech bone-inducing substance achieved a better result than laser application alone or BMP use alone.

OBJETIVO: Este trabalho tem como objetivo estudar comparativamente a influência do laser AsGaAl de 650nm sobre a ação das proteínas morfogenéticas ósseas( BMP) em defeitos ósseos produzidas em fêmures de ratos. METODOLOGIA: Utilizamos uma amostra composta por 12 ratos machos (Rattus norvegicus), de linhagem Wistar albino, mantidos confinados em caixas com temperatura ambiente constante e iluminação adequada. Os animais foram divididos aleatoriamente em 4 grupos experimentais. Após o procedimento anestésico, foi realizada a retirada dos pelos da face lateral da coxa direita, seguida de procedimento cirúrgico para permitir a visualização da região. Foi realizado um defeito ósseo empregando brocas diamantadas do tipo esférica. Nos grupos 1 e 2 o defeito foi preenchido com uma pasta formada por substância osteoindutora Gen - Tech. Os animais foram tratados com o Laser GaAlAs, com dose pré-determinada de 4 joules/cm² e tempo de 80 segundos para uma área de 1cm². Os grupos 2 e 4 foram adotados como grupo-controle. As amostras do osso foram retiradas para realização de procedimento histológico e análise morfométrica nos 7°,14°e 21° dias de pós-operatório. Os resultados obtidos foram submetidos à análise estatística pela variância ANOVA segundo dois critérios, com quatro repetições. Seguido do post hoc test de t teste, com nível de rejeição da hipótese de nulidade de 0,05 ou 5 por cento (alfa <= 0,05). RESULTADOS: Na comparação entre G1, G2, G3 e G4, observou-se: (P = 0,024) e durante a comparação estatística através do teste "t" para amostras pareadas apenas o cruzamento entre Grupo 1 vs. o Grupo 4 apresentou, resultado estatisticamente significante com (p=0,021). CONCLUSÃO: Concluímos que a associação da aplicação do laser de baixa potência e a substância osteoindutora Gen Tech alcançou melhor resultado do que do que a aplicação de laser ou apenas o uso das BMPs.

Use of castor oil polyurethane in an alternative technique for medial patella surgical correction in dogs

PURPOSE: Comparative morphologic study of utilization of castor oil polymer in dogs joints, as an alternative technique to autogenous graft, in surgical correction of medial patella luxation. METHODS:Twelve adult dogs, of both sexes, were randomly allocated to two different groups of six animals each. Group I (biopolymer) consisted of the deepening of the right femoral troclea, with the implantation of the biopolymer prothesis, and compared to group II (control) which consisted of the conventional trocleoplastia technique with wedged cut of the left femoral troclea. The dogs were sacrified after 30 or 90 days and the anathomic peaces were analyzed macro and microscopically. Qui square and Wilcoxon tests were used for the statistic analyses of the results, considering probability of 5 percent. RESULTS: It was not observed bony integration on the castor oil polymer group. There was resorption of the graft along experimental period and absence of inflammatory cells in the studied periods. CONCLUSION: Castor oil polymer assisted cicatrisation process, was biocompatible without inflammation, and it can be used in joints as an alternative for bony filling.

OBJETIVO: Estudo morfológico do implante da prótese de polímero de mamona em articulações de cães, como técnica alternativa ao enxerto ósseo autógeno na correção cirúrgica da luxação medial de patela. MÉTODOS: Doze cães adultos, de ambos os sexos, foram distribuídos aleatoriamente em dois grupos de 6 animais. No grupo I (poliuretano) foi feito o aprofundamento da tróclea femoral direita com prótese de polímero de mamona, que foi comparado com o grupo II (controle) sendo feita a trocleoplastia por ressecção em cunha da tróclea femoral esquerda. Os animais foram sacrificados após 30 e 90 dias e as peças anatômicas foram avaliadas macro e microscopicamente. O teste do quiquadrado e o teste não-paramétrico de Wilcoxon foram utilizados para a análise estatística dos resultados. Fixou-se em 5 por cento, o nível de rejeição da hipótese de nulidade. RESULTADOS: Não foi observada interação óssea (osteointegração) no grupo polímero de mamona. Houve reabsorção do enxerto ao longo do período experimental e ausência de células inflamatórias nos períodos analisados. CONCLUSÃO: O polímero de mamona auxiliou no processo cicatricial, foi biocompatível sem presença de inflamação, podendo ser usado em articulações como uma alternativa para o preenchimento ósseo.

Efeito da Casearia sylvestris no reparo ósseo com matriz óssea bovina desvitalizada em ratos / Effect of Casearia sylvestris on bone repair with devitalized bovine bone matrix in rats

Objetivo: Estudar o efeito do decocto 5 por cento de Casearia sylvestris no reparo de defeito femoral preenchido com matriz óssea bovina desvitalizada. Métodos: Vinte e quatro ratos Wistar, machos e adultos foram distribuídos aleatoriamente em dois grupos com 12 animais. Defeitos femorais bilaterais, com 2mm de diâmetro, foram produzidos na diáfise femoral e preenchidos com matriz óssea bovina desvitalizada. O grupo experimento recebeu 1mL de decocto 5 por cento de Casearia sylvestris, por gavagem, durante o período de seguimento; o grupo controle recebeu 1mL de água destilada. Os animais foram sacrificados com 10, 20 ou 30 dias e o tecido ósseo presente na área operatória quantificado. Aplicou-se o teste "t" de Student para comparação das médias de formação óssea obtidas em cada período estudado (10, 20 e 30 dias), em nível de significância de 5 por cento (p < 0,05). Resultados: A neoformação óssea foi menor nos animais do grupo experimento nos seguimentos de 10 (p = 0,0000), 20 (p = 0,0049) e 30 dias (p = 0,0003). Conclusão: O decocto 5 por cento de Casearia silvestris promove atraso na cronologia do processo de reparação óssea em defeitos ósseos preenchidos com matriz óssea bovina desvitalizada, em ratos, na dose e período estudados.