RESUMEN
Se purificaron partículas de Dane, a partir de sueros de pacientes virémicos del area metropolitana de Buenos Aires (Argentina) y se extrajo HBV DNA. El HBV DNA fué clonado en el vector pUC18, amplificado en Escherichia coli DH5 alpha F'. Los plasmidos fueron aislados y el contenido de los insertos de HBV DNA se analizó por tratamiento con diversas enzimas de restricción para estabelecer las características genómicas clonadas. Se seleccionaron tres plasmidos y sus estructuras fueron determinadas, identificandolos como: pHB4, pHB7 y pHB20. Los insertos presentes en cada uno fueron secuenciados y el resultado incorporado a la base de datos Gen Bank, con los siguientes números de código: PHB4P3= U33188; PHB4P5= U33189; PHB7P3=U33190; PHB7P5=U33191 y PHB20=U33187. Todos los insertos pertenencen a genotipos A, pHB4 y pHB20 tienen una estrecha homología, que comparten con el L 13994, de circulación americana. pHB7 presenta una marcada diferencia con los clones pHB4 y pHB20 y una discreta relación con el agente m57663, aislando originalmente en Filipinas. pHB4 muestra una mutación en el nucleótico T3182(Leu en la región preS1, que cambia Pro. por Leu. Esta mutación est ausente en 125 secuencias estudiadas, que mantienen por lo menos un 65 por ciento de homología con los clones aislados en el area metropolitana de Buenos Aires. Esta selección se efectuó en el banco National Center for Biotechnology information (NCBI) utilizando el algoritmo Blast. El an lisis de estos clones no reveló la presencia de mutantes del tipo e o de escape HBV DNA, con este tipo de variantes han sido descriptas recientemente en esta area geografica por López y col. (Ref.7). Si bien los genotipos aislados pertencen al tipo A, es de importancia tener en cuenta la manifesta divergencia de por lo menos uno de los clones estudiados.
Asunto(s)
Humanos , ADN Viral/genética , Heterogeneidad Genética , Vectores Genéticos , Virus de la Hepatitis B/genética , Secuencia de Aminoácidos/genética , Argentina , Elementos Transponibles de ADN/genética , ADN Viral/análisis , Genotipo , Virus de la Hepatitis B/aislamiento & purificación , Datos de Secuencia Molecular , Plásmidos , Población UrbanaRESUMEN
We report a new genomic variation of Adenovirus 7, associated to severe infections of the lower respiratory tract isolated during September 1990, from children under 3 years of age and living in Buenos Aires city. The restriction analysis with the BamHI, BglI, BglII and SmaI restriction endonucleases demonstrated that the new variation is highly related to the recently described Adenovirus 7h.