RESUMEN
Honey can be used for the treatment of wounds, sores and skin burns, but it might be contaminated with Clostridium botulinum spores. In order to evaluate Costa Rican raw honey samples, the detection of neurotoxin gene sequences (corresponding to the bacterium) C. botulinum A, B, E and F was done with the polymerase chain reaction. A total of 64 raw honey samples, coming from different Costa Rican sites were analyzed. Reference C. botulinum strains type A (ATCC 19397), type B (ATCC 7949), type E (ATCC 17786) and type F (ATCC 25764) were used as templates for testing the effectivity of the method. The process consisted in culturing the honey samples in prereduced triptose-peptone-glucose-yeast extract media (TGPY)for 5 days. After this, the bacteria lysate obtained was used for PCR. The amplicons, product of the reaction, were visualized using agarose gel 2%. From the 64 honey samples analyzed, none produced positive results in the PCR, since no amplicons were obtained. Even though, all the reference C. botulinum strains used as controls were visualized and showed the effectivity of the extraction method and of the PCR used. The results obtained show promising therapeutic uses for honey from Costa Rica, but further evaluations shall be done in order to be sure of the safety of the product.
La miel de abeja es un producto que podría ser utilizado en el tratamiento de heridas, abrasiones y quemaduras de piel; no obstante, podría estar contaminada con esporas de C. botulinum. Con el fin de evaluar muestras de miel de origen costarricense, se detectó las secuencias de genes productores de neurotoxina correspondientes a C. botulinum tipos A, B, E y F utilizando la técnica de PCR (reacción de polimerasa en cadena). 64 diferentes muestras de miel, provenientes de diversos sitios costarricenses, fueron analizadas. Con el fin de evaluar la efectividad del método, se utilizó cepas de referencia tipos A (ATCC 19397), B (ATCC 7949),E (ATCC 17786)y F (ATCC 25764). El procedimiento consistió en cultivar las muestras de miel en caldo triptona peptona glucosa levadura prerreducido, por cinco días. Luego de esto, se obtuvo un lisado bacteriano, el cual fue utilizado para la técnica de PCR. Los amplicones producto de la reacción fueron visualizados utilizando geles de azarosa al 2%.De las 64 muestras de miel analizadas, ninguna produjo resultados positivos en el PCR. No obstante, todas las cepas de referencia usadas como controles produjeron bandas, que demuestran la efectividad del método de extracción utilizado y de la técnica en sí. Los resultados obtenidos demuestran la ausencia de contaminación por C.botulinum de la miel de abeja de origen costarricense, no obstante,deben realizarse evaluaciones adicionales para garantizar la seguridad del producto.