Physiological gait test: an effective method for analyzing balance, locomotion, and neuromuscular disorders in rats and a comparison to the elevated beam test / Teste de marcha fisiológica: um método eficaz para analisar distúrbios de equilíbrio, locomoção e neuromusculares em roedores

The evaluation of animal locomotor activity is a behavioral tool widely used to measure the mechanisms underlying a particular disease, disorder, or injury, as well as the effects of exposure to a xenobiotic. The elevated beam test is one of the most used tests in rodents to assess balance and motor coordination. Despite being inexpensive and utilizing a simple apparatus, the high beam test requires a long period of animal training and habituation. The development and characterization of an alternative test, namely the gait test, has the potential to circumvent the time and effort required for animal training, deeming it an effective, inexpensive, and fast method for the analysis of behaviors that are comparably assessed by the high beam test. Therefore, the present study focused on determining the effectiveness and feasibility of the gait test for assessing rodent locomotion and balance as a replacement for the elevated beam test. For this purpose, male rats were divided into three groups: one control group exposed to a saline solution (NaCl 0.9%) and two experimental groups exposed to a single dose of either 0.2 or 1.0 mg/kg of ivermectin intraperitoneally for induction of locomotor disturbance. The high beam and gait tests were performed 15 min and 24 h after drug administration. Results show that the experimental groups had difficulty performing the tasks of either test at both time points analyzed compared to the control groups. At the high beam, experimental animals had trouble maintaining balance and walking. At the gait test, experimental animals showed alterations in gait, which were quantitated by: (a) shortening of step length, (b) decrease of stride, (c) altered step symmetry, and (d) altered stride area. Such results are indicative of compensatory efforts and were comparable between both tests. Altogether, the data indicate that the gait test meets all requirements for assessing motor coordination in rodents. The gait test is therefore validated as a complement to the elevated beam test for the study and analysis of neurodegenerative impairment and other disorders involving neuromuscular disturbances.(AU)

A avaliação da atividade locomotora animal é uma ferramenta comportamental bastante utilizada para mensurar os mecanismos subjacentes a uma determinada doença, distúrbio ou lesão e efeitos da exposição a um xenobiótico. Um dos testes mais utilizados em roedores para avaliar o equilíbrio e coordenação motora é o teste da trave elevada que, apesar de ser um teste barato e que exige um aparato simples, é necessário um longo período de treino e habituação dos animais. O desenvolvimento e caracterização de um teste alternativo, chamado de teste da marcha, tem o potencial de contornar o tempo e o esforço necessários ao treino dos animais, considerando-o um método eficaz, barato e rápido para a análise de comportamentos avaliados comparativamente pelo alto teste de feixe. Portanto, o presente estudo concentrou-se em determinar a eficácia e viabilidade do teste de marcha para avaliação da locomoção e equilíbrio de roedores em substituição ao teste da trave elevada. Para isso, ratos machos foram divididos em 3 grupos, sendo 1 grupo controle exposto à solução salina (NaCl 0,9%) e 2 grupos experimentais expostos à dose única de 0,2 e 1,0 mg/kg de ivermectina por via intraperitoneal para indução da alteração locomotora. Os testes de trave elevada e marcha foram realizados 15 min e 24 h após a administração da droga. Os resultados mostram que os grupos experimentais tiveram dificuldade em realizar as tarefas de qualquer teste em ambos os momentos analisados em comparação com os grupos de controle. Na trave elevada, os animais experimentais tiveram dificuldade em manter o equilíbrio e andar. No teste de marcha, os animais experimentais apresentaram alterações na marcha, que foram quantificadas por: (a) encurtamento do comprimento da passada, (b) diminuição da passada, (c) alteração da simetria da passada e (d) alteração da área da passada. Tais resultados são indicativos de esforços compensatórios e foram comparáveis entre os dois testes. Em conjunto, os dados indicam que o teste de marcha atende a todos os requisitos para avaliação da coordenação motora em roedores. O teste de marcha é, portanto, validado como um complementar para o teste da trave elevada e para o estudo e análise de comprometimento neurodegenerativo e outros distúrbios envolvendo distúrbios neuromusculares.(AU)

Perinatal exposure to an aromatase inhibitor glyphosate-base herbicide reduced male and female social behavior in juvenile age and the sexual behavior at adult female rats / Exposição perinatal ao inibidor da aromatase a base de glifosato reduz o comportamento social de machos e fêmeas e o comportamento sexual de ratas

Objectives: The herbicide glyphosate, a pesticide used in agriculture to control weeds, both in food crops and in other agricultural areas, has been identified as an endocrine modulator through the inhibition of aromatase activity and the activation of estrogen receptors. The present study examined the effects of a glyphosate-based herbicide (Roundup® (GLY-BH) on sexual dimorphism of rats after perinatal exposure to low and high GLY-BH in males and females offspring. Methods: Two groups of pregnant rats were treated with two doses of GLY-BH (50 or 150 mg/kg) from day 15 of gestation (GD15) to postnatal day 7 (PND7). Play fighting behavior was observed at the juvenile stage and during social and sexual behaviors in adulthood. Results: Perinatal GLY-BH exposure reduced male and female body weight at 28, 75, and 90 days of age. The play fighting behavior was decreased in both sexes, but female rats were more affected. The sexual behaviors were reduced only in females. Conclusions: Perinatal exposure to both doses of GLY-BH promoted sexually dimorphic effects in both juvenile and adulthood stages. These effects were attributed to the inhibition of aromatase activity induced by exposure to GLY-BH in the perinatal period.(AU)

Objetivos: O glifosato é um herbicida não seletivo, usado em muitas culturas alimentares e não alimentares e em áreas não agrícolas, sendo que os produtos a base de glifosato atuam como moduladores das funções endócrinas por meio da inibição da atividade da aromatase e da ativação de receptores de estrógeno. O presente estudo avaliou os efeitos do herbicida Roundup® (GLY-BH) à base de glifosato, em comportamentos sexualmente dimórficos de ratos após exposição perinatal a doses baixas e altas de GLY-BH no período perinatal. Métodos: Ratas prenhas foram tratadas com 50 ou 150 mg/kg de GLY-BH do 15º dia de gestação (GD15) ao 7º dia de lactação (LD7). O comportamento de luta/brincar foi observado na fase juvenil e os comportamentos social e sexual na idade adulta. Resultados: a exposição perinatal a GLY-BH reduziu o peso corporal de machos e fêmeas aos 28, 75 e 90 dias de idade. O comportamento de luta/brincar diminuiu em ambos os sexos, sendo as ratas foram as mais afetadas. O comportamento sexual foi reduzido apenas nas fêmeas. Conclusões: A exposição perinatal a ambas as doses do GLY- BH promoveu tanto na idade juvenil como na idade adulta, efeitos sexualmente dimórficos. Esses efeitos foram atribuídos à inibição da atividade da aromatase induzida exposição perinatal ao GLY-BH.(AU)

Long-term obesity is associated with depression and neuroinflammation

ABSTRACT Objective: Obesity is characterized by a state of chronic, low-intensity systemic inflammation frequently associated with insulin resistance and dyslipidemia. Materials and methods: Given that chronic inflammation has been implicated in the pathogenesis of mood disorders, we investigated if chronic obesity that was initiated early in life - lasting through adulthood - could be more harmful to memory impairment and mood fluctuations such as depression. Results: Here we show that pre-pubertal male rats (30 days old) treated with a high-fat diet (40%) for 8-months gained ~50% more weight when compared to controls, exhibited depression and anxiety-like behaviors but no memory impairment. The prefrontal cortex of the obese rats exhibited an increase in the expression of genes related to inflammatory response, such as NFKb, MMP9, CCl2, PPARb, and PPARg. There were no alterations in genes known to be related to depression. Conclusion: Long-lasting obesity with onset in prepuberal age led to depression and neuroinflammation but not to memory impairment.

Determinação de paraquate em batatas / Determination of paraquat in potatoes

O Paraquate (1,1'-dimetil-4,4'-bipiridina- dicloreto) é herbicida amplamente utilizado em vários países para diferentes culturas. O objetivo é determinar a concentração de Paraquate em batatas comercializadas em diferentes estabelecimentos da zona leste de São Paulo. Foram coletadas 12 (doze) amostras de batatas adquiridas no comércio varejista (sacolões, ou seja, do de frutas, verduras e legumes; supermercados e feiras livres) da zona leste do município de São Paulo. A quantificação do Paraquate foi baseada na reação de complexação com o ditionito de sódio, gerando composto de cor azulada, cuja absorvância foi lida em espectrofotômetro em comprimento de onda de 600nm. Foi construída a curva padrão e a determinada a equação da reta (y = 1,6448x e R2= 0,9945). O limite de tolerância do herbicida em alimentos é de 0,2 partes por milhão ou 0,2 mg/kg, enquanto que a ingestão diária aceitável (IDA) é de 0,004 mg/kg de peso corpóreo. Assim, pode-se observar que os valores encontrados em três amostras estão acima do limite máximo permitido, enquanto quatro apresentaram concentrações muito próximas ao limite. Os resultados permitem inferir que existe a necessidade de intensificação na fiscalização nos locais de comercialização de alimentos produzidos com a utilização de agrotóxicos.(AU)

Paraquat (1,1'-dimethyl-4,4'- bipyridine-dichloride) is herbicide widely used in several countries in different plantations. The objective is to determine the concentration of Paraquat in potatoes, marketed in different establishments in the eastern zone of São Paulo. Twelve (12) samples of potatoes purchased from the retail trade ("sacolões", ie fruit, vegetable and vegetable markets, supermarkets and free markets) were collected from the eastern part of the city of São Paulo. The quantification of Paraquat was based on the reaction of complexation with the sodium dithionite, generating compound of blue color, whose absorbance was read in a spectrophotometer at wavelength of 600 nm. The standard curve was constructed and the equation of the line was determined (y = 1,6448x e R2 = 0,9945). The tolerance limit of the herbicide in foods is 0.2 parts per million or 0.2 mg/kg, while the acceptable daily intake (ADI) is 0.004 mg/kg body weight. Thus, it can be observed that the values found in three samples are above the maximum allowed limit, while four of them presented concentrations very close to the limit. The results allow inferring that there is a need for intensification in the inspection in the commercial places of food produced with the use of pesticides.