Characteristics of virulence, resistance and genetic diversity of strains of Salmonella Infantis isolated from broiler chicken in Brazil / Características de virulência, resistência e diversidade genética de estirpes de Salmonella Infantis isoladas de frangos de corte no Brasil

Salmonella Infantis is frequently associated with human infections worldwide and is transmitted by consumption of contaminated foods, particularly those of animal origin, especially the chicken meat. We aimed to evaluate virulence characteristics, antimicrobial resistance and the genetic similarity of 51 strains of S. Infantis isolated from samples of poultry origin. The strains were isolated from 2009 to 2010 in a company with full cycle of broiler's production in the state of São Paulo, Brazil. The antimicrobial susceptibility test was performed and, by PCR, we evaluated the presence of the genes lpfA (hem-adhesion), agfA (hem-biofilm) and sefA (hem-adhesion) and resistance genes to beta-lactams (blaTEM, blaSHV, bla CTX-M and blaAmpC ). The phylogenetic relationship was determined by RAPD-PCR method. Among the drugs tested, the highest percentages of resistance were to amoxicillin (35.3%) and to sulfonamide (15.7%). Eleven antimicrobial resistance patterns were identified (A1 to A11), none of them presented a multiresistance profile (> 3 antimicrobials classes). There was 100% of positivity for the agfA gene, 92.2% for the lpfA gene, and no strain presented the sefA gene. Most of the isolates showed similarities in virulence potential, since they were simultaneously positive for two studied genes, agfA and lpfA (92.2%, 47/51). Of the 18 (35.3%) strains resistant to antimicrobials of the β-lactam class, 10 (55.5%) were positive to blaAmpC gene, five (27.8%) for blaCTX-M , two (11.1%) to blaSHV and no strain presented the blaTEM gene. The phylogenetic evaluation has shown the presence of five clusters (A, B, C, D and E) with similarity greatSalmonella Infantis is frequently associated with human infections worldwide and is transmitted by consumption of contaminated foods, particularly those of animal origin, especially the chicken meat. We aimed to evaluate virulence characteristics, antimicrobial resistance and the genetic similarity of 51 strains of S. Infantis isolated from samples of poultry origin. The strains were isolated from 2009 to 2010 in a company with full cycle of broiler's production in the state of São Paulo, Brazil. The antimicrobial susceptibility test was performed and, by PCR, we evaluated the presence of the genes lpfA (hem-adhesion), agfA (hem-biofilm) and sefA (hem-adhesion) and resistance genes to beta-lactams (blaTEM, blaSHV, bla CTX-M and blaAmpC ). The phylogenetic relationship was determined by RAPD-PCR method. Among the drugs tested, the highest percentages of resistance were to amoxicillin (35.3%) and to sulfonamide (15.7%). Eleven antimicrobial resistance patterns were identified (A1 to A11), none of them presented a multiresistance profile (> 3 antimicrobials classes). There was 100% of positivity for the agfA gene, 92.2% for the lpfA gene, and no strain presented the sefA gene. Most of the isolates showed similarities in virulence potential, since they were simultaneously positive for two studied genes, agfA and lpfA (92.2%, 47/51). Of the 18 (35.3%) strains resistant to antimicrobials of the ß-lactam class, 10 (55.5%) were positive to blaAmpC gene, five (27.8%) for blaCTX-M , two (11.1%) to blaSHV and no strain presented the blaTEM gene. The phylogenetic evaluation has shown the presence of five clusters (A, B, C, D and E) with similarity greater than 80%, and three distinct strains which were not grouped in any cluster. Cluster B grouped 33 strains, all positive for lpfA and agfA genes, from both, the broiler farming facility and the slaughterhouse, persistent throughout all the study period. This cluster also grouped 18 strains clones with genetic similarity greater than 99%, all isolated in the slaughterhouse. The presence of virulence genes associated with persistent strains clones for a long period, warns to the possibility of S. Infantis to form biofilm, and should be constantly monitored in broilers' production chain, in order to know the profile of the strains that may contaminate the final product and evaluate the hazards that represents to public health.er than 80%, and three distinct strains which were not grouped in any cluster. Cluster B grouped 33 strains, all positive for lpfA and agfA genes, from both, the broiler farming facility and the slaughterhouse, persistent throughout all the study period. This cluster also grouped 18 strains clones with genetic similarity greater than 99%, all isolated in the slaughterhouse. The presence of virulence genes associated with persistent strains clones for a long period, warns to the possibility of S. Infantis to form biofilm, and should be constantly monitored in broilers' production chain, in order to know the profile of the strains that may contaminate the final product and evaluate the hazards that represents to public health.(AU)

Salmonella Infantis é frequentemente associada a infecções humanas no mundo todo sendo transmitida pelo consumo de alimentos contaminados, principalmente aqueles de origem animal, com destaque para a carne de frango. Objetivou-se avaliar características de virulência, resistência antimicrobiana e a similaridade genética de 51 estirpes de S. Infantis isoladas em amostras de origem avícola. As estirpes foram isoladas no período de 2009 a 2010 em uma empresa com ciclo completo de produção de frango de corte, localizada no estado de São Paulo, Brasil. Foi realizado o teste de susceptibilidade antimicrobiana e pela técnica de PCR, foi avaliada a presença dos genes lpfA (fímbria-adesão), agfA (fímbria-biofilme) e sefA (fímbria-adesão) e os genes de resistência aos beta-lactâmicos (bla TEM, blaSHV, blaCTX-M e blaAmpC ). A relação filogenética foi determinada pelo método de RAPD-PCR. Dentre as drogas testadas, os maiores percentuais de resistência foram para amoxacilina com 35,3% e sulfonamida com 15,7%. Onze perfis de resistência aos antimicrobianos foram identificados (A1 a A11), sendo que nenhum deles apresentou perfil de multirresistência (>3 classes de antimicrobianos). Houve 100% de positividade para o gene agfA, 92,2% para o gene lpfA e nenhuma estirpe apresentou o gene sefA. A maioria dos isolados apresentaram semelhanças no potencial de virulência, pois foram positivos simultaneamente para dois genes estudados, agfA e lpfA (92,2% - 47/51). Das 18 (35,3%) estirpes resistentes aos antimicrobianos da classe dos ß-lactâmicos, 10 (55,5%) foram positivas para o gene blaAmpC , cinco (27,8%) para blaCTX-M , duas (11,1%) para blaSHV e nenhuma estirpe apresentou o gene bla TEM . A avaliação filogenética demonstrou a presença de cinco clusters (A, B, C, D e E) com similaridade superior a 80%, e três estirpes distintas que não foram agrupadas em nenhum dos clusters. O cluster B agrupou 33 estirpes, todas positivas para os genes lpfA e agfA, provenientes tanto do aviário quanto do matadouro frigorífico, persistentes durante todo o período do estudo. Este cluster ainda agrupou 18 estirpes clones com similaridade genética superior a 99%, todas isoladas no matadouro frigorífico. A presença dos genes de virulência, associada à persistência das estirpes clones durante um longo período do estudo, alertam para a possibilidade de S. Infantis em formar biofilme, devendo ser constantemente monitorada na cadeia de produção avícola, especialmente no ambiente de abate, de forma a conhecer o perfil das estirpes que podem contaminar o produto final e assim avaliar os perigos que representam para a saúde pública.(AU)

Ocorrência de bactérias aeróbias mesófilas e de Bacillus cereus em pimenta-do-reino / Presence of mesophilic aerobes and Bacillus cereus in black pepper

Foram analisadas 37 amostras de pimenta-do-reino moída, coletadas no comércio de Viçosa (MG) e Säo Paulo (SP) e, em 85 por cento destas, constatou-se a presença de Bacillus cereus em números de até 4,6 x 104 UFC/g. A populaçäo de bactérias aeróbias mesófilas variou de 2,8 x 105 a 1,9 x 108 UFC/g.

Avaliação do método tradicional para detecção de Salmonella spp. em carnes in natura / Evaluation of the traditional method for detection of Salmonella spp. in raw meat products

Avaliou-se o efeito da temperatura de pré-enriquecimento e o desempenho de três caldos de enriquecimento seletivo e dois ágars de isolamento, utilizados para detecção de Salmonella em carnes in natura. As amostras foram pré-enriquecidas em água tamponada e peptonada 1 por cento e incubadas a 35ºC e a 42ºC por 24 horas. Alíquotas de cada amostra pré-enriquecida foram inoculadas em caldos Tetrationato, Rappaport-Vassiliadis e Selenito Cistina. Os ágars Rambach e Verde Brilhante foram usados para o isolamento de Salmonella. Os resultados mostraram que o maior índice de resultados positivos foi obtido com pré enriquecimento a 42ºC. Entre os meios de enriquecimento seletivo, o caldo Tetrationato com pré-enriquecimento a 42ºC proporcionou o maior índice de isolamento de Salmonella spp.

Avaliaçäo do método tradicional para detecçäo de Salmonella spp. em carnes in natura / Evaluation of the traditional method for detection of Salmonella spp. in raw meat products

Avaliou o efeito da temperatura de pré-enriquecimento e o desempenho de três caldos de enriquecimento seletivo e dois agares de isolamento, utilizados para detecçäo de Salmonella em carnes in natura. Amostras de carne suíça, naturalmente contaminadas com Salmonella, foram pré-enriquecidas em água peptonada tamponada a 1 por cento e incubadas a 35§C e 42§C por 24 horas. Alíquotas de cada amostra pré-enriquecida foram inoculadas em caldos Tetrationato, Rappaport-Vassiliadis e Selenito Cistina. Os agares Rambach e Verde Brilhante foram usados para o isolamento de Salmonella. Os resultados revelaram que o caldo Tetrationato com pré-enriquecimento a 42§C proporcionou o maior índice de isolamentos de Salmonella spp.

Incidência de Salmonella e Escherichia coli em carne suína in natura e salame colonial, consumidos pela populaçäo de Chapecó - SC / Presence of Salmonella and Escherichia coli in pork in natura and 'colonial' sausage, which the Chapecó - SC population consumed

Bactérias como a Salmonella e a Escherichia coli, há muito tempo, säo reconhecidas como importantes patógenos causadores de intoxicaçöes alimentares, sendo que a contaminaçäo de alimentos com microrganismos de origem fecal deve ser sempre ser assumida como um sério problema. Investigou a presença de Salmonella e E. coli em carne suína in natura e salame colonial consumidos pela populaçäo de Chapecó-SC. Foi analisado um total de 50 amostras de carne suína e 50 amostras de salame colonial. Os resultados deste estudo revelaram a presença de Salmonella em 6,0 por cento das amostras de carne suína in natura e em 6,0 por cento das amostras de salame colonial, sendo que os sorovares isolados em ambos os produtos foram: typhimurium, agona e schazengrund. Entretanto, 82,0 por cento das amostras de carne suína e 84,0 por cento das amostras de salame colonial apresentaram contaminaçäo por E. coli sendo que 44,0 por cento e 72,0 por cento, respectivamente, estavam acima do número máximo permitido para occonsumo humano. Estes resultados indicam que tais produtos säo inadequados para o consumo humano e os riscos de intoxicaçöes alimentares por estes microrganismos säo elevados.

Método tradicional clássico para detecçäo de Salmonella em alimentos: um problema técnico bastante complexo / Classic traditonal method for detection of Salmonella in foods

A Salmonella é uma bactéria entérica responsável por graves surtos de intoxicaçöes alimentares sendo que os produtos de origem animal säo os principais veículos transmissores deste patógeno. A busca de uma metodologia adequada e eficiente para detectar Salmonella em alimentos tem sido uma busca constante de todos os profissionais que trabalham na pesquisa desta bactéria. Apesar de nos últimos anos muitos métodos com tecnologia avançadas terem surgido para diagnosticar Salmonella em alimentos, o método cultural clássico, apesar de sua morosidade e labor, continua sendo amplamente utilizado em laboratórios de monitoramento de Salmonella nas indústrias de alimentos e sua eficiência representa confiabilidade nos resultados obtidos e a segurança nos programas de controle desta bactéria. No entanto, muitos estudos têm revelado diferenças significativas entre resultados obtidos com este método, principalmente no que se refere aos meios de cultura e as temperaturas de incubaçäo aplicadas nas etapas de seu procedimento. Desta forma, verifica as principais diferenças encontradas na literatura científica referente aos meios de cultura e suas temperaturas de incubaçöes, visando buscar informaçöes que auxiliem todos os profissionais que utilizam esta metodologia.

Qualidade microbiológica da água proveniente de poços e fontes de dois municípios da regiäo do Alto Uruguai Catarinense / Microbiology quality of water destinated to human consume, from two towns of Alto Uruguai Catarinense region

Entre julho de 1994 e julho de 1996, foram realizadas colheitas de amostras de água dos poços e fontes em dois municípios da regiäo do Alto Uruguai Catarinense, Oeste de Santa Catarina. As mesmas foram colhidas assepticamente em frascos estéreis, acondicionadas em caixas isotérmicas e transportadas ao laboratório para análise imediata. Foram analisadas 183 amotras, sendo 84 do município 01 e 99 do município 02.