The destruction complex of beta-catenin in colorectal carcinoma and colonic adenoma / O complexo destruidor de betacatenina no carcinoma colorretal e no adenoma cólico

ABSTRACT Objective To evaluate the destruction complex of beta-catenin by the expression of the proteins beta-catetenin, adenomatous polyposis coli, GSK3β, axin and ubiquitin in colorectal carcinoma and colonic adenoma. Methods Tissue samples from 64 patients with colorectal carcinoma and 53 patients with colonic adenoma were analyzed. Tissue microarray blocks and slides were prepared and subjected to immunohistochemistry with polyclonal antibodies in carcinoma, adjacent non-neoplastic mucosa, and adenoma tissues. The immunoreactivity was evaluated by the percentage of positive stained cells and by the intensity assessed through of the stained grade of proteins in the cytoplasm and nucleus of cells. In the statistical analysis, the Spearman correlation coefficient, Student’s t, χ2, Mann-Whitney, and McNemar tests, and univariate logistic regression analysis were used. Results In colorectal carcinoma, the expressions of beta-catenin and adenomatous polyposis coli proteins were significantly higher than in colonic adenomas (p<0.001 and p<0.0001, respectively). The immunoreactivity of GSK3β, axin 1 and ubiquitin proteins was significantly higher (p=0.03, p=0.039 and p=0.03, respectively) in colorectal carcinoma than in the colonic adenoma and adjacent non-neoplastic mucosa. The immunohistochemistry staining of these proteins did not show significant differences with the clinical and pathological characteristics of colorectal cancer and colonic adenoma. Conclusions These results suggest that, in adenomas, the lower expression of the beta-catenin, axin 1 and GSK3β proteins indicated that the destruction complex of beta-catenin was maintained, while in colorectal carcinoma, the increased expression of beta-catenin, GSK3β, axin 1, and ubiquitin proteins indicated that the destruction complex of beta-catenin was disrupted.

RESUMO Objetivo Avaliar o complexo de destruição da betacatenina no carcinoma colorretal e no adenoma do colo pela expressão das proteínas betacatenina, adenomatous polyposis coli, GSK3β, axina e ubiquitina. Métodos Amostras de tecidos de 64 doentes com carcinoma colorretal e de 53 pacientes com adenoma do colo foram analisadas. Blocos de tecidos foram submetidos ao estudo imuno-histoquímico com anticorpos policlonais nos tecidos do carcinoma, mucosa não neoplásica adjacente e adenoma. A imunorreatividade foi avaliada pela porcentagem de positividade de células coradas e pela intensidade do grau de coloração das proteínas no citoplasma e no núcleo das células. Na análise estatística, foram utilizados o coeficiente de correlação de Spearman, os testes t de Student, χ2, Mann-Whitney e de McNemar, e a análise de regressão logística univariada. Resultados No carcinoma colorretal, as expressões da betacatenina e da adenomatous polyposis coli foram significativamente maiores do que em adenomas do colo (p<0,001 e p<0,0001, respectivamente). A imunorreatividade das proteínas GSK3β, axina 1 e ubiquitina foi significativamente maior (p=0,03, p=0,039 e p=0,03, respectivamente) no carcinoma colorretal do que no adenoma e na mucosa não neoplásica adjacente. A coloração imuno-histoquímica dessas proteínas não apresentou diferenças significantes em relação às características clinicopatológicas do câncer colorretal e do adenoma. Conclusões Em adenomas, as menores expressões de betacatenina, axina 1 e GSK3β indicaram que o complexo de destruição da betacatenina estava conservado, enquanto que, no carcinoma colorretal, o aumento das expressões da betacatenina, GSK3β, 1 axina, e ubiquitina indicaram que o complexo de destruição de betacatenina estava alterado.

Immunohistochemical study of the canonical and non-canonical Wnt signaling pathway in colorectal carcinoma and non-neoplastic mucosa / Estudo imunoistoquímico da via de sinalização canônica e não canônica da proteína Wnt em carcinoma colorretal e em mucosa não neoplásica

Colorectal cancer is linked to several signaling pathways such as Wnt pathway. Our objective is to detect and verify the integrity of protein members of Wnt signaling pathway in colorectal carcinoma and non-neoplastic colorectal tissue. Sixty-four patients with colorectal carcinoma provided samples of colorectal neoplasia and non-neoplastic tissues, which were prepared in tissue microarray blocks and subjected to immunohistochemical analysis. The primary antibodies used were Wnt-1, Wnt-2, Wnt-5a Frizzled-1, Frizzled-5 and axin. Immunoexpression of Wnt-2 protein was significantly lower in colorectal tumor tissue and axin protein immunoexpression was significantly higher in tumor tissue. There was no significant difference in the expression of Wnt-1, Wnt-5a, Frizzled-1 and Frizzled-5 proteins in both tissues. The higher expression of Wnt-2 protein in non-neoplastic colorectal tis- sue suggests the participation during the hyperproliferative stage of colorectal mucosa. The increased axin protein immunoexpression in colorectal tumor suggests a decrease in the formation of the beta-catenin destructor complex. (AU)

O câncer colorretal está ligado a várias vias de sinalização, como a via Wnt. Nosso objetivo é detectar e verificar a integridade das proteínas da via de sinalização Wnt no carcinoma colorretal e no tecido colorretal não neoplásico. Sessenta e quatro pacientes com carcinoma colorretal forneceram amostras de neoplasia e tecidos não neoplásicos, que foram colocadas em blocos de tissue microarray e submetidas à análise imuno-histoquímica. Os anticorpos primários utilizados foram Wnt-1, Wnt-2, Wnt-5a Frizzled-1, Frizzled-5 e axina. A imunoexpressão da proteína Wnt-2 foi significativamente menor no tecido tumoral e a imunoexpressão da proteína axina foi significativamente superior no tecido do tumor. Não houve diferença significativa na expressão de Wnt-1, Wnt-5a, frizzled-1 e nas proteínas Frizzled 1 e 5 em ambos os tecidos. A maior expressão de Wnt-2 da proteína no tecido colorretal não neoplásico sugere a participação desta proteína durante o estágio de hiperproliferação da mucosa colorretal. O aumento da imunoexpressão da proteína axina no tumor colorretal sugere uma diminuição na formação do complexo de destruição da proteína beta-catenina. (AU)

Expression of galectin-3 in gastric adenocarcinoma.

Background & objectives: Galectin-3 a member of the galectin family is an endogenous β-galactoside binding lectin. It has been found to be associated with cell adhesion, recognition, proliferation, differentiation, immunomodulation, angiogenesis, apoptosis and can be a reliable marker for cancer aggressiveness. The aim of this study was to verify protein expression in gastric adenocarcinoma tissues and correlate the results with the clinical aspects in the study population. Methods: Galectin-3 expression was examined by immunohistochemistry in 57 samples of gastric adenocarcinomas tissues. Galectin-3 protein expression was observed in the cytoplasm and the nucleus of examined tissues. Results: Thirty one (54.4%) samples had strong or moderate staining and 26 (45.6%) tumours had negative or weak staining. The galectin-3 did not show association with the sex (p=0.347), age (p=0.999), Lauren’s classification (p=0.731) and TNM stage (p=0.222). Regarding the TNM stage, 66.7 per cent of stage I tumours had strong or moderate staining; with tumours stage IV this percentage was 33.3 per cent. Interpretation & conclusion: Our results suggest that gal-3 is not a reliable biomarker for prognosis of the gastric adenocarcinoma by immunohistochemistry. Further studies need to be done on a large sample of tumour tissues in different clinical staging

APC protein immunoexpression in colorectal adenoma and adenocarcinoma / Imunoexpressão da proteína APC nos tecidos de adenoma e de adenocarcinoma colorretais

BACKGROUND: activation of the Wnt pathway by mutated APC gene is considered the initial event in colorectal carcinogenesis. The identification of these mutations can improve the specific treatment of the adenocarcinoma. OBJECTIVE: detect and evaluate wild-type APC protein in tissue from colorectal adenoma, adenocarcinoma and adjacent mucosa. METHODS: 42 patients that underwent surgery for adenocarcinoma and 53 patients with resected adenomas were studied. Tissue samples from the adenocarcinoma were obtained from the tumor and from adjacent non-neoplastic mucosa located 10 cm from the proximal margin of the tumor. Adenoma tissue was obtained from representative areas. Blocks of tissue microarray (TMA) were submitted to immunohistochemistry with anti-APC, with readings of positivity and intensity of immunostaining and the score of immune expression of APC protein was obtained. RESULTS: the APC protein immune expression score showed a significantly lower expression of APC protein in the adenoma when compared with the adenocarcinoma (p < 0.0001) and adjacent mucosa (p < 0.0001). The APC protein immune expression score in the colorectal mucosa and adjacent to the adenocarcinoma showed no significant difference (p = 0.24). CONCLUSIONS: the finding of decreased expression of APC protein in adenoma tissue may indicate that the mutated APC gene may contribute to the changes in the adenoma-carcinoma process of carcinogenesis sequence. The strong expression of protein APC in tissues from the carcinoma and adjacent mucosa suggests that in most patients in this series, the mutation of the APC gene did not participate in the oncogenesis mechanism. (AU)

RACIONAL: a ativação da via Wnt pelo gene APC mutado é considerado evento inicial da carcinogênese colorretal. A identificação dessas mutações pode tornar o tratamento do adenocarcinoma mais específico. OBJETIVO: detectar e avaliar a proteína APC não mutada em tecidos de adenoma, adenocarcinoma e mucosa adjacente. MÉTODO: estudados 42 doentes operados de adenocarcinoma e 53 com adenomas ressecados. Tecidos de adenocarcinoma foram obtidas da neoplasia e da mucosa adjacente não neoplásica situadas a 10 cm da margem proximal do tumor. Tecidos do adenoma foram obtidas de área representativa. Blocos de tissue microarray (TMA) foram submetidos a imuno-histoquímica com anticorpo anti-APC. Avaliadas a positividade e intensidade da expressão e obtidos escores da imunoexpressão da proteína APC. RESULTADOS: o escore da imunoexpressão da proteína APC no adenoma foi significantemente menor do que no adenocarcinoma (p < 0,0001) e na mucosa adjacente (p < 0,0001). O escore da imunoexpressão da proteína APC na mucosa adjacente e no adenocarcinoma não mostraram diferença significante (p = 0,24). CONCLUSÕES: a menor expressão da proteína APC no adenoma pode indicar que o gene APC mutado participa das alterações do processo adenoma-carcinoma. A forte expressão da proteína APC no CCR e na mucosa adjacente sugerem que a mutação do gene APC não participou da oncogênese. (AU)

Correlation between immunoexpression of BCL-2 protein family with apoptosis index, cellular proliferation and survival in colorectal carcinomas

OBJECTIVES: To evaluate the Bcl-2, Bax, Bad and Bak immunoexpression in tumor and nontumorous tissue of 130 patients with colorectal carcinoma submitted to surgery at São Paulo Hospital, EPM/UNIFESP, from 2002 to 2005, and to correlate the immunoexpression data with the apoptotic index (AI, obtained by anti-cleaved caspase 3 and M30 labeling), cell proliferation score (CPS, obtained by Ki-67), immunoexpression of p53 and patient's clinical prognosis. RESULTS: Positive correlation was verified between Bcl-2 protein family in tumor and nontumor tissue. Only Bcl-2 protein correlated with IA and CPS in the tumor. Positive correlation was observed between pro-apoptotic proteins and Bcl-2 protein. In the adjacent mucosa, Bcl-2 correlated with Ki-67 and p53, but not with IA. Carcinomas exhibited higher immunoexpression of CPS and IA markers. No correlation occurred between immunoexpression data and patient survival. CONCLUSION: Positive correlation was observed between the pro-apoptotic proteins of the Bcl-2 family and the anti-apoptotic protein Bcl-2. In the adjacent nontumor mucosa, Bcl-2 correlated with Ki-67 and p53, but not with AI. Carcinomas presented greater immunoexpression for CPS and AI markers; however immunoexpression of these markers was not correlated with patient survival.

Canonical and noncanonical Wnt pathways: a comparison between endometrial cancer type I and atrophic endometrium in Brazil / Vias Wnt canônica e não canônica: uma comparação entre o câncer endometrial tipo I e endométrio atrófico no Brasil

CONTEXT AND OBJECTIVE: The Wnt pathway is involved in tumorigenesis of several tissues. For this reason, we proposed to evaluate Wnt gene expression in endometrial cancer type I. DESIGN AND SETTING: Cross-sectional study on materials gathered from the tissue bank of the Department of Pathology, Universidade Federal de São Paulo. METHODS: Endometrial specimens were obtained from surgeries performed between 1995 and 2005 at São Paulo Hospital, Universidade Federal de São Paulo. The material was divided into two groups according to tissue type: Group A, atrophic endometrium (n = 15); and Group B, endometrial adenocarcinoma (n = 45). We compared the immunohistochemical expression of Wnt1, Frizzled-1 (FZD1), Wnt5a, Frizzled-5 (FZD5) and beta-catenin between endometrial cancer type I and atrophic endometrium. RESULTS: Regarding Wnt1, FZD1 and Wnt5a expression, no significant association was observed between the groups. A significant association was observed between the groups in relation to FZD5 expression (P = 0.001). The proportion of FZD5-positive samples was significantly higher in group A (80.0 percent) than in group B (31.1 percent). Regarding the survival curve for FZD5 in group B, we did not find any significant association between atrophic endometrium and endometrial adenocarcinoma. We also did not find any significant association regarding beta-catenin expression (P = 1.000). CONCLUSION: FZD5 is downregulated in endometrial adenocarcinoma, in comparison with atrophic endometrium.

CONTEXTO E OBJETIVO: A via Wnt está envolvida na tumorigênese de diversos tipos de tecidos. Por essa razão, propusemo-nos a avaliar a expressão de genes da família Wnt no câncer endometrial tipo I. TIPO DE ESTUDO E LOCAL: Estudo transversal com coleta de materiais do banco de tecidos do Departamento de Patologia da Universidade Federal de São Paulo. MÉTODOS: Amostras endometriais foram obtidas de cirurgias que ocorreram entre 1995 e 2005 no Hospital São Paulo, Universidade Federal de São Paulo. Foram separados dois grupos segundo o tipo de tecido obtido: grupo A, com endométrio atrófico (n = 15); e grupo B, com adenocarcinoma endometrial (n = 45). Comparamos a expressão imunoistoquímica de Wnt 1, Frizzled-1 (FZD1), Wnt 5a, Frizzled-5 (FZD 5) e beta-catenina entre câncer endometrial tipo I e endométrio atrófico. RESULTADOS: Na expressão do Wnt1, FZD1 e Wnt5a, não observamos associação significante entre os grupos. Na expressão do FZD5, encontramos associação significante entre os grupos (P = 0,001). A proporção de positividade do FZD5 foi significantemente maior no grupo A comparado ao grupo B (31,1 por cento). Em relação à curva de sobrevida para o FZD5 no grupo B, não tivemos associação significante entre endométrio atrófico e adenocarcinoma do endométrio. Também não observamos associação significante na expressão da beta-catenina (P = 1,000). CONCLUSÃO: FZD5 é downregulated no adenocarcinoma endometrial quando comparado ao endométrio atrófico.

Morfometria nuclear como técnica complementar na graduação citológica do carcinoma de mama / Nuclear morphometry with complementary technique in cytological grading of breast tumors cells

Introdução: A análise morfométrica dos parâmetros nucleares, tamanho, forma e aspectos da cromatina, mostra-se útil para diagnosticar tumores malignos. O aspirado citológico coletado por agulha fina produz esfregaços suficientemente delgados para a determinação de dimensões nucleares facilmente. Objetivo: Comparar os aspectos morfométricos dos núcleos das células do aspirado proveniente de nódulos de mama. Método: Esfregaços do aspirado provenientes de 71 biópsias de nódulos de mama e determinados como benignos ou malignos, coletados por agulha fina, foram submetidos à coloração de Feulgen e as suas imagens digitais analisadas utilizando-se a Imagilab® 2,3 (Softium Informatica Ltda.), ambientado no sistema operacional WindowsTM 98 SE. Resultados: Dentre os nódulos estudados, 20 foram diagnosticados como benignos e 51 como malignos (8 GI, 23 GII e 20 GIII de acordo com o Sistema de Classificação de Guilford e Robinson). A análise morfométrica da coloração de Feulgen determinou um valor médio para os nódulos benignos de 101,6 e valor médio de 114,3 para os nódulos malignos, respectivamente. A análise morfométrica da coloração de Papanicolaou determinou um valor médio de 103,5 para GI, 131,7 para GII e 98,4 para GIII, respectivamente. Houve uma diferença estatisticamente significante entre o valor médio morfométrico de nódulos benignos e malignos e valor médio entre GI e GII, GII e GIII, mas não entre GI e GIII. Conclusões: A análise morfométrica nuclear dos aspirados de nódulo de mama é um método simples, confiável e complementar, que permitiu distinguir as lesões benignas das lesões malignas da mama.

Introduction: The morphometrical analysis of nuclear parameters, such as size, shape and chromatin features, has shown to be useful for diagnosing malignant tumors. Cytological aspirate collected with fine needle, in turn, provides smears thin enough for easily determining nuclear dimensions. Objective: Compare morphometrical features of cell nuclei in aspirate from breast nodules. Method: Fine needle aspiration smears from 71 breast nodules were analyzed and determined as benign or malignant. They were then Feulgen-stained and had their digital images analyzed using the Imagilab® software package (Softium Informatica Ltda.) run on Windows? 98SE. Results: Among the nodules studied, 20 were diagnosed as benign and 51 as malignant (8 GI, 23 GII and 20 GIII according to Guilford and Robinson Classification System). The morphometrical analysis of the Feulgen-stained material digital images determined an average value for benign nodules of 101.6 and an average value of 114.3 for malignant nodules. The Papanicolaou stain morphometrical analysis determined an average value of 103.5 for GI, 131.7 for GII and 98.4 for GIII. There was a statistically significant difference between the morphometrical average values for benign and malignant nodules, and between GI and GII, and GII and GIII, but not GI and GIII average values. Conclusion: The nuclear morphometry of breast nodule aspirate is a simple, reliable and complementary method that allowed distinguishing benign from malignant injuries of the breast.

Estudo de p27, p21, p16 em epitélio escamoso normal, papiloma escamoso e carcinoma de células escamosas da cavidade oral / Comparative analysis of the immunohistochemistry expression of p27, p21WAF/Cip1, and p16INK4a in oral normal epithelium, squamous papilloma and squamous cell carcinoma

INTRODUÇÃO E OBJETIVO: O tipo de câncer oral mais frequente é o carcinoma de células escamosas, que corresponde a 95 por cento dos casos(9). O papiloma escamoso oral é uma neoplasia benigna normalmente associada à infecção pelo papilomavírus humano (HPV)(21). A análise da literatura mostra alterações nos genes reguladores do ciclo celular p27, p21WAF/Cip1 e p16INK4a, porém sem uma definição de seus papéis na carcinogênese oral. O objetivo foi caracterizar imuno-histoquimicamente p27, p21WAF/Cip1 e p16NK4a em epitélio escamoso normal, papilomas escamosos e carcinomas de células escamosas da cavidade oral. MÉTODOS: Imuno-histoquímica para p27, p21WAF/Cip1 e p16NK4a em 32 casos de epitélio escamoso normal, 30 casos de papiloma escamoso e 34 de carcinoma de células escamosas da cavidade oral. RESULTADOS: p27: 97,06 por cento dos casos de carcinoma de células escamosas apresentaram imunopositividade focal. O grupo papiloma escamoso apresentou 33,33 por cento e o grupo controle, 18,75 por cento. p21WAF/Cip1: 100 por cento de imunopositividade focal tanto no grupo controle como no grupo carcinoma de células escamosas, e 90 por cento no grupo papiloma escamoso. p16INK4a: 100 por cento de imunopositividade focal para os grupos controle e papiloma escamoso, e 94 por cento para o grupo carcinoma de células escamosas. CONCLUSÃO: Imuno-histoquimicamente demonstrou-se diferença significativa para p27 quando feita comparação dos grupos controle e papiloma escamoso com o grupo carcinoma de células escamosas. O p21WAF/Cip1 não demonstrou poder de diferenciar os grupos analisados. O p16INK4a apresentou imunopositividade difusa em uma minoria dos casos do grupo carcinoma de células escamosas. O grupo papiloma escamoso se comportou de maneira similar ao grupo controle em relação aos três marcadores.

INTRODUCTION: The most frequent type of oral cancer is the squamous cell carcinoma, which corresponds to 95 percent of the cases(9).The oral squamous papilloma is a benign neoplasia, commonly associated with infections caused by the human papilloma virus(21). The analysis of medical literature shows changes in cell cycle regulatory genes (p27, p21WAF/Cip1 and p16INK4a), but does not define their roles in oral carcinogenesis. Objective: Characterize the immuno-histochemical expression of p27, p21WAF/Cip1 and p16INK4a in oral normal squamous epithelium, oral squamous papilloma and oral squamous cell carcinoma. METHODS: Immuno-histochemical evaluation of p27, p21WAF/Cip1 and p16INK4a in 32 samples of oral normal squamous epithelium, 30 of oral squamous papilloma and 34 of oral squamous cell carcinoma. RESULTS: 97.06 percent of the oral squamous cell carcinoma group, 33.33 percent of the squamous papilloma group and 18.75 percent of the control group showed focal immunopositivity for p27. 100 percent of both control and oral squamous cell carcinoma groups and 90 percent of the oral squamous papilloma group showed focal immunopositivity for p21WAF/Cip1. 100 percent of both control and oral squamous papilloma groups and 94 percent of the oral squamous cell carcinoma group showed focal immunopositivity for p16INK4a. CONCLUSIONS: The study revealed a statistically significant difference for p27 expression when comparing the control and oral squamous papilloma groups with the oral squamous cell carcinoma group. p21WAF/Cip1 did not prove to be useful to differentiate the groups. p16INK4a showed diffuse immunopositivity in a minority of the oral squamous cell carcinoma cases. The oral squamous papilloma group behaved similarly to the control group as to the three markers.

Perda de amostras em tissue microarray: comparação entre técnicas com uso de fita adesiva comercial, lâminas silanizadas pelo método tradicional ou por método modificado / Loss of tissue samples in the tissue microarray: comparison between techniques using commercial adhesive tape, silane-coated microslides by the conventional method and by a modified technique

Introdução/objetivo: O microarranjo tecidual, ou tissue microarray (TMA), permite avaliar múltiplas amostrasde tecido em um único bloco. Um dos problemas do TMA é o descolamento dos cortes teciduais, por isso, para reduzir essa perda, tem-se utilizado fita adesiva especial comercial. Não há relatos comparando o uso dessas fitas adesivas com a técnica de silanização modificada. O objetivo desse estudo foi comparar as perdas de cortes entre lâminas usando fitas adesivas comerciais, lâminas silanizadas por técnica convencional elâminas silanizadas por técnica modificada, com menor consumo de acetona. Material e método: O TMA foiconstruído com blocos de tecido hepático, em dispositivo de base fixa, colocando-se 32 cilindros de 2 mmde diâmetro em duplicata e espaçamento de 2,2 mm. Quinze secções de 4 μm foram colocadas em lâminas silanizadas a 4% por técnica convencional (grupo 1), 15 em lâminas silanizadas com técnica modificada (6%de silano e com uso mínimo de acetona) (grupo 2) e 15 em lâminas com fita adesiva comercial de acordo comas recomendações do fabricante (grupo 3). Todas as lâminas foram processadas por imuno-histoquímica para citoqueratina 18, com recuperação antigênica em tampão citrato pH 6, em microondas. As perdas de amostrasforam quantificadas e expressas como: perda total (≥ 80%), quase total (75% a 79%) ou parcial (50% a 74%).Resultados: A perda de tecidos foi semelhante nos três grupos: com silanização tradicional, modificada oufita adesiva comercial (4,9 vs. 3,1 vs. 8,1, respectivamente) (análise de variância [ANOVA], p = 0,3654). Umadas lâminas com a fita adesiva apresentou descolamento artefatual de todos os tecidos e outra de 20 tecidosem um dos lados. Nenhuma das lâminas silanizadas apresentou tal artefato. Conclusão: Lâminas silanizadas têm resultados satisfatórios, requerem menos treinamento técnico e reduzem os custos da utilização do TMA justificando seu uso em pesquisa...

Introduction/objective: The tissue microarray (TMA) technique allows the evaluation of multiple tissue samplesin a single block. One of the problems of TMA is the ungluing of tissue sections, thus commercial adhesive tape has been used to reduce this loss. There are no reports comparing the use of the commercial adhesive tape with the use of the modified silane-coated technique. The objective of this study was to compare section loss in slides using commercial adhesive tape, silane-coated microslides with the conventional technique or with the modified technique. Material and method: The TMA was constructed with hepatic tissue blocks embedded in paraffin, using a fixed base device, placing 32 cylinders of 2 mm in diameter in duplicate and 2.2 mm apart from each other. Fifteen 4-μm sections were placed on conventional silane-coated microslides at 4% (Group 1), 15 on silane-coated microslides with a modified technique (6% of silane and minimum use of acetone) (Group 2), and 15 on slides using commercial adhesive tape, according to the manufacturer's recommendations (Group 3). All microslides were processed by immunohistochemistry for cytokeratin 18, with antigen retrieval accomplished by incubation with citrate buffer pH 6.0 with microwave enhancement. Samples loss was quantified and expressed as: total (≥ 80%), almost complete (75% to 79%) or partial (50% to 74%). Results: The loss of sections was similar in all three groups (4.9 vs. 3.1 vs. 8.1, respectively) (analysis of variance [ANOVA], p = 0.3654). One slide usingcommercial adhesive tape showed artifactual ungluing of all sections and another one showed loss of 20 sampleson one side of the slide. None of the silane-coated microslides showed such artifact. Conclusions: Silane-coated microslides show adequate results, require less technical training and reduce the cost of TMA procedure, whatjustifies their use in research...