Efecto de medio condicionado de placenta humana sobre linfocitos periféricos in vitro / Effects of human placenta conditioned media on peripheric lymphocytes in vitro

En este trabajo se investiga la acción del medio condicionado de placenta humana (MCPH) sobre linfocitos periféricos in vitro. Se cultivaron leucocitos periféricos de varones, mujeres con diferente número de partos, gestantes y nulíparas, en su propio plasma sin y con MCPH al 5, 10 y 20 por ciento. Luego de 120 h de cultivo se determinó la Transformación Blástica Linfocitaria (TBL, valores ò 0,5 indican estimulación) por observación de la morfología celular. Los linfocitos de varones y mujeres nulíparas no responden a ninguna de las concentraciones de MCPH ensayadas. En mujeres que han tenido hijos, la más alta transformación blástica linfocitaria se observa con MCPH al 10 por ciento, siendo esta respuesta correlativa con el número de partos (r = 0,73). En gestantes, si bien la máxima respuesta se obtiene con MCPH al 10 por ciento, el agregado de 5 por ciento del extracto es suficiente para producir estimulación linfocitaria (TBL x = 0,54 ñ 0,05). En conclusión, MCPH al 10 por ciento sigue siendo la concentración óptima para provocar blastogénesis linfocitaria. Además, en el plasma de las mujeres gestantes existirían sustancias que potencian la acción del extracto in vitro, permitiendo TBL > 0,5 con la adición de sólo 5 por ciento de MCPH

Influencia de las condiciones de cultivo de placenta humana sobre la producción de medios condicionados placentarios / Influence of culture conditions on the production of human placent conditioned medium

En este trabajo se propone una técnica alternativa para la obtención de medios condicionados derivados de placenta humana. Se cultivaron homogenatos placentarios en Mc Coy's 5A suplementado con suero fetla bovino al 5 por ciento y 25mM de HEPES a 37oC. Luego de seis días, los cultivos fueron sacrificados, verificándose la esterilidad y la viabilidad celular. El sobrenadante fue centrifugado a 22.000 g 30 min a 4oC y esterilizado por filtración (0,22 um), denominándolo Medio Condicionado de Placenta Humana (MCPH). Se probó la actividad de los extractos, así obtenidos, en cultivos de linfocitos periféricos de mujeres con tres hijos, con la adición de MCPH al 5 por ciento ,10 por ciento y 20 por ciento y se determinó el índice de Transformación Blástica Linfocitaria (ITBL). La máxima estimulación se observó en los cultivos linfocitarios que contenían MCPH al 10 por ciento , siendo estos valores más uniformes que losa producidos con MCPH al 10 por ciento obtenidos por otra técnica. en conclusión, con esta metodología es posible obtener medios condicionados placentarios con una actividad estimulante más uniforme, independientemente de la placenta de la cual provengan