Hypotesis: an alternative pathway for the regulation of inflammation

Hipótesis: una vía alternativa de regulación de procesos inflamatorios. La regulación de mecanismos inflamatorios es un evento crucial debido a que una alteración de los mismos, como sucede por ejemplo, en la sepsis, en enfermedades autoinmunes crónicas (artritis reumatoidea, lupus eritematoso) o en enfermedades infecciosas (tuberculosis, lepra), genera daños tisulares severos. Aunque hay un consenso general de que la regulación de procesos inflamatorios resulta de un balance entre vías proinflamatorias y antiinflamatorias, nosotros arribamos a la conclusión de que moléculas quimioatractantes / proinflamatorias como, por ejemplo, péptidos formilados bacterianos o complejos inmunes (CI), pueden también inducir, paradójicamente, potentes efectos ntiinflamatorios. Así, demostramos que el péptido formilado prototipo N-formilmetionil- leucil-fenilalanina (FMLP), ejerce un drástico efecto antiinflamatorio, inhibiendo la secreción de factor de necrosis tumoral alfa (TNF-α) inducido por lipopolisacáridos, un potente inductor de la secreción de TNF-α. También determinamos que el FMLP y los CI inducen la disminución de la expresión de receptores para el fragmento Fc de IgG (FcγRII and FcγRIIIB) en neutrófilos humanos. Más aún, el FMLP inhibe la inducción de la expresión de los FcγRI por interferón gamma (IFN-γ) y los CI disminuyen la expresión de moléculas de clase II del complejo mayor de histocompatibilidad en monocitos humanos. Parte de esos efectos fueron mediados por la liberación de aspártico-, serino-, o metaloproteasas. Todos estos resultados nos permiten especular sobre un nuevo concepto en el cual la regulación de los procesos inflamatorios también puede llevarse a cabo por una vía alternativa, no convencional, en la cual un agente quimioatractante / proinflamatorio, bajo determinadas circunstancias, puede actuar como una molécula antiinflamatoria.

Tratamiento de trombocitopenias inmunes en un modelo experimental / Treatment of immune thrombocytopenias in an experimental model

La púrpura trombocitopénica inmune (PTI) es un desorden hematológico caracterizado por un aumento del consumo de plaquetas. La destrucción plaquetaria es mediada por el sistema retículo-endotelial (SRE), en especial macrófagos hepáticos y esplénicos. Nosotros demostramos que la eliminación específica de estas células utilizando clodronato encapsulado en liposomas (lipclod) induce un aumento del recuento plaquetario. Además, encontramos que la trombocitopenia puede puede ser revertida por el lipclod sin comprometer totalmente la integridad del SRE al cabo de 18h de tratamiento. Los tiempos de sangría de los animales tratados fueron similares a los de los de los animales controles, sugiriendo que la hemostasia está bien controlada en estos animales. Estos datos indican que el uso de lip-clod merece ser considerado como una estrategia de tratamiento para aquellos trombocitopénicos donde se procura elevar rápidamente el recuento plaquetario.

Neutrofilos humanos (PMN) inducen la liberacion de lipopolisacaridos (LPS) de bacterias gram negativas / Human polymorphonuclear neutrophils (PMN) induce lipopolysaccharide (LPS) liberation from Gram-negative bacteria

Los lipopolisacáridos bacterianos (LPS) son los principales componentes de las membranas de las bacterias gram negativas. Los LPS constituyen poderosos estímulos para las células del sistema inmune y están asociados, frecuentemente, al desencadenamiento del síndrome séptico o al shock séptico. Los polimorfonucleares neutrófilos humanos (PMN) son una de las células más importantes involucradas en la depuración de los LPS. El conocimiento de los mecanismos de detoxificación de los LPS es crucial para el control del síndrome séptico o del shock séptico causados por bacterias Gram negativas. En este trabajo estudiamos la capacidad de los PMN en la detoxificación de los LPS en dos situaciones diferentes: a) cuando el LPS es ofertado a los PMN como una molécula aislada; b) cuando el LPS ofrecido a los PMN es parte constitutiva de las bacterias Gram negativas (E. coli 0111:B4). Nuestros resultados demuestran que los PMN son capaces de inhibir la actividad biológica de los LPS de generar el factor de necrosis tumoral alfa (TNF-alpha). Sin embargo, cuando los LPS se ofrecen como componentes de las bacterias enteras, los PMN inducen la liberación de los LPS bacterianos sin modificar su actividad biológica. Esto determina que la capacidad depuradora de los PMN esté condicionada por la forma en la cual los LPS son presentados a estas células.

Efecto de los péptidos formilados sobre funciones dependientes de los receptores para Fc de IgG (FcgR) en neutrófilos humanos / Effect of formyl peptides on FcgR- dependent functions in human neutrophils

Los neutrófilos polimorfonucleares humanos (PMN) participan en diferentes funciones celulares, como fagocitosis, citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (ADCC) y la liberación de reactivos intermediarios del oxígeno. Cada una de dichas funciones pueden generarse a través de la estimulación de los receptores para la porción Fc de moléculas IgG (FcgR). Los neutrófilos poseen dos clases de FcgR, FcgRII y FcgRIII. Dichas células también poseen receptores para péptidos formilados de naturaleza bacteriana, como el péptido formilado prototipo N-formil-methionil-leucil-phenilalanina (FMLP). En este trabajo, presentamos evidencia que la preincubación de PMN con FMLP inhibe diferentes funciones celulares dependientes de los FcgRs como lo son la ADCC, fagocitosis y la citotoxicidad inespecífica dependiente de CI. Estos efectos inhibitorios podrían ser explicados, al menos parcialmente, por una disminución de la expresión de ambos, FcgRII y FcgRIII en la superficie celular (down-regulation). Sin embargo, la preincubación de PMN con FMLP no es necesaria para la inhibición de la ADCC. Teniendo en cuenta que la down-regulation de los FcgRs inducida por FMLP no se observa hasta después de los 30 min de incubación, y que la ADCC es una función que se desarrolla rápidamente (en segundos), es muy factible que el FMLP pueda modificar dicha función a través de la inducción de eventos intracelulares.