Activity of glucose-fructose oxidoreductase in fresh and permeabilised cells of Zymomonas mobilis grown in different glucose concentrations

Sorbitol e ácido glucônico são produzidos por células previamente cultivadas da bactéria produtora de etanol Zymomonas mobilis pela acão das enzimas periplasmáticas glicose-frutose oxidorredutase (GFOR) e glucono-d-lactonase (GL). A atividade de GFOR/GL em células a serem empregadas nesta bioconversão depende das condicões de crescimento. Em cultivo em regime descontínuo, com concentracões iniciais de glicose (S0) entre 42 e 230 g/L, as maiores atividades específica e total de GFOR/GL foram obtidas com S0 = 153 g/L (12,6 U/g de células e 62 U/L), enquanto maiores S0 levaram a atividades decrescentes em células não tratadas. Com S0 = 209 g/L, a atividade específica final foi de 7 U/g, mas, após a ruptura das células, atividade superior a 15 U/g foi medida. Uma vez que em descontínuo observou-se inibicão por substrato com S0 a partir de 153 g/L, ensaios em regime descontínuo alimentado, com glicose equivalente a 230 g/L em descontínuo, foram realizados. Embora a inibicão pelo substrato tenha sido superada, a atividade permaneceu baixa (5,2 U/g). Um novo ensaio em descontínuo alimentado, conduzido sob baixa pressão para remover o etanol do meio, resultou em atividade específica de 9,8 U/g e total de 68,7 U/L. Estes resultados indicam que as baixas atividades em células de Z. mobilis cultivadas com maiores S0 se deveram a mudancas na parede celular, provocadas por concentracões elevadas de etanol, que dificultaram o transporte de substrato para as enzimas intracelulares durante a bioconversão. Esta conclusão foi confirmada em ensaios de bioconversão com células provenientes de cultivos em diferentes condicões.

Influence of different nitrogen sources on the production of the antifungal activity of Bacillus UCR-236 and application of a microtiter reader system to evaluate this activity

Bacillus UCR-236 produces antifungal activity against mycelial fungi when sodium glutamate is present in the culture medium. The use of other compounds like yeast extract, peptone or urea as nitrogen source led to growth but no antifungal activity was produced. Using inorganic-nitrogen sources the cell production was very low and no antifungal activity was produced either. A microtiter system showed to be a rapid, efficient, economic method to evaluate semi-quantitatively the antifungal activity produced