RESUMEN
Introducción. El esquema Kaufmann-White para la serotipificación de Salmonella, reconoce 46 antígenos O y 119 antígenos H, los cuales han permitido la caracterización de 2.541 serovares. La serotipificación es una herramienta epidemiológica útil en la identificación de serovares circulantes y estudio de brotes, sin embargo, presenta limitaciones técnicas, de interpretación de resultados y alto costo. Objetivo. Desarrollar una prueba de reacción en cadena de la polimerasa múltiple (PCR-M) como alternativa para identificar los serogrupos B, C2, D y E de Salmonella enterica. Materiales y métodos. Se desarrolló una PCR-M para detectar los genes rfbJ de los serogrupos B y C2 y wzx de los serogrupos D y E. Para estandarizar la PCR-M se probaron cepas de referencia de Salmonella pertenecientes a los serogrupos de estudio. Se incluyó el gen invA específico del género Salmonella como control interno de amplificación. La técnica fue validada con un estudio ciego que incluyó 400 aislamientos de Salmonella previamente serotipificados. Resultados. La PCR-M permitió identificar los serogrupos de Salmonella con resultados reproducibles (índice kappa=0,95). La sensibilidad de la prueba estuvo entre 98% y 100% y la especificidad entre 96% y 100%. Conclusiones. El polimorfismo de los genes rfbJ y wzx permitió desarrollar un método de tipificación molecular sensible, específico y reproducible, que podría servir de apoyo a la serotipificación para identificar serogrupos de Salmonella.
Introduction. The scheme Kauffman-White (KW) for serotyping of Salmonella recognizes 46 O antigens, and 119 H antigens, thereby permitting the characterization of 2,541 serotypes. The serotyping is a useful epidemiological tool in identifying circulating serotypes and to characterize outbreaks. However, the method presents technical limitations, difficulty in interpretation of results and high costs. Objective. A multiplex polymerase chain reaction test (M-PCR) was developed as an alternative method for the identification of serogroups B, C2, D, and E of Salmonella enterica. Materials and methods. The M-PCR detected Salmonella genes rfbJ of serogroups B and C2 and wzx of serogroups D and E. To standardize the M-PCR, reference strains of Salmonella serogroups were compared. Amplification of invA gender-specific gene of Salmonella was included as internal control of amplification. To validate the test, a blind study was conducted to identify by M-PCR 400 isolates that had been previously characterized by serology. Results. The M-PCR detected Salmonella serogroups with reproducible results (Kappa index=0.95). The sensitivity of the test was between 98% to 100% and specificity between 96% to 100%. Conclusions. The polymorphisms in the Salmonella genes rfbJ and wzx permitted the development of a method for molecular typing of Salmonella serogroups that was sensitive, specific and reproducible.