Peste, uma zoonose esquecida / Plague, a forgotten zoonosis

Objetivo: caracterizar aspectos epidemiológicos e clínicos fundamentais, discutir a metodologia do diagnóstico e tecer recomendações sobre as condutas perante a suspeição de casos de peste. Métodos: revisão bibliográfica e levantamento das internações e mortes por peste registradas no Sistema de Informações Hospitalares do Sistema Único de Saúde. Resultados e conclusões: a existência de diagnósticos equivocados de uma doença potencialmente fatal, além dos registros hipotéticos de internações e mortes, constitui um desafio a ser superado, pois espelha uma situação inaceitável, em que um possível e insólito diagnóstico não é investigado e acumula-se nos sistemas de informação.

Objective: to characterize ground epidemiological and clinical aspects of, discuss the methodology of diagnosis and draw recommendations about the management of suspect cases of plague. Methods: literature review and data collection of hospitalizations and deaths due to plague recorded in the Hospital Information System of the Unified Health System. Results and conclusions: the existence of mistaken diagnoses of a potentially fatal disease, as well as hypothetical records of hospitalization and deaths, is a challenge to be overcome, because it reflects an unacceptable panorama in which a possible and unusual diagnosis is not investigated and accumulates in the information systems.

Urine as a promising sample for Leishmania DNA extraction in the diagnosis of visceral leishmaniasis - a review

ABSTRACT Visceral leishmaniasis is a serious and debilitating infection with high fatality rate in tropical and subtropical countries. As clinical symptoms of visceral leishmaniasis are not so specific, confirmatory diagnostic methods with high sensitivity and specificity are needed. Noninvasive methods have been developed using urine as a clinical sample for visceral leishmaniasis diagnosis. In fact, there is a clear correlation between kidney impairment and Leishmania DNA in urine. However, it has been proved that Leishmania nucleic acid may also be isolated from patients without any sign of renal involvement. Even though urine has become a promissing biological sample, it is still not widely used due to several issues, such as (i) incomprehension of the whole renal pathophysiology process in visceral leishmaniasis, (ii) presence of many amplification inhibitors in urine, and (iii) lack of an efficient urinary DNA extraction method. In this article, we performed a literature review to bring a new perspective for Leishmania DNA isolation in urine.

Incremento da baciloscopia no diagnóstico de tuberculose pulmonar em pessoas privadas de liberdade / Increment of the microscopy in the diagnosis of pulmonary tuberculosis in inmates

Objetivo: Avaliar um procedimento de fácil execução e baixo custo para incrementar o diagnóstico da tuberculose entre pessoas privadas de liberdade sem riscos de contaminação para profissionais de laboratório. Métodos: Amostras de escarro foram analisadas por baciloscopia após tratamento com hipoclorito de sódio e sedimentação espontânea em comparação à baciloscopia direta convencional, cultura pelo método Ogawa-Kudoh e o teste molecular rápido pelo sistema Xpert®MTB/RIF. Para as análises estatísticas foram empregados os programas Open Epi e SPSS. Resultados: De 436 amostras de escarro submetidas ao cultivo 71 foram positivas (verdadeiros positivos) e dessas 50 foram positivas pela baciloscopia direta convencional e 67 pela baciloscopia do escarro processado, o que corresponde a um incremento de 29% na positividade. Conclusão: O procedimento proposto preserva as vantagens e aumenta a sensibilidade da baciloscopia direta convencional. A implementação dessa técnica para diagnóstico entre grupos vulneráveis em locais de acesso e recursos limitados poderá aumentar a identificação de casos de tuberculose pulmonar.

Multidrug-resistant Acinetobacter baumannii clones persist on hospital inanimate surfaces

ABSTRACT Acinetobacter baumannii is one of the most frequent Gram-negative opportunistic pathogens associated with hospital-acquired infection worldwide. We briefly describe A. baumannii isolates that were recovered from surrounding ICU bed surfaces, exhibiting multidrug resistance phenotype and belonging to some widely spread clonal complexes of clinical A. baumannii isolates.

Occurrence of the vanA gene in Staphylococcus epidermidis from nasopharyngeal secretion of Health-Care Workers, Recife, Brazil

Abstract INTRODUCTION: The increasing reports of vancomycin-resistant Staphylococcus strains (VRS) haves caused concern worldwide, from the laboratory detection to patient management. This study aimed to identify the occurrence of VRS strains among healthcare professionals from a university hospital. METHODS: A total of 102 Staphylococcus sp. isolates from healthcare professionals, obtained in a previous study were evaluated according to standard techniques for VRS detection. RESULTS: After screening inoculation of plates containing 6µg/ml of vancomycin, 19 resistant isolates were identified. The susceptibility profile to other antimicrobials revealed 18 multidrug resistant isolates. The minimum inhibitory concentration (MIC) was determined by E-test and broth microdilution. According to E-tests, of 19 isolates grown in BHI-V6, four isolates presented MIC ≥ 128 µg/ml, seven with MIC ranging from 4 to 8 µg/ml, and eight with MIC ≤ 2µg/ml. By broth microdilution, 14 isolates presented MIC ≤ 2 µg/ml and five with MIC ≥ 16µg/ml. The presence of the gene vanA was determined by PCR in the five resistant isolates, and this gene was detected in one of the strains. Furthermore, among the 19 strains, the gene mecA was found in 13 (39,4%) isolates, including the strain carrying the gene vanA. CONCLUSIONS: Based on these results, we highlight the presence of one strain carrying both vanA and the mecA genes, as well as multidrug-resistant strains colonizing healthcare professionals, and their importance as potential vectors to spread strains carrying resistance genes in the hospital environment.

Microscopic detection of Mycobacterium tuberculosis in direct or processed sputum smears

Abstract INTRODUCTION: Microscopic identification of active pulmonary tuberculosis (PTB) from direct smears of sputum (DS) is widely used for detection, but has limited sensitivity. Here, we assessed the yield of acid-fast bacilli (AFB) detection in processed sputum smears (PSS). METHODS: Sputum samples were simultaneously analyzed by direct sputum smearing and after chemical treatment and spontaneous sedimentation. RESULTS: Of the 1,719 samples analyzed, 16.4% were positive for AFB in conventional DS and 21.4% in PSS, corresponding to a 30% increase in detection. CONCLUSIONS: Increased sensitivity from analyzing PSS and better safety protocols will contribute to improved detection and control of the disease.

Investigação sobre o uso do ácido retinoico a 3% e a 5% em soluções para peeling como agente para drug delivery após indução percutânea de colágeno com agulhas (IPCA®): perfil de segurança e protocolo de uso / Investigation on the use of 3% and 5% retinoic acid in peeling solutions as a drug delivery agent after percutaneous induction of collagen with needles (IPCA®): safety profile and application protocol

Introdução: O ácido retinoico em solução para peelings é amplamente usado no tratamento do fotoenvelhecimento. Até o presente momento não conhecemos o grau de esterilidade dessas soluções ou a segurança de seu uso em peles cuja integridade tenha sido perdida por intervenções com microagulhas. Objetivos: Avaliar o potencial bactericida do ácido retinoico 3% e 5% em soluções para peelings com e sem tonalizante, bem como a segurança e tolerância de sua administração imediatamente após o tratamento com microagulhas. Metódos: Amostras de solução de ácido retinoico 3% e 5%, com e sem tonalizante, oriundas de duas farmácias de manipulação (A e B) foram expostas a colônias de Pseudomonas aeruginosa e Staphylococcus aureus. Essas soluções foram usadas como drug delivery após indução percutânea de colágeno com agulhas. Resultados: As amostras avaliadas em D0, D30, D60 e D90 mostraram capacidade bactericida sobre os agentes testados. O uso das soluções após a intervenção com microagulhas foi bem tolerado e apresentou resultados satisfatórios. Conclusão: A solução de ácido retinoico para peelings pode ser utilizada com segurança após procedimentos que levem à perda da integridade da barreira cutânea. A ausência de efeitos adversos e os bons resultados do procedimento permite sugerir a associação de microagulhamento e peeling de ácido retinoico como uma proposta inovadora, reproduzível e segura.

Introduction: Retinoic acid in peeling solution is widely used in the treatment of photoaging. To date, the degree of sterility of these solutions or the safety of their use in skins whose integrity has been lost through microneedling interventions is unknown. Objectives: To evaluate the bactericidal potential of 3% and 5% retinoic acid in peeling solution, with and without a colored vehicle, as well as the safety and tolerance to its administration immediately after application with microneedles. Methods: Samples of 3% and 5% retinoic acid solution, with and without a colored vehicle, prepared by two dispensing pharmacies (A and B) were exposed to Pseudomonas aeruginosa and Staphylococcus aureus colonies. These solutions were used as drug delivery agents after percutaneous induction of collagen with needles. Results: The samples evaluated in D0, D30, D60 and D90 indicated the presence of bactericidal capacity of the tested agents. The use of the solutions following intervention with microneedles was well tolerated and yielded satisfactory results. Conclusion: The retinoic acid peeling solution can be safely used following procedures that lead to a loss of integrity of the skin barrier. The absence of adverse effects and good results yielded by the procedure suggest that the association of microneedling and retinoic acid peeling is an innovative, reproducible and safe proposal.

The occurrence and dissemination of methicillin and vancomycin-resistant Staphylococcus in samples from patients and health professionals of a university hospital in Recife, State of Pernambuco, Brazil

Introduction Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) strains have been responsible for many nosocomial outbreaks. Within hospitals, colonized employees often act as reservoirs for the spread of this organism. This study collected clinical samples of 91 patients admitted to the intensive care unit (ICU), hemodialysis/nephrology service and surgical clinic, and biological samples from the nasal cavities of 120 professionals working in those environments, of a University Hospital in Recife, in the State of Pernambuco, Brazil. The main objective of this study was to determine the occurrence and dissemination of methicillin- and vancomycin-resistant Staphylococcus spp. Methods The isolates obtained were tested for susceptibility to oxacillin and vancomycin and detection of the mecA gene. In addition, the isolates were evaluated for the presence of clones by ribotyping-polymerase chain reaction (PCR). Results MRSA occurrence, as detected by the presence of the mecA gene, was more prevalent among nursing technicians; 48.1% (13/27) and 40.7% (11/27) of the isolates were from health professionals of the surgical clinic. In patients, the most frequent occurrence of mecA-positive isolates was among the samples from catheter tips (33.3%; 3/9), obtained mostly from the hemodialysis/nephrology service. Eight vancomycin-resistant strains were found among the MRSA isolates through vancomycin screening. Based on the amplification patterns, 17 ribotypes were identified, with some distributed between patients and professionals. Conclusions Despite the great diversity of clones, which makes it difficult to trace the source of the infection, knowledge of the molecular and phenotypic profiles of Staphylococcus samples can contribute towards guiding therapeutic approaches in the treatment and control of nosocomial infections. .

Development of duplex-PCR for identification of Aeromonas species

Introduction The number of reports of intestinal infections caused by Aeromonas spp. has increased significantly in recent years. In most clinical laboratories, identification of these bacteria is carried out by general phenotypic tests that sometimes do not accurately differentiate Aeromonas and Vibrio. Methods A duplex-polymerase chain reaction (PCR) was developed directed to 2 targets identifying Aeromonas spp. pathogenic to humans. Results The duplex-PCR results were reproducible and specific for Aeromonas spp. pathogenic to humans. Conclusions This method will allow differentiation between Vibrio and Aeromonas spp. in patients with in cholera-like symptoms and can also be used in water quality monitoring. .

Phenotypic methods for determination of methicillin resistance in Staphylococcus spp. from health care workers / Métodos fenotípicos para determinação da resistência à meticilina em Staphylococcus spp. de profissionais de saúde

INTRODUCTION: Staphylococcus spp. is an important healthcare-associated pathogen and the identification of methicillin-resistant strains in samples of colonization may provide data to assist in the antimicrobial therapy success. OBJECTIVES: To determine the occurrence of colonization by methicillin-resistant Staphylococcus spp. (MRS), through the detection of the mecA gene and to evaluate different phenotypic methods for the presumptive detection of methicillin resistance in samples of the anterior nasal cavity and hands of the health care personnel of a university hospital in the state of Pernambuco, Brazil. METHODS: We selected the 28 isolates of Staphylococcus spp., which showed an intermediate or resistant phenotypic profile for oxacillin, detected by the Kirby Bauer technique. The methods used were disk-diffusion tests for cefoxitin, minimal inhibitory concentration by E-test for oxacillin, screening for oxacillin resistance and mecA gene detection by polymerase chain reaction (PCR). RESULTS: About the phenotypic methods utilized, only the E-test of oxacillin did not show a statistically significant difference in relation to PCR for the mecA gene detection, considered the gold standard. CONCLUSION: The E-test of oxacillin was the best of the phenotypic methods utilized. It is necessary to correctly detect MRS in healthy individuals, because they can act as carriers and can therefore be a potential source of microorganisms involved in hospital infections.

INTRODUÇÃO: Staphylococcus spp. é um importante patógeno associado aos cuidados em saúde, e a identificação de isolados resistentes à meticilina em amostras de colonização pode fornecer dados para auxiliar no sucesso da terapia antimicrobiana. OBJETIVOS: Determinar a ocorrência de colonização por Staphylococcus spp. resistentes à meticilina (MRS) por meio da detecção do gene mecA e avaliar diferentes métodos fenotípicos para a detecção presuntiva da resistência à meticilina em amostras da cavidade nasal anterior e das mãos de profissionais de saúde de um hospital universitário no Estado de Pernambuco, Brasil. MÉTODOS: Foram selecionados 28 isolados de Staphylococcus spp. que mostraram perfil intermediário ou resistente à oxacilina, detectado pela técnica de Kirby Bauer. Os métodos utilizados foram o teste de disco difusão de cefoxitina, concentração inibitória mínima pelo E-test de oxacilina, screening para avaliação da resistência à oxacilina e reação em cadeia da polimerase (PCR) para detecção do gene mecA. RESULTADOS: Dos métodos fenotípicos utilizados, apenas o E-test de oxacilina não mostrou diferença estatística significante em relação à PCR para a detecção do gene mecA, considerado o método padrão-ouro. CONCLUSÃO: O E-test de oxacilina foi o melhor método fenotípico utilizado. É necessário detectar corretamente o MRS em indivíduos saudáveis, pois eles podem atuar como portadores, sendo uma fonte potencial de microrganismos envolvidos em infecções hospitalares.

Molecular characterization of Aeromonas spp. and Vibrio cholerae O1 isolated during a diarrhea outbreak / Caracterização molecular de Aeromonas spp. e Vibrio cholerae O1 isolados durante um surto de diarréia

This work aimed to assess pathogenic potential and clonal relatedness of Aeromonas sp. and Vibrio cholerae isolates recovered during a diarrhea outbreak in Brazil. Clinical and environmental isolates were investigated for the presence of known pathogenic genes and clonal relatedness was assessed by intergenic spacer region (ISR) 16S-23S amplification. Four Aeromonas genes (lip, exu, gcat, flaA/B) were found at high overall frequency in both clinical and environmental isolates although the lip gene was specifically absent from selected species. A fifth gene, aerA, was rarely found in A. caviae, the most abundant species. The ISR profile revealed high heterogeneity among the Aeromonas isolates and no correlation with species identification. In contrast, in all the V. cholerae isolates the four genes investigated (ctxA, tcpA, zot and ace) were amplified and revealed homogeneous ISR and RAPD profiles. Although Aeromonas isolates were the major enteric pathogen recovered, their ISR profiles are not compatible with a unique cause for the diarrhea events, while the clonal relationship clearly implicates V. cholerae in those cases from which it was isolated. These results reinforce the need for a better definition of the role of aeromonads in diarrhea and whether they benefit from co-infection with V. cholerae.

O objetivo deste trabalho foi estabelecer o potencial patogênico e a relação clonal de isolados de Aeromonas sp. e Vibrio cholerae obtidos durante um surto de diarréia. Isolados clínicos e ambientais foram investigados quanto à presença de genes de virulência e sua relação clonal foi obtida através de amplificação da Região Espaçadora Intergênica (REI) 16S-23S. Quatro genes de Aeromonas (lip, exu, gcat, flaA/B) foram encontrados em alta frequência embora o gene lip tenha se mostrado ausente em algumas espécies. Um quinto gene, aerA, foi raramente encontrado em A. caviae, a espécie mais abundante. O perfil da REI revelou alta heterogeneidade entre os isolados de Aeromonas e nenhuma correlação com espécie. Em contraste, todas as amostras de V. cholerae amplificaram os genes investigados (ctxA, tcpA, zot e ace) e revelaram perfil clonal através de REI e RAPD. Embora Aeromonas tenha sido o principal patógeno isolado, o perfil da REI não é compatível como única causa para os eventos de diarréia, enquanto a relação clonal de V. cholerae aponta esse microrganismo como o provável agente do surto. Estes resultados reforçam a necessidade de definir melhor o papel de Aeromonas em diarréias e de que forma essas bactérias se beneficiam quando em co-infecção com V. cholerae.

Coleções biológicas do Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães da Fundação Oswaldo Cruz: análise de um workshop / Biological collections from Aggeu Magalhães Research Center, Oswaldo Cruz Foundation: analysis of a workshop

Sob os auspícios da Vice-Diretoria de Pesquisas, Desenvolvimento Tecnológico e Serviços de Referência do Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães (CPqAM) da Fundação Oswaldo Cruz (Fiocruz), foi realizado em 18 de fevereiro de 2009 o I Encontro de Curadores de Coleções Biológicas do CPqAM, tendo como objetivos discutir a legislação aplicada às atividades de coleções biológicas e uniformizar os procedimentos adotados para o gerenciamento e garantia da quantidade dos acervos. No encontro foram apresentadas as quatro relações mantidas no CPqAM, reconhecidas pelo Fórum Permanente de Coleções Biológicas da Fiocruz: Coleções de Bactérias (Coleção de Culturas de Yersinia spp e Coleção de Bactérias NB2); Coleção de Vírus (Banco de Vírus do LaVITE) e Coleção Helmintológica (Laboratório de Esquistossomose). Foram tratados com destaque os aspectos de biossegurança e de biosseguridade. Constatou-se a necessidade de serem aplicados esforços no sentido de solucionar algumas inconformidades relativas a infraestrutura física, disponibilidade de recursos humanos e padronização da documentação, além da informatização dos dados do acervo do CPqAM.

Distribution of virulence markers in clinical and environmental Vibrio cholerae non-O1/non-O139 strains isolated in Brazil from 1991 to 2000

Cento e setenta e nove amostras de V. cholerae não O1/não O139, isoladas de casos clínicos (139) e de meio ambiente (40), no período de 1991 a 2000 no Brasil, foram caracterizadas antigenicamente pelo National Institute of Health (Japão) e investigadas quanto ao seu potencial genético de virulência, representado pelos genes ctxA, zot, ace e tcpA. As análises fenotípicas revelaram extraordinária diversidade antigênica, com a ocorrência de 54 diferentes sorogrupos, com prevalência para O26 (7,8%). A técnica de PCR, empregada na detecção dos genes localizados no elemento genético CTX (ctxA, zot, ace) e na Ilha de Patogenicidade de Vibrio-VPI (tcpA), possibilitou a identificação de 27 cepas contendo qualquer um desses genes. O gene ctxA (codificador da sub-unidade A de CT), só foi evidenciado no sorogrupo O26, sendo também o único capaz de se apresentar com o cassete de virulência de forma intacta. Com base nos resultados obtidos deste estudo preliminar, admite-se a hipótese da potencialidade destas cepas, evoluir para raças epidêmicas.

The pgm locus and pigmentation phenotype in Yersinia pestis

The pigmentation (pgm) locus is a large unstable area of the Yersinia pestis chromosome composed of a segment of iron acquisition (HPI) linked to a pigmentation segment. In this work we examined the mobility of HPI and the pigmentation segment in three Y. pestis isolates using successive subcultures on Congo red agar (CRA) plates. Strain P. CE 882 was shown to be highly stable while strains P. Exu 340 and P. Peru 375 dissociated into several phenotypes, PCR analysis showing evidence of changes in the pgm locus of the derived cultures. Strains P. Exu 340 and P. Peru 375 produced previously unreported cultures positive for the pesticin/yersiniabactin outer membrane receptor (psn+) but negative for the iron-regulated protein (irp2-), suggesting the occurrence of rearrangements in this chromosomal region and either a sequential loss or the loss of separated segments. These results provide evidence that besides deletion en bloc, specific rearrangements are also involved in the deletion events for that locus.

Estudo molecular de Vibrio cholerae não-O1 isolado de zooplâncton da Baía de São Marcos/São Luis - MA, Brasil / Molecular study of Vibrio cholerae non-O1 isolated from zooplankton of São Marcos Bay/São Luis - MA, Brasil

O estudo foi desenvolvido com o objetivo de analisar o perfil plasmidial, pesquisar genes de virulência e identificar os perfis genéticos de 31 cepas de Vibrio cholerae não O1 isoladas de zooplâncton dos estuários dos rios Anil e Bacanga em São Luis MA. O estudo do DNA plasmidial revelou a presença de 2 a 3 plasmídeos em 10 cepas, com pesos moleculares variando de 5,5 a 40 kilobases. A ribotipagem revelou um perfil comum a todas as cepas. A amplificação do DNA genômico por PCR não revelou os genes ctxA, ace e zot, mostrando tratar-se de cepas não patogênicas, enquanto a RAPD-PCR identificou múltiplos perfis genéticos, achado compatível com o grande potencial de variabilidade desta espécie.

Optimization of randomly amplified polymorphic DNA-polymerase chain reaction for molecular typing of Salmonella enterica serovar Typhi

A otimização da reação de RAPD para a caracterização de cepas de Salmonella enterica sorovar Typhi foi estudada com o objetivo de assegurar a reprodutibilidade e o poder discriminatório desta técnica. Oito cepas de Salmonella sorovar Typhi isoladas de algumas regiões do Brasil foram usadas para examinar os padrões de fragmentação produzidos quando foram empregadas concentrações diferentes do DNA molde, do iniciador, do MgCl2 e da enzima Taq DNA polimerase. Com a utilização de dois diferentes perfis de ciclos termais de baixa estringência, foram comparados os padrões de bandeamento obtidos. Um conjunto de dezesseis iniciadores foi avaliado quanto à capacidade de produzir elevado número de fragmentos distintos. Observou-se que variações associadas a todos os parâmetros testados modificaram os padrões de bandeamento. Para as amostras de Salmonella enterica sorovar Typhi utilizadas neste experimento, definiu-se um conjunto de condições para a reação de RAPD-PCR que resultou num método de tipagem simples, rápido e reprodutível.

Vigilância da peste no Estado do Ceará: 1990-1999 / Surveillance of plague in the State of Ceará: 1990-1999

As atividades de vigilância sorológica da peste nos focos do Estado do Ceará detectaram elevaçäo do número de animais indicadores/sentinela com anticorpos antipestosos a partir de 1995, com pico em 1997 evidenciando aumento da circulaçäo do bacilo pestoso em todos os focos investigados. De um total de 110.725 amostras de soro obtidas de roedores (7.873) e carnívoros domésticos (102.852) analisadas pela técnica de hemaglutinaçäo (HA) para detecçäo de anticorpos contra o antígeno F1 da Yersinia pestis, 905 revelaram-se positivas, sendo 15 de roedores (4 Rattus rattus e 11 Galea spp), 720 de cäes e 170 de gatos. Dos 652 casos humanos suspeitos e contatos investigados apenas dois foram positivos pela HA e um terceiro paciente foi positivo por hemocultura. A cepa isolada revelou-se altamente patogênica para animais de laboratório e mostrou sensibilidade aos antimicrobianos usados no tratamento dos doentes

Homology among extra-cryptic DNA bands and the typical plasmids in brazilian Yersina pestis strains

Yersina pestis, the etiologic agent of plague, harbors three well-characterized plasmids: pFra (90-110kb), pYV (70kb) and pPst (9.5kb). Furthermore, some extra-cryptic DNA bands have been observed in a number of wild strains from several foci of the world. Additional bands have also been reported in Brazilian strains. Looking for any relationship among these cryptic DNA bands and the three-prototypical plasmids, we analyzed twelve strains displaying different plasmid content. The DNA bands were hybridized by southern blot with probes directed at the genes cafl, lcrV and 'pla' located respectively on the plasmids pFra, pYV and pPst. The probes were constructed by PCR amplification and labeled with digoxigenin. The Pla probe hybridized with its target (pPst) and with bands of about 35 kb suggesting some homology among them. The Cafl probe hybridized with the target (pFra) as well as with higher bands. The LcrV also hybridized with the target (pYV) and both with the bands higher than pFra and the bands between pFra and pYV. These results suggest that the large-cryptic bands could represent some rearrangement, open circular or linearized forms of the pFras and pYV plasmids.

A simple PCR-based procedure for plague diagnosis

Triturados de bacos de animais infectados experimentalmente com Y. pestis, suspensos em salina foram fervidos e os sobrenadantes usados diretamente para amplificacao do PCR sem previa extracao do DNA. O limiar de deteccao pode ser aumentado por uma segunda etapa de amplificacao (Nested-PCR). Nao houve infectados usados como controle