First description of autochthonous canine visceral leishmaniasis in the metropolitan region of Vitória, State of Espírito Santo, Brazil / Primeira descrição de leishmaniose visceral canina autóctone na Região Metropolitana de Vitória, Estado do Espírito Santo, Brasil

INTRODUCTION: We investigated autochthonous canine visceral leishmaniasis (CVL) in the metropolitan region of Vitória (MRV), an area in which a human case was previously reported. METHODS: Serological, parasitological, and molecular tests were performed in 201 dogs. RESULTS: Twenty-six (13%) and 12 (6%) dogs were identified as positive using in-house enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and rK39 tests, respectively. Two dogs had a positive culture for Leishmania chagasi, and 4 were polymerase chain reaction (PCR)-positive for Leishmania spp. One positive dog belonged to the aforementioned patient. CONCLUSIONS: Although the responsible vector was not found, our results provide evidence of autochthonous CVL in the MRV, a non-endemic area for VL.

INTRODUÇÃO: Descrevemos um foco de leishmaniose visceral canina (LVC) autóctone na Região Metropolitana de Vitória (RMV) onde um caso humano foi registrado anteriormente. MÉTODOS: Testes sorológicos, parasitológicos e moleculares foram realizados em 201 cães. RESULTADOS: Vinte e seis (13%) e 12 (6%) foram positivos para um teste ELISA in house e rK39, respectivamente. Dois cães apresentaram cultura positiva para Leishmania (Leishmania) chagasi e quatro PCR positivo para Leishmania spp. Um dos cães positivo pertencia ao paciente supracitado. CONCLUSÕES: Embora o vetor não tenha sido encontrado, nossos resultados fornecem evidências da LVC autóctone na RMV, área não-endêmica para leishmaniose visceral.

Genetic diversity of Leishmania infantum field populations from Brazil

Leishmania infantum (syn. Leishmania chagasi) is the etiological agent of visceral leishmaniasis (VL) in Brazil. The epidemiology of VL is poorly understood. Therefore, a more detailed molecular characterization at an intraspecific level is certainly needed. Herein, three independent molecular methods, multilocus microsatellite typing (MLMT), random amplification of polymorphic DNA (RAPD) and simple sequence repeats-polymerase chain reaction (SSR-PCR), were used to evaluate the genetic diversity of 53 L. infantum isolates from five different endemic areas in Brazil. Population structures were inferred by distance-based and Bayesian-based approaches. Eighteen very similar genotypes were detected by MLMT, most of them differed in only one locus and no correlation was found between MLMT profiles, geographical origin or the estimated population structure. However, complex profiles composed of 182 bands obtained by both RAPD and SSR-PCR assays gave different results. Unweighted pair group method with arithmetic mean trees built from these data revealed a high degree of homogeneity within isolates of L. infantum. Interestingly, despite this genetic homogeneity, most of the isolates clustered according to their geographical origin.

Anti-Toxocara antibodies detected in children attending elementary school in Vitoria, State of Espírito Santo, Brazil: prevalence and associated factors / Anticorpos anti-Toxocara em crianças admitidas na escola fundamental em Vitória, Estado do Espírito Santo: prevalência e fatores associados

INTRODUCTION: The aim of this study was to evaluate the frequency of anti-Toxocara antibodies in serum from 7-year-old children attending elementary school in Vitória-ES, Brazil and to correlate these antibodies with socio-demographic factors, the presence of intestinal helminths, blood eosinophil numbers, past history of allergy or asthma, and clinical manifestations of helminth infections. METHODS: The detection of anti-Toxocara antibodies was performed using an ELISA (Cellabs Pty Ltd)on serum from 391 children who had already been examined by fecal examination and blood cell counts. Data from clinical and physical examinations were obtained for all children. RESULTS: The prevalence of anti-Toxocara antibodies was 51.6%, with no gender differences. No significant differences were observed between positive serology and the presence or absence of intestinal worms (60.3 and 51.7%, respectively; p = 0.286). The only variables significantly related to positive serology were onycophagy and the use of unfiltered water. Although eosinophilia (blood eosinophil count higher than 600/mm³) was significantly related to the presence of a positive ELISA result, this significance disappeared when we considered only children without worms or without a past history of allergy or asthma. No clinical symptoms related to Toxocara infection were observed. CONCLUSIONS: There is a high prevalence of anti-Toxocara antibodies in children attending elementary schools in Vitória, which may be partially related to cross-reactivity with intestinal helminths or to a high frequency of infection with a small number of Toxocara eggs.

INTRODUÇÃO: O objetivo desse estudo foi avaliar a prevalência de anticorpos anti-Toxocara em crianças admitidas no primeiro ano de escola fundamental em Vitória e correlacionar com variáveis sociodemográficas, helmintos intestinais, eosinófilos no sangue, geofagia, onicofagia, história de asma e alergia cutânea e manifestações clínicas. MÉTODOS: A pesquisa de anticorpos anti-Toxocara, utilizando um teste de ELISA (Cellabs), foi realizada em 391 crianças nas quais foram realizados exames parasitológicos de fezes e hemograma completo. Todas as crianças foram submetidas a exame clínico e físico. RESULTADOS: A prevalência de reação positiva foi de 51,6%, sem diferença entre os sexos. Não foram observadas diferenças significativas na prevalência de reação positiva em crianças com ou sem helmintos intestinais (60,3 e 51,7%, respectivamente; p = 0.286). Ainda que a frequência de eosinófilos acima de 600/mm³ tenha sido significativamente maior em crianças com sorologia positiva, a significância desapareceu quando se considerou as crianças sem helmintos intestinais ou história pregressa de asma ou alergia cutânea. As únicas variáveis significativamente correlacionadas, de modo independente, com a presença de sorologia positiva foram onicofagia e hábito de beber água não filtrada. Nenhuma criança apresentou manifestação clínica relacionada com a presença de anticorpos anti-Toxocara. CONCLUSÕES: A prevalência de anticorpos anti-Toxocara em crianças admitidas nas escolas elementares em Vitória é alta, a qual pode estar, em parte, relacionada à reação cruzada com antígenos de helmintos intestinais ou devida a frequente exposição a baixas quantidades de ovos do Toxocara.

In vitro activity of amphotericin B cochleates against Leishmania chagasi

Cochleate delivery vehicles are a novel lipid-based system with potential for delivery of amphotericin B (AmB). In this study, the efficacy of cochleates was evaluated by examining the in vitro activity of AmB cochleates (CAMB) against Leishmania chagasi in a macrophage model of infection. We demonstrate that CAMB is nontoxic to macrophages at concentrations as high as 2.5 μg/mL, whereas the conventional formulation, AmB deoxycholate, showed high toxicity at this concentration. The in vitro activity of CAMB against L. chagasi was found to be similar to that of the reference drug AmB deoxycholate, with ED50s of 0.017 μg/mL and 0.021 μg/mL, respectively. Considering that L. chagasi affects organs amenable to cochleate-mediated delivery of AmB, we hypothesize that CAMB will be an effective lipid system for the treatment of visceral leishmaniasis.

Serological reactivity of different antigenic preparations of Leishmania (Leishmania) amazonensis and the Leishmania braziliensis complex / Reatividade sorológica frente a diferentes preparações antigênicas de Leishmania (Leishmania) amazonensis e do complexo Leishmania braziliensis

Total antigen from Leishmania (Leishmania) amazonensis and isolates from the Leishmania braziliensis complex, along with their respective antigenic fractions obtained by affinity chromatography on concanavalin-A-Sepharose and jacalin-agarose columns evaluated using immunoenzymatic ELISA assay. For this, serum samples from 229 patients were used, grouped as American tegmental leishmaniasis (nº=58), visceral leishmaniasis (nº=28), Chagas disease (nº=49), malaria (nº=32), tuberculosis (nº=13) and healthy volunteers (nº=49). Samples from American tegmentary leishmaniasis showed higher reactivity with antigens isolated from the Leishmania braziliensis complex than with antigens from Leishmania amazonensis (p<0.001). ELISA assays showed a sensitivity range from 60 percent to 95 percent with antigens isolated from the Leishmania braziliensis complex. There was marked nonspecific reactivity among serum samples with the use of antigenic fractions binding with concanavalin-A and jacalin from both Leishmania complexes, in comparison with other antigens (p<0.001). The results presented in this study suggest that the use of homologous antigens increases the efficiency of anti-Leishmania immunoglobulin detection, which may be very valuable for diagnostic purposes.

Antígeno total de Leishmania (Leishmania) amazonensis e isolado do complexo Leishmania brazilienis, assim como suas respectivas frações antigênicas obtidas por cromatografia de afinidade em coluna de concanavalina-A ligada a sepharose e Jacalina ligada a agarose foram avaliadas por ensaio imunoenzimático ELISA. Para tanto, foram utilizadas amostras de soros de 229 pacientes agrupadas em leishmaniose tegumentar americana (nº=58), leishmaniose visceral (nº=28), doença de Chagas (nº=49), malaria (nº=32), tuberculose (nº=13) e voluntários saudáveis (nº=49). Houve maior reatividade das amostras de leishmaniose tegumentar americana com a utilização dos antígenos obtidos do isolado do complexo Leishmania braziliensis quando comparado com antígenos de Leishmania amazonensis (p<0,001). Observou-se ainda que a sensibilidade do teste ELISA variou de 60 a 95 por cento entre os antígenos obtidos do isolado do complexo Leishmania braziliensis. Houve acentuada reatividade inespecífica das amostras de soros com a utilização das frações antigênicas ligantes de Concanavalina-A e Jacalina de ambos os complexos Leishmania em comparação aos demais antígenos (p<0,001). Os resultados apresentados no presente trabalho sugerem que a utilização de antígenos homólogos aumentam a eficiência de detecção de imunoglobulina anti-Leishmania o que pode ser de grande valia para o propósito de diagnóstico.

Intestinal helminthes and/or Toxocara infection are unrelated to anti-HBs titers in seven-year-old children vaccinated at birth with recombinant hepatitis B vaccine

The aim of this investigation was to evaluate the possible effect of nematode infection on anti-HBs antibody levels in the serum of seven-year-old schoolchildren vaccinated at birth with the recombinant hepatitis B vaccine. Anti-HBs and anti HBc antibodies were evaluated in the sera of 100 schoolchildren with at least one intestinal nematode and/or a positive serological reaction for anti-Toxocara antibodies and in 95 schoolchildren without intestinal helminthiasis or serum anti-Toxocara antibodies. Both groups were from public elementary schools located on the urban periphery of Vitória, ES, Brazil. Among these 195 children, the median anti-HBs antibody titer was 31.3IU/ml and the frequency of titers less than 10IU/ml was 33.8 percent (95 percent CI: 27.1-40.4 percent). There were no significant differences between the medians of anti-HBs titers or the frequency of titers less than 10IU/ml between the groups with or without helminthes (29.5 and 32.9IU/ml and 33 and 34.7 percent, respectively; p>0.05). Even when the children with intestinal nematodes and/or anti-Toxocara antibodies and with blood eosinophil counts over 600/mm³ were compared with children without infection from intestinal nematodes and without anti-Toxocara antibodies, with blood eosinophil counts less than 400 eosinophils/mm³, these differences were not significant. None of the children presented anti-HBc antibodies. In conclusion, infections with intestinal nematodes and/or the presence of anti-Toxocara antibodies did not interfere with the anti-HBs antibody titers in seven-year-old children vaccinated at birth with the recombinant hepatitis B vaccine.

O objetivo dessa investigação foi avaliar um possível efeito de infecções por nematóides sobre os níveis de anticorpos anti-HBs no soro de escolares de sete anos de idade, vacinados ao nascer com a vacina recombinante para hepatite B. Anticorpos anti-HBs e anti-HBc foram avaliados no soro de 100 escolares portadores de pelo menos um nematóide intestinal e/ou uma reação sorológica positiva para anticorpos anti-Toxocara e em 95 escolares sem helmintíases intestinais e sem anticorpos séricos anti-Toxocara, todos matriculados em escolas primárias públicas situadas na periferia urbana de Vitória, ES, Brasil. Nas 195 crianças, a mediana dos títulos dos anticorpos anti-HBs foi 31,3UI/ml, e a freqüência de títulos inferiores a 10UI/ml foi de 33,8 por cento (IC a 95 por cento:27,1- 40,4 por cento). Não houve diferença significativa entre as medianas dos títulos de anti-HBs ou da freqüência de títulos inferiores a 10 UI/ml entre as crianças com ou sem helmintos (29,5 e 32,9 UI/ml e 33 e 34,7 por cento, respectivamente; p >0.05). Mesmo quando comparadas crianças com nematóides intestinais e/ou anticorpos anti-Toxocara com eosinófilos circulantes acima de 600/mm³, com crianças sem infecção com nematóides intestinais e sem anticorpos anti-Toxocara, com menos de 400 eosinófilos/mm³, aquelas diferenças não foram significativas. Nenhuma das crianças apresentou anticorpos anti-HBc. Em conclusão, infecções com nematóides intestinais e/ou presença de anticorpos anti-Toxocara não interferem nos títulos de anticorpos anti-HBs em crianças de sete anos de idade, vacinadas ao nascer com a vacina recombinante para hepatite B.