Estudo do efeito da autofagia sobre a endocitose e a adesão celular em macrófago murino in vitro / Study of autophagy the effect on endocytosis and cell adhesion in a murine macrophage in vitro

INTRODUÇÃO: A influência da autofagia em processos celulares que participam da homeostase celular, como a endocitose e a adesão celular, até o momento, foi pouco estudada. A endocitose consiste na internalização de material extracelular,quando as vesículas endocíticas são menores que 500nm é chamada de endocitose em microescala e quando as vesículas formadas são maiores que essa medida trata-se de endocitose em macroescala. Foi demonstrado que a conexão da via endocítica com a via autofágica é fundamental para a degradação de material citosólico e, subsequente, produção de energia e disponibilização de substrato para o metabolismo celular. Estudos controversos da literatura mostraram que a autofagia pode favorecer ou não interferir com a endocitose em macroescala. Além disso, alguns trabalhos demonstraram que o processo autofágico foi capaz de reduzir a reciclagem de integrinas para a membrana plasmática por alterar a endocitose em microescala envolvida na internalização desse tipo de proteína, reduzindo a capacidade de adesão e, consequentemente, a migração celular. Assim, em conjunto, esses achados evidenciam que a autofagia pode interagir e interferir com eventos celulares dependentes da participação da membrana plasmática como a endocitose e a adesão celular.OBJETIVO: No presente estudo, hipotetizamos que a prévia indução de autofagia em macrófagos é capaz de reduzir a endocitose em micro e macroescala, além de reduzir a capacidade de adesão celular. Desta forma, o objetivo desse estudo foi determinar o efeito da indução de autofagia, in vitro, sobre a endocitose e a adesão de macrófagos murino. MATERIAL E MÉTODOS: Macrófagos foram induzidos à autofagia por privação de nutrientes (starvation) ou pelo tratamento com um indutor farmacológico, a rapamicina, seguida da exposição a macromoléculas ou grandes partículas de diferentes naturezas. Além disso, após indução de autofagia, macrófagos em suspensão foram incubados em superfícies como o vidro ou uma matriz de colágeno e fibronectina para avaliação da capacidade de adesão.Os percentuais de endocitose em microescala, em macroescala e de adesão foram estimados. RESULTADOS: Mostramos que a indução de autofagia promoveu redução da capacidade fagocítica em cerca de 60% no percentual de macrófagos que internalizam grandes partículas, como levedo, sendo um mecanismo precoce e reversível. Ao passo que a indução de autofagia por privação de aminoácidos ou farmacológica não interferiu na endocitose em microescala. A indução de autofagia não alterou a endocitose de transferrina (endocitose mediada por receptores) e endocitose de BSA (endocitose de fase fluida). Em contraste, a indução de autofagia promoveu redução em aproximadamente 70% da quantidade de macrófagos que aderem a matriz de colágeno e fibronectina. Uma possível explicação para a redução da endocitose em macroescala pode estar relacionada à autofagia diminuir a disponibilidade de grandes extensões de membrana necessárias à internalização de partículas ma iores que 500nm. Alternativamente, a indução de autofagia pode estar levando a célula a uma indisponibilidade de receptores na membrana plasmática que justificaria a redução da capacidade fagocítica e de adesão do 11 macrófago murino. CONCLUSÕES: A indução de autofagia diminui a capacidade fagocítica e a capacidade de adesão do macrófago murino.

INTRODUCTION: The influence of autophagy on cellular processes that participate in cellular homeostasis, such as endocytosis and cell adhesion has been poorly evaluated. Endocytosis consists in the internalization of extracellular material and includes microscale endocytosis, when endocytic vesicles are smaller than 500nm, and macroscale endocytosis, when the formed vesicles are larger than this measure. It has been shown that the connection between the endocytic and the autophagic pathways is essential for degradation of cytosolic material and, subsequently, power generation and provision of substrate for cellular metabolism. Controversial studies showed that autophagy can improve or do not interfere with macroscale endocytosis. Furthermore, some studies demonstrated that the autophagic process reduced integrin recycling to the plasma membrane through the modulation of microscale endocytosis involved in the internalization of this protein, reducing cell adhesion and migration. Taken together, these findings show that autophagy can interact and interfere with cellular events that depend on plasma membrane participation, such as endocytosis and cell adhesion. OBJECTIVES: In the present study, we hypothesized that prior autophagy induction in macrophage reduces micro and macroscale endocytosis, as well as cell adhesion. Thus, the aim of this study was to determine the effect of autophagy induction, in vitro, on endocytosis and adhesion of murine macrophages. MATERIAL AND METHODS: Autophagy by nutrient deprivation (starvation) or by treatment with an inducer drug, rapamycin, was induced in macrophages, followed by exposure to macromolecules or large particles of different natures. Furthermore, after autophagic induction, macrophages were plated on different surfaces like glass or collagen-fibronectin matrix to evaluate cell adhesiveness. After that, the percentage of endocytosis in micro and macroscale and adhesion were determined...

Efeito da autofagia sobre a capacidade fagocítica e sobre a infecção de macrófagos de camundongos CBA/J por Leishmania amazonensis / Effect of autophagy on phagocytic capacity and the infection of macrophages from CBA /J mice by Leishmania amazonensis

A autofagia vem sendo alvo de estudos que demonstram sua participação em infecções por diversos patógenos intracelulares. A depender do patógeno, a autofagia pode facilitar a sobrevivência intracelular do patógeno ou pode funcionar como controle da infecção pela célula hospedeira. Pouco se sabe sobre a participação da autofagia na infecção por Leishmanía. Foi demonstrado que o vacúolo parasitóforo induzido por L. mexícana adquire nutrientes citosólicos por microautofagia. Além disso, recentemente foi demonstrado que a indução de autofagia promove aumento da carga parasitária de L. amazonensís em macrófagos infectados. Esses dados sugerem a participação do processo autofágico no estabelecimento da infecção por Leishmanía, como um mecanismo que favorece a sobrevivência intracelular do parasito. Assim, o objetivo desse estudo foi determinar a influência da autofagia na infecção, in vitro, de macrófagos de camundongos CBA/J por L. amazonensís. Macrófagos foram induzidos à autofagia por duas formas, fisiológica ou farmacológica, após ou antes da infecção por L. amazonensís ou exposição a partículas de levedo ou zimosan. O percentual de infecção e de fagocitose foi estimado. Os resultados mostram que a indução de autofagia, após a infecção, não altera o percentual de macrófagos infectados, mas promove o aumento na carga parasitária de macrófagos infectados por L. amazonensís. Além disso, a prévia indução de autofagia promove a inibição da capacidade fagocítica do macrófago murino. Estudos adicionais serão realizados no intuito de esclarecer os mecanismos pelos quais a indução de autofagia favorece a infecção por L. amazonensís e altera a capacidade fagocítica do macrófago murino.

Hipertonia em recém-nascidos pré-termos: características clínicas iniciais e evolução neurológica aos 12 meses / Hypertonia in Preterm newborns: clinical characteristics and neurologic evolutions at one year of age

Habitualmente os RNPT podem apresentar nos primeiros meses de vida um quadro de hipertonia transitória. Esta pesquisa teve por objetivo caracterizar clinicamente este tipo de hipertonia e observar sua relaçäo com as intercorrências clínicas no período neonatal e a evoluçäo neurológica aos 12 meses. Este trabalho foi desenvolvido no Serviço de Fisioterapia do Setor de Neurologia Infantil da Universidade Federal de Säo Paulo - Escola Paulista de Medicina, entre o período de 1993 e setembro de 1995. Os nossos resultados mostraram que o predomínio da hipertonia antes do sexto mês de vida, no RPTN, determinará um melhor ou pior prognóstico aos 12 meses

Reconstruçäo artroscópica do ligamento cruzado anterior com o tendäo do semitendíneo: estudo retrospectivo de 12 casos / Arthroscopic anterior cruciate ligament reconstruction with a three-layered semintendineous graft: retrospective studt of 12 cases

Apesar do grande número de estudos a respeito do ligamento cruzado anterior, a busca pelo seu substiituto ideal permanece um desafio. Assim, no presente estudo, pretende-se analisar os resultados obtidos com a reconstruçäo artroscópica que utiliza, como opçäo de enxerto, o tendäo do músculo semitendíneo triplo. Doze pacientes, com tempo mínimo de 6 meses de pós-operatório, foram avaliados pelo protocolo do International Knee Documentation Committee (IKDC). Dois joelhos foram graduados como normais, sete como próximos ao normal, e três como anormais. Os dados säo correlacionados entre si e se conclui que o procedimento realizado proporciona melhora dos sintomas pré-operatórios e da estabilidade articular, sem causar limitaçäo importante da mobilidade do joelho. Com o passar do tempo, novos estudos devem ser realizados englobando um maior número de pacientes e um maior tempo de acompanhamento para poder embasar consideraçöes definitivas

Background and paroxystic activities on AIDS patients' EEG

The HIV is responsible for important metabolic and structural alterations of the brain. This affected brain must react to continuous systemic metabolic fluctuations. We search for possibly resulting cerebral electric disturbance that could be found by EEG exploration. Sixty-three AIDS patients ranked as CDC group IV had their EEG background rhythm measured, and were appointed to mutually exclusiding groups delimited by medians'values of urea (24 mg/dl) and creatinine (0.9 mg/dl) seric concentrations. These groups were independently formed for each of the parameters utilized, and each data pair generated therefrom were compared between themselves to verify whether there were differences in background rhythm and the occurrence of paroxysmal activity. Background rhythm and paroxysmal activities have not statistically differed between the group whose creatinine values were lower than 0.9 mg/dl and the group whose creatinine values were equal or higher than 0.9 mg/dl. Background rhythm has not statistically differed between the group whose ures values were <24 mg/dl and the group whose urea values were =24 mg/dl; contrariwise, the occurrence of paroxysmal activities in these groups has significatively differed, being higher in the patient group whose otherwise normal urea values exceeded 24 mg/dl (0=0.02).

Ectasia da artéria basilar e acidente vascular cerebral: aspectos clínicos de 21 casos / Basilar ectasia and stroke: clinical aspects of 21 cases

A ectasia da artéria basilar (EB) é a dilataçäo do calibre em toda ou parte de sua extenspo, e/ou quando for anormalmente tortuosa em seu trajeto. As manifestaçöes clínicas säo decorrentes de compressäo de nervos cranianos, fenômeno isquêmico ou hemorrágico, síndrome de pseudo-tumor ou hidrocefalia. Procuramos descrever casos da associaçäo de EB e acidente vascular cerebral (AVC), analisar sua frequência, aspectos clínicos e os mecanismos envolvidos nas diferentes formas de apresentaçäo clínica desta entidade. Encontramos 21 pacientes com AVC e EB. A associaçäo de EB e AVC foi prevalente em indivíduos do sexo masculino após 50 anos. Os principais sintomas observados foram hemiparesia, alteraçäo de nervos cranianos e ataxia cerebelar. Na instalaçäo do AVC foram importantes as tonturas rotatórias e a cefaléia. Os infartos relacionados à EB puderam ser atribuídos a diferentes mecanismos: trombose da artéria, embolia artério-arterial, efeito de massa com angulaçäo e obstruçäo de ramos das artérias vertebrais e basilar.

Ectasia da artéria basilar e acidente vascular cerebral: estudo por imagem em 21 casos / Basilar ectasia and stroke: imaging aspects in 21 cases

A ectasia da artéria basilar (EB) pode estar envolvida em diferentes formas de manifestaçöes clínicas, sendo fundamental para seu diagnóstico a análise por métodos de imagem. Procuramos analisar os aspectos de diagnóstico de imagem em 21 pacientes com acidente vascular cerebral e ectasia da artéria basilar. Em todos os pacientes o diagnóstico da EB pôde ser feito pela tomografia computadorizada de crônio. Contudo a ressonância magnética de crânio mostrou-se o exame de diagnóstico por imagem mais completo para a avaliaçäo das relaçöes entre a EB e as estruturas adjacentes.

Juvenile systemic lupus erythematosus

With the purpose of analyzing the neurological involvement due to systemic lupus erythematosus (SLE), we evaluated 17 female patients who were seen regularly at the hospital and had been diagnosed as having SLE according to classification criteria proposed by the American College of Rheumatology revised in 1982, before the age of 16. Neurological involvement was detected in 12 patients(71 percent): headache (35 percent), extrapyramidal syndrome (35 percent), epileptic syndrome (24 percent) pyramidal syndrome (24 percent), peripheral neuropathy (12 percent) and optic neuritis (6 percent). The findings of CT scan (58 percent) and cerebrospinal fluid (50 percent) were most closely correlated to clinical neurological involvement.

Estudo de fatores clínicos preditivos para crises epilépticas após acidente vascular cerebral isquêmico / Preditive clinical factors for epileptic seizures after ischemic stroke

Apresentamos aspectos clínicos de 35 pacientes com acidente vascular cerebral isquêmico que evoluiram com crises epilépticas (Grupo 1), comparando-os a 35 pacientes com AVCI sem crises epilépticas (Grupo 2). A comparaçao das idades entre os grupos nao mostrou diferença significante. O sexo masculino e a raça branca predominaram em ambos os grupos. Diabetes melito, hipertensao arterial, ataque isquêmico transitório, acidente vascular cerebral pregresso, enxaqueca, doença de Chagas, embolia cerebral cardiogênica e uso de anticoncepcional oral nao diferiram significantemente entre os grupos. Tabagismo e etilismo foram significantemente mais frequentes no Grupo 1 (p

Gravidez, puerpério e doença vascular cerebral / Pregnancy, puerperium and cerebrovascular disease

Foram estudadas seis pacientes com doenças cerebrovasculares no período gravídico-puerperal. Uma apresentou hemorragia cerebral, três apresentaram infarto cerebral e duas trombose de seio venoso cerebral. A associaçao de fatores clínicos ao estado peculiar produzido pela gravidez parece ter resultado nas doenças apresentadas, com especial ênfase à doença de Chagas presente em todos os infartos cerebrais.

Agenesis and lipoma of corpus callosum: case report

A agenesia e lipoma do corpo caloso é uma associaçäo muito rara. Relatamos o caso de uma paciente de 18 anos com raras crises epilépticas desde os 6 anos de idade, exame neurológico normal, assim como eletrencefalograma normal. A tomografia computadorizada do crânio e a ressonância magnética mostraram o lipoma e a agenesia de corpo caloso

Epilepsy with continuous spike-waves during slow wave sleep: a clinical and electroencephalographic study

Relatamos quatro crianças epilépticas com "ponta-onda contínua durante o sono lento" (POCSL). Os principais achados clínicos foram crises parciais motoras, retardo mental e déficit motor. Os EEG se caracterizaram por complexos ponta-onda quase contínuos (>85 por cento) difusos em dois pacientes e localizados em um hemisfério nos outros dois casos. O tratamento foi eficaz no controle das crises, mas näo em relaçäo ao EEG. Achamos que este quadro tem sido pouco relatado e estudos do sono em crianças epilépticas podem revelar mais casos de POCSL

Atypical EEG pattern in children with absence seizures

Estudamos quatro crianças com o diagnóstico de crises de ausência (epilepsia generalizada primária) e com atividade delta generalizada no EEG, durante crises provocadas pela hiperpnéia. A ausência de descargas generalizadas por conplexos ponta-onda a 3 Hz, durante as crises de nossos pacientes, é achado incomum. Todas as crianças tiveram completo controle de suas crises com o valproato, assim como o desaparecimento das alteraçöes no EEG. Concluimos que a atividade delta generalizada observada no EEG de crianças durante a hiperpnéa nem sempre deve ser vista como achado normal, podendo ser um evento crítico da crise generalizada ausência

Atypical pattern related to 14 HZ positive spikes

Estudamos duas crianças com história de cefaléia, exame físico e neurológico normais, cujos EEG mostraram padräo eletrencefalográfico recentemente publicado, o potencial N associado às pontas positivas 14 Hz. Este novo grafoelemento foi observado somente durante o estado de sonolência

Subclinical rhythmic electrographic discharge in adults: an atypical evolution

A descarga eletrográfica rítmica do adulto tem sido raramente referida na literatura. Relatamos o caso de um homem de 71 anos com ataque isquêmico transitório, cujo EEG mostrou evoluçäo atípica deste padräo incomum. A tomografia computadorizada de crânio e o líquido cefalorraquidiano foram normais. Na liteatura por nós pesquisada, näo achamos outra publicaçäo com evoluçäo atípica do SREDA

Dipole reversal: an inctal feature in a patient with benign partial epilepsy of childhood with centrotemporal spike

Relatamos o caso de um menino de 15 anos com o diagnóstico de epilepsia parcial benigna da infância com ponta centrotemporal. Durante o EEG uma crise eletográfica subclínica foi gravada. As descargas estavam eletropositivas em T4 com reversäo de fase positiva entre as derivaçöes F8-T4 e T4-T6. O episódio durou menos que um minuto (45 seg). As espículas inter-ictais, na regiäo temporal média direita, reapareceram 60 seg após e estavam eletronegativas na mesma regiäo depois do término da crise eletrográfica. O mecanismo subjacente a este padräo incomum no EEG näo esta bem estabelecido

Complex partial status epilepticus in a child

Estado de mal epilético por crise parcial complexa tem sido raramente referido em crianças. Relatamos o qudro clínico de uma menina com 14 anos de idade, com crises parciais complexas desde os 10 anos e que desenvolveu estado de mal epilépico por crises parciais complexas, provavelmente por näo ser aderente ao tratamento. O exame neurológico e a tomografia computadorizada de crâneo foram normais. Durante o estado de mal epiléptico ela recebeu fenitoína e diazepam e ficou livre das crises após 5 minutos. O EEG ictal mostrou espículas e ondas lentas na regiäo temporal direita

Atypical clinical and electroencephalographic pattern in a patient with subacute sclerosing panencephalitis

Descrevemos o quadro clínico e eletrencefalográfico atípicos observados durante a evoluçäo de panencefalite esclerosante subaguada, em um menino de 14 anos. Neste paciente, com história de crises parciais complexas há duas semanas, o padräo eletencefalográfico atípico foi caracterizado por foco temporal esquerdo que evoluiu para "periodic lateralized epileptiform discharges" (PLEDs), somente durante a 3ª e 4ª semanas surgindo os clássicos complexos periódicos difusos

Melanoma maligno:estudo casuístico retrospectivo de 1982 a 1992, no Hospital Universitário da UFES / Malignant melanoma: retrospective study in the period 1982-1992, in the University Hospital of UFES

Entre 35. 695 biópsias realizadas no decênio 1982-92, no HUCAM, foram encontrados 55 casos de melanoma maligno (MM), correspondendo a 0,15 por cento dos diagnósticos histopatológicos. A distribuiçäo dos casos de MM quanto a cor e idade näo diferiram do existente na literatura. Observou-se alta freqüência de melanoma metastático e de casos em fase avançada com baixo índice de concordância (43,33 por cento) e o alto índice de inceerteza (33,33 por cento) em relaçäo ao diagnóstico clínico. Estes dados sugerem falha no diagnóstico precoce dos MM pelos médicos e/ou uma desinformaçäo da populaçäo quanto ao risco das lesöes pigmentadas. Através dos dados obtidos verifica-se que existe necessidade de divulgaçäo dos critérios clínicos de diagnósticos de melanoma maligno cutâneo (MMc) dentro da classe médica e de uma campanha de educaçäo para a populaçäo em geral, talvez associado a um programa de exame sistematizado dos indivíduos com alto risco para MM