Análise cromossômica e molecular do javali europeu Sus scrofa scrofa e do suíno doméstico Sus scrofa domesticus / Cytogenetic and molecular analysis of a european wild boar Sus scrofa scrofa and domestic swine Sus scrofa domesticus

A presente investigação teve como objetivos: analisar animais presentes em diferentes criações de javalis no estado de São Paulo, com o intuito de auxiliar a identificação de javalis "puros" assim como javalis híbridos provenientes do cruzamento com o suíno doméstico, para tanto foram utilizadas avaliação do fenótipo dos animais, análises citogenéticas e da técnica molecular de RAPD (Random Amplified Polymorphic DNA).O estudo do número de cromossomos nas células diplóides em 104 animais destinados a análise citogenética e fenotípica, revelou polimorfismo de 2n=36, 37 e 38 cromossomos. Por meio da técnica de bandamento GTG foi possível identificação da translocação Robertsoniana entre os cromossomos 15 e 17 como responsável por esse polimorfismo. Todavia, somente com a análise citogenética isolada, não foi possível determinar se a origem desse polimorfismo é decorrente das hibridações com o suíno doméstico ou se são características inerentes ao javali. Contudo, quando associado a análise citogenética com as características fenotípicas, foi possível identificar a existência de hibridações. A análise citogenética nos animais submetidos a técnica de RAPD, revelou 2n=36 cromossomos nos 16 javalis assim como 2n=38 cromossomos nos 11 suínos e, por meio dessa técnica, foram possíveis agrupamentos, separando o suíno doméstico, javali e um possível híbrido revelando-se uma técnica com potencial no auxílio da identificação de híbridos

Curso: tópicos de medicina interna, aula 9: padronização da técnica de PCR para detecção da t(14; 18) em materiais de arquivo / Course: topics in internal medicine, 9th lesson: PCR technique`s standardization on t(14; 18) detection in fixed materials

Os linfomas não-Hodgkin (LNH) são caracterizados pela proliferação de células linfocíticas. O protooncogene BCL-2 codifica uma proteína de membrana mitocondrial interna que bloqueia a apoptose. Cerca de oitenta e cinco por cento dos linfomas foliculares e trinta por cento dos difusos tê como evento inicial a t(14; 18). A translocação justapõe o BCL-2 localizado no cromossomo 18 à região codificadora da cadeia pesada da imunoglobulina (IgH) no cromossomo 14. Em decorrência desse rearranjo, a expressão do BCL-2 é exacerbada e a apoptose inibida, prolongando o tempo de vida dos linfócitos B. O objetivo deste trabalho foi a padronização da técnicde PCR para detecção da t(14; 18) em materiais de arquivo. O método foi considerado sensível, podendo ser utilizado na investigação da doença residual mínima

Chromosome sensitivity to bleomycin in G2 lymphocytes from Down syndrome patients

Inúmeros trabalhos têm demonstrado que linfócitos de pacientes com síndrome de Down apresentam uma maior freqüência de aberraçöes cromossômicas quando expostos a radiaçäo ionizante ou agentes químicos nas fases G0 ou G1 do ciclo celular, mas näo em G2, quando comparados com controles normais. Para determinar a sensibilidade de linfócitos de pacientes com síndrome de Down, na fase G2, usou-se o radiomimético bleomicina em culturas de linfócitos de 24 pacientes. Todos os pacientes mostraram trissomia livre do cromossomo 21 (47,XX + 21 ou 47, XY + 21). Indivíduos que apresentaram freqüência média de quebras cromatídicas por célula superior a 0,8 foram considerados sensíveis a droga. Nenhum controle apresentou suscetibilidade a bleomicina e entre os 24 pacientes com síndrome de Down somente um foi sensível à droga. Näo se observou qualquer diferença significativa entre os dois grupos em relaçäo as freqüências de quebras cromatídicas em linfócitos em G2, o que está de acordo com outros trabalhos. A distribuiçäo das quebras induzidas pela bleomicina, em cada grupo cromossômico, foi igual para pacientes e controles. Nenhuma diferença significativa foi observada na resposta a bleomicina entre homens e mulheres, nos dois grupos. Provavelmente, o principal fator envolvido na sensibilidade cromossômica de linfócitos de pacientes com síndrome de Down seja a fase do ciclo celular na qual a célula é tratada.

Alteraçöes cromossômicas de heterocromatina em pacientes com tumor de mama e seus familiares / Chromosomal alterations of heterochromatin in patients with breast tumor and their family members

Foram analisadas culturas de linfócitos de sangue periférico de 19 pacientes com carcinoma de mama näo tratadas e de 19 mulheres normais. De cada paciente e controle foram analisadas, no mínimo, 50 metástases C-bandadas, tendo sido verificada a regiäo heterocromática dos cromossomos 1, 9 e 16. Entre os pacientes observou-se que 6 delas apresentaram heteromorfismo da heterocromatina, por inversäo paracêntrica, enmvolvendo o cromossomo 1. O estudo familial destas pacientes, incluindo 30 membros analisados, revelou que 7 indivíduos apresentaram heteromorfismo da heterocromatina do cromossomo 1 (por inversäo paracêntrica) e 5 indivíduos, do cromossomo 9 (por inversäo pericêntrica). No grupo controle, 5 mulheres apresentaram inversäo paracêntrica envolvendo a heterocromatina do cromossomo 1, näo tendo sido realizado o estudo familial das mulheres neste grupo. De forma clara, o que diferencia o grupo de pacientes e familiares do grupo controle é que, entre as primeiras, foi detectado heteromorfismo de heterocromatina do cromossomo 9. Embora tenham sido analisadas 19 pacientes e 30 familiares, ainda näo podemos assegurar a existência de uma correlaçäo direta entre o heteromorfismo da heterocromatina do cromossomo 9 e o desenvolvimento o tumor de mama.

Genetic susceptibility to bleomycin: a twin study

Foram analisadas as freqüencias de quebras cromatídicas em metáfases obtidas a partir da cultura de linfócitos, em 16 pares de gêmeos monozigóticos (MZ) e 16 pares de gêmeos dizigóticos (DZ) normais. Foram ainda analisadas as freqüências de quebras cromatídicas induzidas pela bleomicina (BLM), na concentraçäo final de 0,03 unidade/ml de cultura. Observou-se uma diferença intrapar, altamente significante, na freqüência de quebras entre gêmeos dizigóticos e monozigóticos, antes e depois do tratamento com BLM. O coeficiente de herdabilidade foi de 85,5 por cento, e concluiu-se que fatores genéticos contribuem significativamente para a variaçäo individual que foi observada na freqüência de quebras induzidas pela bleomicina.

Variaçäo na atividade da NOR em linfócitos de pacientes com carcinoma de endométrio / NOR activity variation in lymphocytes of patients with carcinoma of the endometrium

Foram analisadas as regiöes organizadoras de nucléolos em cromossomos metafásicos de 16 mulheres normais e 16 pacientes com carcinoma de endométrio. Para essa análise foi aplicada a técnica de bandamento NOR, onde foram contados os cromossomos dos grupos D e G bandados. Verificamos que a atividade AG-NOR é significativamente mais alta nos cromossomos do grupo G de pacientes com carcinoma de endométrio, quando comparados com o grupo controle. É possível que a atividade gênica do rDNA em linfócitos PHA-estimulados está aumentada em pacientes com carcinoma de endométrio devido à liberaçäo de mediadores plasmáticos liberados pelas células neoplásicas. Provavelmente os cromossomos do grupo G säo mais sensíveis a tais mediadores do que aqueles do grupo D. Embora näo tenha sido observada diferença significativa entre pacientes com adenocarcinoma de mama e carcinoma de endométrio, a grande diferença de ambos os grupos quando comparadas com o controle foi devido às pacientes com carcinoma de endométrio, onde a frequência altamente significativa de Ag-NORs foi observada nos cromossomos do grupo G. Esta diferença poderia estar relacionada com a localizaçäo do tumor

Regiäo organizadora do nucléolo em linfócitos de pacientes com adenocarcinoma de mama / Lymphocyte nucleolus organizer region in breast adenocarcinoma patients

No presente trabalho foram analisadas metáfases mitóticas de 25 mulheres com adenocarcinoma de mama e 25 mulheres normais do grupo controle. Para essa análise foi aplicada a técnica de bandamento NOR, descrita por Pathak e Hsu (1985_ (Cytobios 43: 101-115), onde foram contados os cromossomos dos grupos D e G bandados. Concluímos que a atividade Ag-NOR é significativamente mais alta nos cromossomos do grupo G de pacientes com adenocarcinoma de mama, quando comparados com o grupo controle. Provavelmente esse aumento se deve ao fato de que os cromossomos do grupo G säo mais sensíveis aos mediadores plasmáticos liberados pelas células neoplásicas, do que os cromossomos do grupo D