Dinámica de la evolución de las formas de Blastocystis spp. en un medio de cultivo simple / Dynamics of the evolution of the forms of Blastocystis spp. in a simple culture medium

Resumen Blastocystis spp. es un parásito muy frecuente en materia fecal humana, pero la naturaleza polimórfica y el número de Blastocystis en la muestra pueden complicar su detección por microscopía. El objetivo del trabajo fue describir la dinámica de los morfotipos de Blastocystis a corto plazo en un medio de cultivo simple y determinar su aplicabilidad para utilizarlo como complemento del análisis coproparasitológico y para estudios morfológicos, bioquímicos y moleculares del parásito. Se sembraron 10 muestras de materia fecal con Blastocystis en un medio Pavlova adaptado, se examinaron diariamente por examen microscópico durante 6 días y se registraron las formas y el recuento. El desarrollo fue regular y abundante y las formas fueron de tamaños variables y claramente identificables. El cultivo ensayado puede ser útil para la detección de Blastocystis cuando existan dudas diagnósticas por microscopía, para estudios de sensibilidad y especificidad diagnóstica o cuando se requiera aumentar la carga para realizar otros estudios.

Abstract Blastocystis spp. is a very frequent parasite in human fecal matter, but the polymorphic nature and the number of Blastocystis in a sample can complicate its detection by microscopy. The objective of the present work was to describe the dynamics of Blastocystis morphotypes in the short term in a simple culture medium and to determine its applicability to use it as a complement to coproparasitological analysis and for morphological, biochemical and molecular studies of the parasite. Ten stool samples with Blastocystis were cultured in an adapted Pavlova medium and examined during 6 days by microscopy to record the forms and the count. The development was regular and abundant and the shapes were of variable sizes and clearly identifiable. The tested culture could be used for the detection of Blastocystis when microscopic diagnosis is dubious, for studies of diagnostic sensitivity and specificity or when it is necessary to increase the load to perform other studies.

Resumo Blastocystis spp. é um parasita muito frequente nas fezes humanas, mas a natureza polimórfica e o número de Blastocystis na amostra podem complicar a sua detecção através do microscópio. O objetivo do trabalho foi descrever a dinâmica dos morfotipos de Blastocystis no curto prazo em um meio de cultura simples e determinar sua aplicabilidade para ser utilizado como complemento da análise coproparasitológica e para estudos morfológicos, bioquímicos e moleculares do parasita. Foram semeadas dez amostras de fezes com Blastocystis em um meio Pavlova adaptado e examinadas diariamente através de exame microscópico durante 6 dias, registrando as formas e fazendo recontagem. O desenvolvimento foi regular e abundante e as formas foram de tamanhos variáveis e claramente identificáveis. A cultura testada pode ser útil para a detecção de Blastocystis quando houver dúvidas diagnósticas por microscopia; para estudos de sensibilidade e especificidade diagnóstica ou quando for necessário aumentar a carga para a realização de outros estudos.

Blastocystis: estudio coproparasitológico, clínico-epidemiológico y de prevalencia de subtipo 3 en pacientes de hospitales de Bahía Blanca, Argentina / Blastocystis: coproparasitological, clinical-epidemiological and prevalence study of subtype 3 in patients from hospitals in Bahía Blanca, Argentina

Resumen Blastocystis es el parásito unicelular del intestino del hombre y de otros animales más prevalente en seres humanos. Presenta gran variedad genética con múltiples subtipos (ST). Aunque se ha asociado a desórdenes intestinales y extraintestinales, su patogenicidad es discutida. Se analizaron 461 muestras de materia fecal de pacientes sintomáticos (n=380) y asintomáticos (n=81) de hospitales de Bahía Blanca, Argentina; se solicitó consentimiento informado y se completó una ficha epidemiológica. Se realizaron análisis coproparasitológicos, morfometría, recuento y tipificación de Blastocystis ST3 por PCR. La población fue: 57,3% de sexo femenino y 42,7% masculino. La prevalencia de Blastocystis fue de 31% y de Blastocystis ST3 62%. Se hallaron formas vacuolares, granulares y quísticas; las vacuolares fueron las más frecuentes. En el 64,8% de las muestras los Blastocystis fueron pequeños y escasos. El 88,4% de los pacientes sintomáticos presentó trastornos gastrointestinales, el 4% urticaria y el 7,6% fiebre, anemia y bajo peso. El 66,7% de los pacientes con urticaria presentó Blastocystis. La presencia de síntomas se asoció significativamente con Blastocystis (p<0,002). No se hallaron asociaciones estadísticas entre Blastocystis, la edad, el sexo, la disponibilidad de agua potable, de cloacas y el contacto con animales. Dentro de los síntomas sólo se encontró asociación estadística de Blastocystis con urticaria (p<0,007). No hubo asociación entre Blastocystis ST3 y sintomatología. Los resultados destacan la alta prevalencia de Blastocystis y de Blastocystis ST3, la necesidad de hacer un coproparasitológico minucioso, su asociación estadística con urticaria y la importancia de no ignorarlo en el proceso salud-enfermedad.

Abstract Blastocystis is the unicellular parasite of the intestine of man and other animals,most prevalent in humans. It has a great genetic variety with multiple subtypes (ST). Although it has been associated with intestinal and extraintestinal disorders, its pathogenicity remains unclear. Four hundred and sixty one stool samples from symptomatic (n=380) and asymptomatic(n=81) patients from hospitals in Bahía Blanca, Argentina were analysed; informed consent was requested and an epidemiological file was completed. Coproparasitological analysis, morphometry, counting and typing of Blastocystis ST3 were performed by PCR. The population was: 57.3% female and 42.7% male.The prevalence of Blastocystis was 31.0% and that of Blastocystis ST3 62%. Vacuolar, granular and cystic forms were found, with vacuolar forms being the most frequent. Blastocystis were small and scarce in 64.8% of the samples. Most of the symptomatic patients (88.4%) presented gastrointestinal disorders, urticaria 4% and fever, anemia and low weight 7.6%; 66.7% of the urticaria patients presented Blastocystis. The presence of symptoms was significantly associated with Blastocystis (p<0.002). No statistical associations were found between Blastocystis, age, sex, availability of drinking water, sewage, and contact with animals. Within the symptoms, only statistical association of Blastocystis with urticaria was found (p<0.007). There was no association between Blastocystis ST3 and symptomatology. The results highlight the high prevalenceof Blastocystis and Blastocystis ST3, the need for a thorough coproparasitology, their statistical association with urticaria and the importance of not ignoring it in the health-disease process.

Resumo Blastocystis é o parasita unicelular do intestino do homem e outros animais, mais prevalente em seres humanos. Apresenta grande variedade genética com múltiplos subtipos (ST). Embora tenha sido associada a distúrbios intestinais e extraintestinais, sua patogenicidade é debatida. Foram analisadas 461 amostras de fezes de pacientes sintomáticos (n=380) e assintomáticos (n= 81) de hospitais de Bahía Blanca, Argentina; foi solicitado consentimento informado e preenchida uma ficha epidemiológica. Foram realizadas análises coproparasitológicas, morfometria, contagem e tipificação de Blastocystis ST3 por PCR. A população era: 57,3% sexo feminino e 42,7% masculino. A prevalência de Blastocystis foi de 31,0% e de Blastocystis ST3 62%. Foram encontradas formas vacuolares, granulares e císticas, sendo as vacuolares as mais frequentes. Em 64,8% das amostras, os Blastocystis foram pequenos e escassos; 88,4% dos pacientes sintomáticos apresentaram distúrbios gastrointestinais, 4% urticária e 7,6% febre, anemia e baixo peso; 66,7% dos pacientes com urticária apresentaram Blastocystis. A presença de sintomas foi associada significativamente com Blastocystis (p˂0,002). Não foram encontradas associações estatísticas entre Blastocystis, a idade, sexo, a disponibilidade de água potável, de esgoto e o contato com animais. Dentro dos sintomas, só foi encontrada associação estatística de Blastocystis com urticária (p˂0,007). Não houve associação entre Blastocystis ST3 e sintomatologia. Os resultados destacam a alta prevalência de Blastocystis e Blastocystis ST3, a necessidade de fazer um coproparasitologico minucioso, sua associação estatística com urticária e a importância de não ignorá-lo no processo saúde-doença.

Miasis humana en Bahía Blanca, Argentina: periodo 2000 / 2005 / Human myiasis in Bahía Blanca, Argentina: period 2000 / 2005

Se entiende por miasis a la infestación de vertebrados vivos por larvas de dípteros, que por lo menos durante un corto período, se alimentan de los tejidos vivos o muertos del hospedador, de sus sustancias corporales líquidas o del alimento por él ingerido. El objetivo del presente trabajo fue determinar las especies bioagentes de miasis humanas ocurridas en la ciudad de Bahía Blanca, Argentina, durante el período comprendido entre el 01/03/2000 y el 31/05/2005. Se estudiaron 17 casos clínicos. Las larvas extraídas de las lesiones fueron remitidas de laboratorios y hospitales públicos y privados de dicha ciudad. Parte de las larvas se fijó en alcohol 70° y se procesó según la técnica de Mazza & Jõrg (1939). El resto se crió en condiciones de laboratorio hasta la obtención de los adultos. Se observaron las características diagnósticas de las larvas III y de los ejemplares adultos y se clasificaron taxonómicamente. Las especies bioagentes fueron: Cochliomyia hominivorax (Coquerel) en trece de los casos y Phaenicia sericata (= Lucila sericata) (Meigen) (Diptera: Calliphoridae) en los cuatro restantes. Las miasis fueron traumáticas y aurales, se presentaron durante los meses de Diciembre a Marzo, en la franja etaria de 4 a 86 años, siendo el 76,5 por ciento de los casos de presentación en pacientes masculinos. Teniendo en cuenta la voracidad de las larvas, principalmente las de C. hominivorax, resulta claro que el diagnóstico rápido de miasis y la aplicación del tratamiento adecuado son decisivos para que esta parasitosis se resuelva sin consecuencias graves para el paciente.

Myiasis is the infestation of live human and vertebrate animals with dipterous larvae which, at least for a short period, feed on the host's dead or living tissue, liquid body-substance, or ingested food. The objective of this study was to identify the flies producing myiasis in Bahía Blanca city, Argentina, from 01/03/2000 to 31/05/2005. Seventeen clinical cases were studied. The larvae obtained from lesions were forwarded from laboratories and from public and private hospitals. Part of the larvae were fixed in alcohol 70° and processed according to the Mazza & Jõrg technique (1939). The other part continued growing in flasks with meat in laboratory conditions to obtain the adults. The etiological agents of myiasis were identified by observing the diagnostic characteristics of the larvae III and of the adults, and by using taxonomic keys. Myiasis was produced by Cochlyiomia hominivorax (Coquerel) in thirteen of the cases and by Phaenicia sericata (= Lucila sericata) (Meigen) (Diptera: Calliphoridae) in the other four. The cases were traumatic and aural myiasis and happened from December to March. The ages of patients were four to eighty-six years and 76.5 percent of the cases occurred in male patients. Given the aggressiveness of these larvae, mainly C. hominivorax, in causing human myiasis, the importance of specific and quick diagnosis and of adequate treatment must be acknowledged.

Parásitos en aguas del arroyo Napostá, aguas de recreación y de consumo en la ciudad de Bahia Blanca (Provincia de Buenos Aires, Argentina) / Parasites in water used for consumption and for recreational purposes as well as in the water from arroyo Naposta in city of Bahia Blanca, Province of Buenos Aires, Argentina

The aim of the present study was to detect the presence of sanitarily important parasit es in the water from Arroyo Napostá as well as in the water used for recreational purposes (public swimming-pools) and for consumption in the city of Bahía Blanca, province of Buenos Aires, Argentina. To this end, 24,000 liters of water from different sectors of Arroyo Napostá; 2,000 liters of water from each of the three public swimming-pools of Bahía Blanca; and 8,000 liters of water for consumption were collected using polypropylene spun cartridge filters with a 1 mm porosity (Cuno Micro Wind II). Further processing was conducted following Madore´s technique (1987) modified by Pezzani (2000). Detection of Cryptosporidium sp. Giardia sp. was carried out via direct immunofluorescence. Our study confirmed the presence of the following parasites in the areas of study: Hymenolepis diminuta eggs, Giardia sp cysts, Toxocara sp eggs, Entamoeba sp cysts, Endolimax sp cysts, Nematode larvae, Trichostrongylus sp eggs, Ascaris sp eggs, and Cryptosporidium sp cysts in the water from Arroyo Napostá; Hymenolepis diminuta eggs, Giardia sp cysts, Toxocara sp eggs, Entamoeba sp cysts, Endolimax sp cysts, Nematode larvae, Trichostrongylus sp eggs, Ascaris sp in the water from swimming-pools; and Cryptosporidium sp in the water for consumption. The results from the present study urge sanitary authorities from the city of Bahía Blanca to take measures in order to prevent not only humans but also animals from getting in contact with these waters which are contaminated and dangerous to health.

El objetivo del presente trabajo fue detectar la presencia de parásitos de importancia sanitaria para el hombre, en el arroyo Napostá, en aguas recreacionales (piscinas públicas) y de consumo en Bahía Blanca (Provincia de Buenos Aires) Argentina. Se recolectaron 24.000 litros de agua de diferentes sectores del arroyo Napostá, 2.000 litros de cada una de las tres piscinas públicas y 8.000 litros de agua de consumo, mediante filtros de poro de una micra de diámetro (Cuno Micro Wind). El procesamiento posterior se efectuó siguiendo la técnica de Madore (1) modificada por Pezzani (2). La detección de Cryptosporidium sp. Giardia sp. se realizó mediante inmunofluo-rescencia directa. Las formas parasitarias observadas, fueron: huevos de Hymenolepis diminuta, quistes de Giardia sp, huevos de Toxocara sp, quistes de Entamoeba sp. Quistes de Endolimax sp, larvas de Nematodos, huevos de Trichostrongylus sp, huevos de Ascaris sp y quistes de Cryptosporidium sp. en las aguas del Arroyo Napostá; huevos de Hymenolepis diminuta, quistes de Giardia sp, huevos de Toxocara sp, quistes de Entamoeba sp. quistes de Endolimax sp, larvas de Nematodos, huevos de Trichostrongylus sp, huevos de Ascaris sp. en agua de piscina; y quistes de Cryptosporidium sp. en agua de consumo.En conclusión es necesario que las autoridades sanitarias adopten medidas tendientes a evitar que el hombre y los animales tomen contacto con estas aguas contaminadas y peligrosas para la salud.

Dípteros ciclorrafos de importancia sanitaria en Bahía Blanca, Provincia de Buenos Aires / Sanitary cycloraphic dipterans in Bahía Blanca, Buenos Aires Province

El orden Díptera incluye a un grupo de insectos pertenecientes al suborden Cyclorrapha (moscas) con importancia médico-sanitaria, ya que algunas especies pueden transmitir enfermedades actuando como vectores mecánicos, vectores biológicos y/o parásitos (miasis). Se realizó la determinación taxonómica de ciclorrafos colectados en la ciudad de Bahía Blanca, a partir del año 2000 hasta la fecha. El material analizado se obtuvo por captura manual de adultos, captura con cebo y extracción de larvas vivas de lesiones humanas. En base a las características morfológicas de larvas III y de adultos, se determinaron las siguientes especies: Cochliomyia hominivorax (Coquerel, 1858); Phaenicia sericata (Meigen,1826); Chrysomya megacephala (Fabricius, 1794); Calliphora vicina (Robineau-Desvoidy, 1830); Chrysomya albiceps (Wiedemann, 1819); Sarcophaga crassipalpis (Macquart, 1839); Sarconesia chlorogaster (Wiedemann, 1831); Microcerella acridiorum (Blanchard, 1939); Musca domestica (L. 1758) y géneros indeterminados de las familias Anthomiidae y Drosophilidae. Las dos primeras especies correspondieron a casos de miasis humanas. La fauna de ciclorrafos que se informa constituye un registro preliminar de la biodiversidad de este grupo.

The order Diptera comprises a group of insects that belong to the order Cyclorrapha (flies). These insects are important because of medical and health reasons, since some species can transmit diseases acting as mechanical vectors, biological vectors and/or parasites (myasis). The taxonomic determination of Cyclorrapha collected in the city of Bahía Blanca from the year 2000 to the present was carried out. The material analyzed was obtained by hand-catching or bait-catching adult insects and by extraction of living larvae from human lesions. Based on the morphological characteristics of larvae III and adults, the following species were determined: Cochliomyia hominivorax (Coquerel, 1858); Phaenicia sericata (Meigen, 1826); Chrysomya megacephala (Fabricius,1794); Calliphora vicina (Robineau-Desvoidy,1830); Chrysomya albiceps (Wiedemann, 1819); Sarcophaga crassipalpis (Macquart,1839); Sarconesia chlorogaster (Wiedemann,1831); Microcerella acridiorum (Blanchard, 1939); Musca domestica (L. 1758) and some non-determined genders belonging to Anthomiidae and Drosophilidae families. The first two species correspond to myasis in humans. The Cyclorrapha fauna reported is a preliminary record of the biodiversity of this group.