RESUMEN
Taraxacum officinale leaves were collected at two and 5 months of growth, for antiviral activity against flavivirus, using the 17D vaccine strain of yellow fever virus as a model. Using spectroscopy technique, a total of twelve (12) compounds were identified in the chloroform (C) and hexane (H) extracts of two and five months (2M and 5M) of recollection., The antiviral activity against the yellow fever 17D virus was evaluated with the plaque assay and the concentrations used (50 - 1,5 ug/mL) were no cytotoxic to Vero cells as determined using the MTT(3-(4,5-Dimetiltiazol-2yl)-2,4-difenilbromuro de tetrazolium) assay. The phytochemical composition of leaves growing for 5 months is different and more complex than leaves growing for 2 months. From the four extracts, only C5M inhibited the viral replication in a dose depend manner, with 100 percent viral inhibition at 50 ug/mL (p=0,0124) and the effective doses 50 (ED50: 10,2 +/- 8,7 ug/mL), meanwhile, ED50 of C2M extract was 93,5 +/- 23,5 ug/mL, thus, the extract C5M is 8 times more effective than extract C2M. The identified compounds in extract C5M were: Psi taraxasteryl acetate, cafeic acid, taraxasteryl acetate, taraxerol, taraxerilo acetate and Psi-taraxasterol. One of these compounds or the combinations of them is responsible for the reported high antiviral activity.
Las hojas de Taraxacum officinale fueron colectadas a dos y cinco meses de crecimiento, para determinar actividad antiviral contraflavivirus, utilizando como modelo el virus de fiebre amarilla cepa vacunal 17D. Se identificaron por métodos espectroscópicos, un total de doce (12) compuestos provenientes de los extractos de hexano (H) y cloroformo (C) a dos y cinco meses (2M y 5M) de recolección La actividad antiviral se determinó mediante un ensayo de placa y las concentraciones de extractos utilizadas (50-1,5 ug/mL) fueron no citotóxica en células Vero, determinadas por el método colorimétrico del MTT (3-(4,5-Dimetiltiazol-2yl)-2,4-difenilbromuro de tetrazolio). La composición fitoquímica de los extractos de 5 meses es distinta y más compleja que la de dos meses de crecimiento. De los cuatro extractos sólo el C5M inhibió la replicación del virus en una manera dosis dependiente, con una inhibición del 100 por ciento a 50 ug/mL (p=0,0124) y una dosis efectiva 50 (DE50) de 10,2 +/- 8,7 ug/mL, mientras que el DE50 del extracto C2M es de 93,5 +/- 23,5 ug/mL, lo que hace al extracto clorofórmico de 5 meses aproximadamente 8 veces más efectivo que el C2M. Los compuestos presentes en el extracto C5M son Psi taraxasterilo, ácido cafeíco, acetato de taraxasterilo, taraxerol, acetato de taraxerilo y Psi-taraxasterol. Uno o más de estos compuestos son responsables de alta actividad antiviral reportada.
Asunto(s)
Antivirales/farmacología , Extractos Vegetales/farmacología , Flavivirus , Hojas de la Planta/química , Taraxacum/química , Taraxacum/farmacología , Fiebre AmarillaRESUMEN
El objetivo de esta investigación fue determinar la actividad biológica de extractos de tres plantas sobre bacterias patógenas para el humano. Se determinó la citotoxicidad de extractos y fracciones de Parinari sprucei, Couepia paraensis y Lantana camara L. y se evaluó su actividad antibacteriana mediante el ensayo colorimétrico del 3-(4,5-dimetiltiazol-2yl)-2,4-difenilbromuro de tetrazolio (MTT), utilizando sólo concentraciones inocuas en todos los ensayos realizados. La CMI se determinó con el ensayo de micro dilución MTT y se evaluó la actividad de los posibles agentes antimicrobianos por el método de difusión en agar de Kirby-Bauer. La CMI de los extractos metanólico de C. paraensis y diclorometano/etanol de P. sprucei sobre Staphylococcus aureus fue 25 µg/mL, mientras que la CMI con el extracto etanólico de P. sprucei fue 50 µg/mL. La CMI de la fracción 19 de L. camara L. sobre Acinetobacter haemolyticus y S. aureus fue 50 µg/mL. Los halos de inhibición obtenidos con los extractos metanólico de C. paraensis, y diclorometano/etanol y etanólico de P. sprucei sobre S. aureus fueron de 8, 9 y 7 mm, respectivamente. Los extractos de la familia Verbenaceae no presentaron actividad antibacteriana, mientras que los de la familia Chrysobalanaceae inhibieron la replicación de bacterias grampositivas.
The citotoxicity of extracts and fractions obtained from three plants was determined, and their antibacterial activity was evaluated through a colorimetric assay with tetrazolium 3-(4,5-dimethilthiazol-2yl)-2,4-diphenilbromide (MTT)), using only innocuous concentrations in all the assays carried out. The MIC was determined by the MTT micro dilution assay, and the activity of the possible antimicrobial agents by the Kirby-Bauer agar diffusion test. The MIC of a methanol extract from Couepia paraensis, and a dichloromethanol/ethanol from Parinari sprucei over S. aureus was 25 µg/mL, while the MIC with the ethanol extract from P. sprucei was 50 µg/mL. The MIC of fraction 19 of Lantana camara L. over A. haemolyticus and S. aureus was 50 µg/mL. The inhibition halos obtained with the C. paraensis methanol extracts, and the P. sprucei over S. aureus dichloromethanol/methanol and ethanol extract, were 8, 9 and 7 mm respectively. The Verbenaceae family extracts did not present any antibacterial activity, while those of the Chrysobalanaceae family inhibited replication of gram positive bacteria.
RESUMEN
From the cholroform extract of the aerial parts of Couepia paraensis the triterpenes beta-sitosterol1, betulinic acid acetate 2, and oleanolic acid acetate 3, were isolated. Six triterpenes from the chloroform-methanol, acids: oleanolic 4, pomolic 5, ursolic 6, betulinic 7, 6-beta-hydroxybetulínic 8. Additionally from the methanolic extract three flavonoids were isolated: mricetin 9, quercetin 10 y rutina 11. The chloroform and chloroform-methanol extracts were not citotoxic at concentration of 2,5 and 3,1 ug/ml respectively after 24 hours of incubation. The methanol extract was found to be harmless to a concentration of 50 ug/ml, both at 24 hours (LD50 = 10.77 ug/ml) and 120 hours (LD50 = 28.86 ug/ml) of incubation. Only the methanol extract showed significant inhibition (41 percent) of the activity of G-6-Pase in intact microsomes without affecting the activity of the enzyme in microsomes broken.
Se aislaron e identificaron tres triterpenos: beta-sitosterol 1, acetato del ácido betulínico, 2 y acetato del ácido oleanólico 3 del extracto clorofórmico. Seis triterpenos del extracto cloroformo: metanol (9:1) que fueron identificados como ácidos: oleanólico 4, pomólico 5, ursólico 6, betulínico 7, 6-beta-hidroxibetulínico 8. Mientras que del extracto metanólico se identificaron 3 flavoniodes: miricetina 9, quercetina 10 y rutina 11. Los extractos de cloroformo y cloroformo /metanol resultaron inocuos hasta las concentraciones de 2,5 y 3,1ug/ml respectivamente, después de 24 horas de incubación. El extracto metanólico es inocuo hasta una concentración de 50 ug/ml, tanto a 24 horas (LD50 = 10,77 ug/ml) como a 120 horas (LD50 = 28,86 ug/ml) de incubación. Solamente el extracto metanólico mostró una inhibición significativa (41 por ciento) de la actividad de la G-6-Pasa de microsomas intactos sin afectar la actividad de la enzima en microsomas rotos.
Asunto(s)
Citotoxinas , Chrysobalanaceae/química , Flavonoides/análisis , /antagonistas & inhibidores , Triterpenos/análisis , Factores de TiempoRESUMEN
Mediante fraccionamientos por solubilidad y métodos cromatográficos del extracto metanólico de las hojas de Hirtella castillanum se aislaron cuatro flavonoides: Quercetina (1), Quercetina-3-ramnósido (2), Miricetina (3) y mirecitina-3- ramnósido (4). De los mismos, solo Quercetina mostró una apreciable actividad antiviral ante el virus herpes simple tipo 2 (VHS-2) y el virus de la encefalitis equina Venezolana (EEV) en ensayos in vitro.
Asunto(s)
Encefalomielitis Equina , Herpes Simple , Quercetina , Medicina , VenezuelaRESUMEN
Mediante fraccionamientos por solubilidad y métodos cromatográficos (sephadex LH20 y sílica gel RP-18) del extracto metanólico de las hojas de licania pittieri, se aislaron cinco flavonoides: quercetina (1), quercetina-3-galactósido (2), quercetina-3-rhamnósido (3), quercetina-3-arabinofuranósido (4) y (2R, 3R) taxifolina-3-rhamnósido (5). De los mismos, sólo quercetina mostró apreciable actividad antiviral ante el virus de fiebre amarilla (FA) en ensayos in vitro