RESUMEN
Human HOX genes encode transcription factors that act as master regulators of embryonic development. They are important in several processes such as cellular morphogenesis and differentiation. The HOXB5 gene in particular has been reported in some types of neoplasm, but not in oral cancer. OBJECTIVE: The present study investigated the expression of HOXB5 in oral squamous cell carcinoma (SCC) and in non-tumoral adjacent tissues, focusing on verifying its possible role as a broad tumor-associated gene and its association with histopathological and clinical (TNM) characteristics. MATERIAL AND METHODS: RT-PCR was performed to amplify HOXB5 mRNA in 15 OSCCs and adjacent non-tumoral epithelium. A possible association with TNM and histopathologic data was verifed by the chi-square and post-hoc t-test. RESULTS: HOXB5 was amplifed in 60 percent non-tumoral epithelium and in 93.3 percent carcinomas. No statistically signifcant differences were found regarding the HOXB5 mRNA expression and TNM or histological grade. CONCLUSION: HOXB5 is expressed in OSCCs and its role in cancer progression should be further investigated.
Asunto(s)
Adulto , Anciano , Anciano de 80 o más Años , Femenino , Humanos , Masculino , Persona de Mediana Edad , Adulto Joven , Carcinoma de Células Escamosas/genética , Regulación Neoplásica de la Expresión Génica/genética , Proteínas de Homeodominio/genética , Neoplasias de la Boca/genética , Carcinoma de Células Escamosas/patología , Genes Homeobox/genética , Neoplasias de la Boca/patología , Reacción en Cadena de la Polimerasa de Transcriptasa Inversa , ARN Mensajero/genéticaRESUMEN
Os genes HOX são importantes para o controle do desenvolvimento embrionário e regulam aspectos da morfogênese e diferenciação celular. A associação entre os genes HOX e o processo da oncogênese tem sido verificada em casos de carcinomas de cólon, pele, rim, pulmão, mama, leucemias e outros tipos de câncer. O objetivo deste trabalho foi verificar a expressão de genes HOX em linhagens celulares de carcinomas epidermoides de cabeça e pescoço. Para tanto, utilizamos a técnica RT-PCR para analisar a expressão de três grupos de genes HOX em linhagens celulares de carcinomas epidermoides de cabeça e pescoço: HN-6, HN-19, HN-30 e HN-31, utilizando-se os primeiros degenerados HOX1, HOX2 e HOX3 e coamplificação com o gene constitutivo da β-actina. Material de gengiva humana e embrião de camundongo foram utilizados como controle de expressão do gene HOX. Os resultados obtidos mostraram que a expressão dos genes HOX apresentou padrão semelhante aos controles utilizados. Houve, porém, subexpressão do grupo HOX1 nas linhagens HN-6 e HN-19 e superexpressão do grupo HOX-2 na linhagem HN-31. Esses achados nos permitem levantar a hipótese de que os genes HOX podem participar das alterações moleculares observadas em carcinomas epidermoides de cabeça e pescoço.
Asunto(s)
Carcinoma de Células Escamosas , Genes Homeobox , Técnicas In Vitro , Reacción en Cadena de la Polimerasa , Encía , Neoplasias de Cabeza y Cuello , ARN MensajeroRESUMEN
A técnica de hibridização in situ (ISH) tem sido usada para identificar mRNA (ou DNA) em amostras de tecido de material humano e animal. Embora uma série de protocolos para essa técnica seja utilizada, as descrições não são bem detalhadas. O objetivo deste trabalho é descrever a reação de hibridização in situ em tecido fresco e sua aplicação em patologia, tornando mais compreensível essa técnica tão importante, que possibilita observar a localização tecidual e a expressão temporal e espacial dos transcritos de um determinado gene (mRNA). Resultados de reações com as ribossondas PITX1, SHH e WNT-5A, realizadas em amostras de tecido congelado, são apresentados.
In situ hybridization (ISH) has been used to identify mRNA (or DNA) in fresh tissue samples of humans and animals. Several protocols describing this technique are available, although its description is not usually detailed enough. The present work describes in situ hybridization reaction on fresh tissue in a way to make understandable this important technique, which allows verifying the cellular localization, and the spatial and temporal expression, of gene transcripts (mRNA). Results with PITX1, TGIF, SHH and WNT-5A riboprobes, in fresh tissue samples, are presented.
Asunto(s)
Hibridación in Situ/métodos , Sondas ARN , Fijación del Tejido , Técnicas HistológicasRESUMEN
Vários estudos mostram que a perda da função do gene TP53 desempenha um importante papel na gênese de diversas neoplasias, incluindo as neoplasias de glândula salivar. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar a presença de mutações no gene TP53 em neoplasias de glândula salivar. Para isso, DNA genômico foi extraído de casos de adenoma pleomórfico (AP), carcinoma em adenoma pleomórfico (CAP), carcinoma mucoepidermóide (CME), carcinoma adenóide cístico (CAC) e adenocarcinoma polimorfo de baixo grau de malignidade (APBG) emblocados em parafina. Foi realizada amplificação pela técnica da PCR dos exons 5 a 8 e em seguida a SSCP (análise de conformação de fita simples). Foi observada alteração na mobilidade das bandas em 9 das 18 neoplasias estudadas, principalmente nos exons 5 e 8. Esses achados sugerem que mutações no gene TP53 estão relacionadas à patogênese das neoplasias de glândula salivar e que os exons 5 e 8 estão mais freqüentemente envolvidos.
Asunto(s)
Humanos , /genética , Mutación/genética , Neoplasias de las Glándulas Salivales/genética , Adenocarcinoma/genética , Adenoma Pleomórfico/genética , Carcinoma Adenoide Quístico/genética , Carcinoma Mucoepidermoide/genética , Carcinoma/genética , ADN de Neoplasias/genética , Exones/genética , Genoma/genética , Neoplasias Primarias Múltiples/genética , Reacción en Cadena de la Polimerasa , Polimorfismo Conformacional Retorcido-Simple , Glándulas Salivales Menores/patologíaRESUMEN
Os genes homeobox são uma família de genes reguladores que são vitais para vários aspectos do crescimento e diferenciação celular. Recentemente, implicações dos genes HOXA7, HOXC6 e TGIF na gênese e progressão tumoral vêm sendo verificadas. Entretanto, o envolvimento desses genes em carcinomas epidermóides (CE) de boca ainda não foi demonstrado. A possível presença de transcritos dos genes HOXA7, HOXC6 e TGIF em carcinomas epidermóides de boca e em tecidos não tumorais adjacentes (TN) foi analisada. Os transcritos dos genes foram amplificados por RT-PCR e sua localização celular determinada por hibridização in situ (ISH) com sondas de mRNA específicas. A amplificação do HOXA7 foi observada em 70 por cento dos casos sendo 15 por cento apenas nas amostras TN, 45 por cento somente nos CEs e 10 por cento em ambos tecidos. Nenhuma amplificação do HOXC6 foi observada. O TGIF foi amplificado em 80 por cento dos casos, sendo 5 por cento somente nas amostras TN, 20 por cento nos CEs e 55 por cento em ambos tecidos. Análises estatísticas mostraram que não havia diferença significante entre a amplificação do transcrito HOXA7 ou TGIF e o tipo de tecido analisado. Além disso, nenhuma associação entre a amplificação dos transcritos nas amostras CE e os aspectos clínicos foi observada. O sinal de hibridização in situ foi similar para os transcritos HOXA7 e TGIF. Nas amostras TN o sinal da ISH foi intenso no epitélio, ora disperso sendo mais proeminente na camada espinhosa ora mais proeminente nas camadas basais e suprabasais. Nos CEs os transcritos foram localizados por toda neoplasia sendo que o sinal era menor em áreas menos diferenciadas. Esses resultados mostram que o HOXC6 não está envolvido com a carcinogênese oral enquanto que a presença dos transcritos HOXA7 e TGIF principalmente em regiões bem diferenciadas dos carcinomas epidermóides de boca sugere uma participação desses genes nesta neoplasia