Niveles de citoquinas megacariocitopoyéticas en pacientes con trombocitemia esencial y su relación con características clínicas y bioquímicas / Megakaryopoietic cytokine levels in patients with essential thrombocythemia and their relationship with clinical and biochemical features

La megacariocitopoyesis y la producción de plaquetas están regidas por factores de transcripción y citoquinas presentes en el microambiente medular. La trombocitemia esencial (TE) es una enfermedad mieloproliferativa crónica caracterizada por aumento del recuento de plaquetas e hiperplasia megacariocítica. En el presente trabajo se evaluaron los niveles de las citoquinas que participan en el desarrollo megacariocítico en plasma de pacientes con TE que se encontraban sin tratamiento y los de trombopoyetina (TPO) antes y durante el tratamiento con anagrelide. Las determinaciones se realizaron por técnica de ELISA. Dentro de las citoquinas involucradas en la etapa de proliferación, los niveles de interleuquina 3 (IL-3) se encontraron aumentados en los pacientes (p=0.0383) respecto al grupo control. Los niveles de factor estimulante de colonias granulocito-macrofágico y stem cell factor fueron normales. Dentro de las citoquinas con acción sobre la maduración megacariocítica, tanto la interleuquina 6 como la interleuquina 11 y la eritropoyetina estuvieron normales. Los niveles de TPO antes del tratamiento no difirieron del grupo control y durante el tratamiento aumentaron de manera no significativa. Los pacientes que presentaron agregación espontánea tuvieron niveles más altos de TPO que los que no lo hicieron (p=0.049). Los niveles de las citoquinas no tuvieron relación con ninguno de los parámetros clínicos ni de laboratorio evaluados. El aumento de los niveles de IL-3 podría contribuir al incremento en la proliferación megacariocítica en este grupo. La presencia simultánea de niveles más altos de TPO y trombocitosis sería un factor predisponente para la ocurrencia de agregación espontánea en los pacientes con TE

Megakaryopoiesis and platelet production are driven by transcription factors and cytokines present in bone marrow environment. Essential thrombocythemia (ET) is a chronic myeloproliferative disorder characterized by high platelet count and megakaryocytic hyperplasia. In the present work we evaluated plasmatic levels of cytokines involved in megakaryocytic development in a group of patients with ET that were not on treatment, as well as thrombopoietin (TPO) levels before and during anagrelide treatment. The assays were carried out using ELISA techniques. Among the cytokines mainly involved in proliferation of megakaryocytic progenitors, interleukin 3 (IL-3) levels were found increased in patients compared to normal controls (p=0.0383). Granulocyte-macrophage colony stimulating factor and stem cell factor levels were normal. Interleukin 6, as well as interleukin 11 and erythropoietin (EPO), cytokines mainly related to megakaryocytic maturation, were normal. Plasma TPO levels before treatment were within the normal range and increased during treatment but the difference was not statistically significant. Patients who displayed spontaneous platelet aggregation had higher plasma TPO levels compared to those who did not (p=0.049). We did not find any relationship between cytokine levels and clinical or laboratory parameters. The high IL-3 levels seen in some patients with ET could contribute to megakaryocytic proliferation. The simultaneous occurrence of higher TPO levels and elevated platelet count could be a predisposing factor for the development of spontaneous platelet aggregation in ET patients

Diez años de experiencia con anagrelide en el tratamiento de la trombocitemia esencial / Treatment of essential thrombocythemia with anagrelide: a ten-year experience

Essential thrombocythemia (ET) is a chronic myeloproliferative syndrome characterized by thrombocythemia and increased megakaryocytes in bone marrow, thrombosis and/or hemorrhagic manifestations. We report here a ten-year experience in the treatment of ET with anagrelide (A), a non mutagenic drug that inhibits megakaryocyte maturation. Between April 1991 and June 2001, 54 ET patients were included with platelet counts > 900 x 10(9)/l in asymptomatic cases and > 600 x 10(9)/l in symptomatic ones. Age at diagnosis was 39 years (11-83). Previously 30 patients had received treatment with hydroxyurea, alpha INF, busulfan and/or 32P. At diagnosis 18 patients had microvascular obstruction, 7 thrombosis, 8 hemorrhagic manifestations and 3 both hemorrhage and thrombosis. Platelet counts at diagnosis were 1200 x 10(9)/l (600-3472) and before A 995 x 10(9)/l (520-2206). The follow-up from diagnosis was 68 months (9-172) and with A treatment 34 months (2-100). The A dose during the first week of treatment was 2.5 mg/d (1-3) and at maintenance 1.5 mg/d (1-3). Complete response was obtained in 96.3 cases, 77 with platelet counts < 400 x 10(9)/l, and 18.5 < 600 x 10(9)/l. The median time to obtain a complete response was 14 days. Transient adverse effects were present in 66 of patients (headache, nausea, abdominal distention, palpitation and edema). Mild to moderate anemia developed within 2-8 months in 40 of patients. During treatment 8 patients had microvascular obstruction with platelet counts over 400 x 10(9)/l and 7 with normal values. One patient developed myelofibrosis. Five patients died for reasons unrelated to ET. In conclusion, anagrelide was effective in reducing platelet counts and preventing mayor thrombotic events (AU)#S#a

Tromboxano B2 y factor de crecimiento derivado de las plaquetas en la trombocitemia esencial tratada con anagrelide / Thromboxane B2 and platelet derived growth factor in essential thrombocythemia treated with anagrelide

Presentamos los resultados obtenidos en 17 pacientes con trombocitemia esencial antes del tratamiento con anagrelide y durante la remisión hematológica y clínica inducida por esta droga. Diez pacientes tenían manifestaciones clínicas relacionadas con la trombocitemia, en 8 de ellos al momento de iniciar el tratamiento. Se midieron los niveles plasmáticos del TXB2 y del PDGF por técnica de ELISA. Antes del tratamiento los valores plasmáticos del PDGF corregidos por el recuento de plaquetas eran significativamente menores que en los controles (p = 0.02), y no difirieron de los resultados obtenidos durante la remisión. En cambio, los valores plasmáticos del TXB2, corregidos de acuerdo al recuento de plaquetas, estaban más elevados que en los controles (p = 0.04), y disminuyeron significativamente durante la remisión (p = 0.04), aunque todavía estaban por sobre los valores normales (p = 0.008). Los síntomas desaparecieron en todos los pacientes cuando el recuento de plaquetas se normalizó. Estos resultados muestran que los pacientes con trombocitemia esencial tratados con anagrelide y en remisión hematológica y clínica tienen tendencia a normalizar los niveles del TXB2.

Sindrome antifosfolipidico catastrofico. Comunicacion de dos formas de presentación / Catastrophic antiphopholipidid syndrome. Communication of two forms of presentation

El síndrome antifosfolipídico (SAFL) se caracteriza por la presencia de abortos espontáneos, trombosis arteriales y venosas, trombocitopenia y el hallazgo de anticuerpos antifosfolipídicos en sangre. En una minoría de los casos tiene un curso rápidamente fatal. Presentamos dos pacientes jóvenes con lupus eritematoso sistémico (LES) y anticuerpos antifosfolipídicos, que desarrollaron un cuadro agudo que rápidamente les provocó la muerte. Si bien el cuadro clínico y de laboratorio fue distinto - en una paciente había predominantemente microtrombosis con anemia hemolítica microangiopática, similar a la púrpura trombótica trombocitopénica (PTT), mientras que en la otra se evidenció trombosis de vasos pequeños y medianos, sin hemólisis-, en la autopsia de ambas pacientes se encontraron trombosis en múltiples órganos, configurando el cuadro de SAFL catastrófico. No hay casos descriptos de este síndrome desencadenado por neumonía por Pneumocistis carinii como se observó en una de nuestras pacientes.

Marcadores de generacion de trombina en insuficiencia renal de niños con sindrome uremico hemolitico epidemico / Markers of thrombin generation in kidney failure of children with epidemic hemolytic uremic syndrome

Se presentan aquí los niveles de los marcadores tempranos de activación de la coagulación y del TNF-alpha en 12 niños con la forma epidémica del síndrome urémico hemolítico, de 16 meses de edad, (12-18) (mediana y rango) Todos los pacientes se recuperaron de las enfermedad dentro de las 2 a 4 semanas de evolución. Se tomaron cuatro muestras de sangre: al ingreso al hospital, luego en la primera y segunda semana y en la remisión. Las determinaciones del F1+2 TAT y TNF-alpha se realizaron por técnicas de ELISA comerciales, mientras que el factor von Willebrand se determinó por el método de Laurell. Los valores de F1+2 y del TAT al ingreso fueron 7.8 nM (3.7-12.3) y 22.7 ng/ml (8-76) respectivamente. Además, se encontró correlación significativa entre los niveles de F1+2 vs creatinina sérica, r:0.47 p < 0.001; F1+2 vs úrea sérica, r:0.66 p < 0.001; TAT vs creatinina sérica, r:0.77 p < 0.001; TAT vs urea , r:0.59 p <0.001. La mediana del FvW al ingreso en 11/12 niños fue de 260 por ciento (170-420). Los niveles del FvW se correlacionaron con los del F1+2; r:0.77 p < 0.001 y con los del TAT, r:0.41 p < 0.01. Los valores de estos marcadores séricos tendieron a normalizarse con la mejoría de la enfermedad. Se encontró una correlación negativa entre el recuento plaquetario y los niveles del F1+2, r:-0.64 p<0.001. Los niveles de TNF-alpha estuvieron aumentados en 5 niños, 22.2 pg/ml (17.2-53.7). Los resultados sugieren que estas anormalidades pueden ser atribuidas a un estímulo común sobre células endoteliales.

La inmunoperoxidasa en el estudio de las trombocitopenias inmunológicas / Immunoperoxidase in the studies of immune thrombocytopenias

The usefulness of different techniques to measure platelet bound IgG has been reviewed by George(16). We present here the results obtained with a technique designed to measure membrane bound IgG employing an anti-human IgG labeled with peroxidase and using O-dianisidine-H2O2 to reveal the enzymatic activity(17). We studied 152 patients with chronic autoimmune thrombocytopenic (ATP) including 120 adults and 32 children (age below 15 years old), diagnosed by exclusion of diseases that may be associated with thrombocytopenic purpura of either immune or non-immune mechanisms. Besides, 79 patients with thrombocytopenia related to other diseases were also evaluated. The normal values in 215 controls were 188 +/- 4 IgG molec/platelet (mean +/- SE), while in the whole population of chronic ATP the results were 4714 +/- 344, p < 0.001. In pediatric cases the results had a tendency to values higher than in adults. A negative correlation was found between the number of platelets and the amount of bound IgG, r = 0.41 p < 0.001. IgG bound platelets were also increased in treated patients at relapse. The percent of normal IgG bound platelet was 4,5 percent in patients with a platelet count below 50.000/microliter and 39 percent in those with normal platelet number. Patients with secondary thrombocytopenia had elevated IgG/platelet while the values were normal in patients with thrombocytopenia of unknown etiology. We conclude that the immunoperoxidase technique is useful to establish the immunologic nature of thrombocytopenia.

Activity of a platelet protein kinase that phosphorylates fibrinogen and histone in Argentine hemorragic fever

La actividad de una proteinoquinasa plaquetaria que fosforila la cadena alfa del fibrinógeno y la histona como substrato exógeno, se evaluo en 28 pacientes con fiebre hemorrágica argentina, agrupados de acuerdo a la forma clínica en: 13 leves, 6 comunes y 9 graves. Las muestras de sangre se obtuvieron antes del tratmiento con plasma inmune, 4 dias después y en la convalescencia. La fosforilación de la histona exógena y del fibrinógeno se estudió con 25 Ci/mmol ( gamma-32p)-ATP. Simultaneamente se efectuó el recuesto de plaquetas y se midió la actividad del interferon alfa (IFN). La fosforilación de la histona se halló por debajo de los valores normales en todos los pacientes durante la fase aguda de la enfermedad. Esta reducción fue coincidente con los titulos más altos de IFN. La fosforilación del fibrinógeno estuvo igualmente disminuida. La fosforilación de la histona y del fibrinógeno estaban aun disminuidos 4 dias después del tratamiento, cuando el IFN era practicamente no dosable. El bajo nivel de fosforilación no puede atribuirse solamente a una disminución del número de plaquetas y podría ser otra evidencia de la existencia de una alteración plaquetaria en los pacientes con fiebre hemorragica argentina

Alteraciones inmunológicas en pacientes con púrpura trombocitopenica idiopática crónica / Immunological changes in patients with chronic idiopathic thrombocytopenic purpura

En este trabajo se valoró la inmunidad mediada por células y los niveles de inmunocomplejos circulantes en 30 pacientes con púrpura trombocitopénica idiopática crónica (PTI). Se hallaron diversas alteraciones inmunológicas: los pacientes con PTI tenían valores relativos de linfocitos B aumentados y disminuidos los de linfocitos T. La transformación blástica inducida por PHA estaba disminuida al igual que la función supresora T-T inespecífica inducida por Con A. Se rencontró una correlación directa entre los recuentos plaquetarios y la función supresora (r=0,61, p<0,01). El nivel de IgG asociada a la membrana plaquetaria era más alto en aquellos pacientes con marcada depresión de la actividad supresora. Estos resultados no estaban relacionados a la edad y sexo de los pacientes ni al tratamiento o evaluación de la enfermedad