Modelo animal de quelóide utilizando fibroblastos modificados geneticamente / Animal model of keloids using genetically modified fibroblasts

Introdução: Existe pouco entendimento a respeito dos mecanismos moleculares que levam à formação dos quelóides e cicatrizes hipertróficas, assim como não existe um modelo animal adequado para seu estudo, visto que só ocorrem em humanos. A teoria mais aceita propõe que um aumento na regulação do TGF-b1 leva à formação dessas cicatrizes. Objetivo: Criar um modelo animal de quelóide utilizando células geneticamente modificadas codificando o TGF-b1. Método: Fibroblastos dérmicos humanos foram geneticamente modificados para aumentarem a expressão de TGF-b1 na forma selvagem ou latente ou na forma mutante ou ativa. Os fibroblastos transfectados foram transplantados intradermicamente em camundongos atímicos, e a formação de tecido fibroso analisada em diferentes intervalos de tempo por meio de histologia e imunohistoquímica. Resultados: Após a injeção intradérmica nos camundongos atímicos, apenas os fibroblastos expressando a forma ativa do TGF-b1 formaram nódulos “quelóide-like”, contendo colágeno e fibronectina. Estas estruturas persistiram microscopicamente por mais tempo que os implantes dos fibroblastos controle e os expressando a forma latente do TGF-b1. Conclusões: A injeção de fibroblastos transfectados codificando o TGF-b1 levou à formação de nódulos semelhantes ao quelóide na pele de camundongos atímicos. O TGF-b1 precisa estar em sua forma ativa para produzir os nódulos fibróticos.

Experimental model of cultured skin graft

Um dos modelos animais mais utilizados de auto-enxertia de queratinócitos cultivados é baseado em xeno-enxerto de queratinócitos humanos em rato atímico, um receptor imunologicamente neutro que atua como carreador biológico. Muitos fatos podem ser estudados nesse modelo que acontecem após o transplante sem os aspectos éticos do estudo clínico. A proposição do modelo experimental esta relacionada a sequência do transplante de pele parcial ou total como auto-enxerto ou xeno-enxerto, cultivado ou não, no dorso do rato atímico. O modelo apresenta a possibilidade do estudo in vivo do animal atímico, quando o estudo in vivo em anima nobili não é considerado ético. Isso permite a avaliação do xeno-enxerto de células humanas normais ou modificadas geneticamente modificadas cultivadas e a associação de células cultivadas e substitutes dérmicos, de enxertos compostos e de auto-enxerto.

Experimental model of cultured keratinocytes

The bioengineering research is essential in the development of ideal combination of biomaterials and cultured cells to produce the permanent wound coverage. The experimental model of cultured keratinocytes presents all steps of the culture, since the isolation of the keratinocytes, preparation of the human acellular dermis, preparation of the composite skin graft and their elevation to the air-liquid interface. The research in cultured keratinocytes model advances in two main ways: 1. optimization of the methods in vitro to the skin cells culture and proliferation and 2. developing biomaterials that present similar skin properties.