Production of reactive oxygen (H2O2) and nitrogen (NO) intermediates and TNF-α in mice genetically selected for high (H) and low (L) antibody response and experimentally infected with Leptospira serovar pomona

The aim of the present study was to evaluate the activity of macrophages, and the production of TNF-α and antibodies against experimental infection by Leptospira serovar Pomona in mice genetically selected for High (H) or Low (L) humoral immune response. To evaluate macrophagic activity, peritoneal and splenic lavages were performed for determination of oxygen (H2O2) and nitrogen (NO) intermediates. The production of the tumor necrosis factor (TNF-α) was investigated through bioassays in serum and homogenates of splenic and hepatic cells of control and infected animals, as was as specific antibodies production. The immune response against serovar Pomona in those lines, was characterized by high antibody production, especially in later periods of the infectious process, whereas values of bacterial recovery in culture medium were lower. The production of reactives oxygen and nitrogen intermediate, also helped to eliminate Leptospira Pomona in both lines; H2O2 production an important factor in H IV-A, as well as NO production in L IV-A, especially in later post-inoculation periods. The same was detected for TNF-α. Results suggest that such lines could be an important model to investigate the pathogenesis and the immune response of animals against the several Leptospira serovars.

Identificação da Leptospira interrogans sorovar pomona em camundongos geneticamente selecionados, para a alta e baixa produção de anticorpos, através da técnica de imunoperoxidase em tecido renal e isolamento bacteriano em meio de Fletcher / Identification of Leptospira interrogans serovar pomona in mice genetically selected for high and low antibody production, by means of the immunoperoxidase technique in renal tissue and bacterial isolation in Fletcher medium

O presente trabalho teve por objetivo identificar a presença da Leptospira interrogans sorovar pomona em camundongos geneticamente selecionados para a alta e baixa resposta a anticorpos. Todos os animais foram submetidos ao isolamento bacteriano, imunohistoquímica (imunoperoxidase) em cortes de tecido renal e coloração através da hematoxilina-eosina. A técnica de imunoperoxidase apresentou-se pouco mais sensível em relação ao cultivo, entretanto, ambas foram bons parâmetros de identificação do agente. Presença de lesões renais mais intensas ocorreram em períodos em que houve maior número de bactérias isoladas em meio de cultivo. Camundongos da linhagem HIV-A conseguiram eliminar as leptospiras com maior eficiência e rapidez em relação as linhagem LIV-A, entretanto o estudo demonstrou que ambas linhagens da seleção IV-A foram eficientes em controlar o processo infeccioso.

The present work had the objective of identifying the presence of Leptospira interrogans serovar pomona in mice that had been genetically selected for high and low response to antibodies. All the animals were subjected to bacterial isolation, immunohistochemical analysis (immunoperoxidase) in renal tissue sections and hematoxylin-eosin staining. The immunoperoxidase technique was little more sensitive than culturing, but both were good parameters for agent identification. More severe renal lesions were present at times when there were greater numbers of bacteria isolated in culture medium. Mice of the lineage HIV-A were able to eliminate the Leptospira more efficiently and faster than the lineage LIV-A could. However, the study demonstrated that both lineages of the IV-A selection were efficient in controlling the infectious process.

Resposta humoral, recuperaçäo bacteriana e lesöes histológicas em camundongos geneticamente selecionados para bons e maus produtores de anticorpos e Balb/c, frente à infecçäo por Leptospira interrogans sorovar icterohaemorrhagiae / Humoral immune response, bacterial recovery and time lesions in mice geneticaly selected for high and low antibody production and in outbreed Balb/c mice face to Leptospira interrogans sorovar icterohaemorrhagiae

O presente trabalho teve por finalidade associar a cinética da resposta humoral à recuperaçäo de leptospiras viáveis e à intensidade das lesöes teciduais em camundongos geneticamente selecionados para bons (High) e maus (Low) produtores de anticorpos (seleçäo IV-A), além de camundongos outbreed, Balb/c, inoculados com amostra patogênica de Leptospira interrogans sorovar icterohaemorrhagiae. As linhagens High e Low (seleçäo IV-A) apresentam modificaçöes em alguns compartimentos da resposta imune, principalmente em relaçäo à atividade macrofágica, representando fenótipos extremos encontrados em populaçöes naturais heterogêneas. Os camundongos foram sacrificados em oito momentos após a infecçäo. A análise dos resultados revelou que a partir do 7º dia após a infecçäo, os camundongos da linhagem High apresentaram elevaçäo nos títulos de anticorpos estatisticamente significantes quando comparados aos camundongos da linhagem Low, mantendo assim o efeito multiespecífico. Os camundongos Balb/c apresentaram resultados intermediários entre as duas linhagens. A produçäo de anticorpos colaborou como fator limitante à infecçäo, pois quando obteve-se maior recuperaçäo de leptospiras, na fase inicial da infecçäo, os títulos de anticorpos encontravam-se em elevaçäo. As lesöes observadas nos órgäos de camundongos infectados consistiram basicamente nos mesmos processos inflamatórios e degenerativos, que näo se alteraram, variando apenas o grau de comprometimento tecidual, de acordo com a linhagem. A linhagem high apresentou lesöes mais extensas que as apresentadas pelas linhagens low e Balb/c, sendo que nesta última as lesöes foram moderadas. De forma geral a linhagem High e Balb/c apresentaram um perfil de resposta Th2, com o maior índice de produçäo de anticorpos e gravidade das lesöes, enquanto a linhagem Low apresentou um perfil de resposta Th1

Experimental visceral leishmaniasis in high and low antibody: producer mice (selection IV-A)

A leishmaniose é uma infecçäo parasitária cuja imunidade protetora envolve a ativaçäo de macrófagos. Neste trabalho avaliamos a susceptibilidade de camundongos H e L (bons e maus produtores de anticorpos, respectivamente) da seleçäo IV-A, à infecçäo com o protozoário L. donovani. Camundongos H infectados com 107 amastigotas por via intravenosa foram mais suscetíveis, apresentando maior carga parasitária tanto no fígado quanto no baço. Após 60 dias de infecçäo ambas as linhagens apresentaram um aumento no índice esplênico. Esta esplenomegalia foi conseqüência, pelo menos parcialmente, de um aumento no número de células esplênicas. Os resultados indicam que a seleçäo IV-A é susceptível à infecçäo com L. donovani e que dentro desta seleçäo a linhagem H apresenta maior suscetibilidade do que a linhagem L

Avaliaçäo da resposta imune materna e fetal de ratas diabéticas / Maternal and fetal immune response in diabetics rats

O objetivo deste trabalho foi estudar a resposta imunológica de ratas diabéticas, submetidas a prenhez. Utilizamos 80 ratas wistar, adultas, virgens, que foram sorteadas para compor os grupos: prenhe e nao prenhe com e sem aloxana. As ratas que receberam aloxana foram separadas de acordo com a glicemia do primeiro dia de prenhez em três subgrupos: sensibilizado (glicemia menor que 120 mg/dl), diábetes moderado (glicemia entre 120 e 199 mg/dl) e diabetes grave (glicemia maior que 200 mg/dl). Avaliou-se nestes grupos: a produçao de anticorpos maternos contra eritrócito de carneiro (SE); a transferência destes anticorpos para os filhotes; a imunidade celular materna e fetal através da técnica de produçao do fator inibidor da migraçao de leucócitos (LIF) e a atividade efetora das células NK materna. Na prenhez de ratas normais nao houve alteraçao de nenhum dos parâmetros imunológicos estudados. As ratas diabéticas apresentaram menor produçao de LIF, indicando supressao na resposta celular, que se refletiu na menor produçao de anticorpos. O diabetes associado à prenhez, além de alterar a resposta imune celular e humoral, aumentou a atividade das células NK nos grupos sensibilizado e diabetes moderado. A hiperglicemia materna suprimiu a resposta celular dos filhotes, com menor produçao do LIF. A deficiência nos níveis de anticorpos dos filhotes decorre da baixa produçao de IgG materna, única classe de anticorpos capaz de ser transferida passivamente através da placenta.