Avaliação de reagentes anti-D na detecção dos antígenos D fraco e D parcial / Evaluation of anti-D reagents in the detection of weak D and partial D antigens

Anti-soros monoclonais anti-D IgG e IgM têm sido produzidos para substituir os policlonais na determinação do antígeno D. No entanto, pouco se conhece a respeito da utilização destes reagentes na detecção dos antígenos RhD fraco e RhD parcial. Estudos moleculares e sorológicos que possam esclarecer a expressão do antígeno D são importantes para a seleção adequada dos reagentes anti-D utilizados na fenotipagem RhD. Foram analisados anti-soros anti-D monoclonais IgG e IgM quanto à capacidade de detecção dos antígenos D fraco de alta e baixa densidade antigênica e dos antígenos D parciais que reagem como D fraco em 56 amostras de sangue caracterizadas como D fraco. O anti-D IgM foi analisado pela reatividade de aglutinação à temperatura ambiente enquanto o anti-D IgG foi analisado pela reatividade pelo teste da antiglobulina humana. Os tipos de D fraco foram caracterizados molecularmente, e a densidade antigênica dos antígenos RhD identificados foi determinada por citometria de fluxo. Todas as amostras que continham os tipos de D fracos mais freqüentes (DF1, DF3 e DF4) foram detectadas à temperatura ambiente (TA) com anti-D IgM enquanto as amostras DF2 e D parcial foram detectadas com anti-D IgG reativo pelo teste da antiglobulina humana (AGH). Nossos resultados demonstram que o anti-D IgM não detecta antígenos D parciais reativos como D fraco e antígenos D fraco de baixa densidade antigênica e, portanto, pode ser utilizado na rotina de pacientes. O anti-D IgG detecta a maioria dos tipos de D fraco e associações D fraco parcial e deve ser utilizado na rotina de doadores.

Monoclonal antibodies (MoAb) anti-D IgG and IgM are being developed in order to replace polyclonal antibodies. However, there are few studies about the selection of these MoAb to routinely detect weak D and partial D antigens. A total of 56 weak D blood samples were analyzed with anti-D IgG and IgM MoAb in order to evaluate their reactivity. Molecular analyses were also performed to characterize the weak D types and the presence of partial D. Antigen densities were determined by flow cytometry. Weak D type 1, 3 and 4 samples with high antigen density were reactive with the MoAb anti-D IgM at room temperature while weak D type 2 and the partial D samples with low antigen density were detected with MoAb anti-D IgG using the indirect antiglobulin test. Our results show that anti-D IgM does not detect partial D samples reactive as weak D and thus can be used for routine testing of patients. As the anti-D IgG detected all the weak D and partial D with low antigen density, it should be used in the routine testing of donors.

Genotipagem da apolipoproteína E em indivíduos hipercolesterolêmicos e em diabéticos / Apo E genotyping in hypercholesterolemic and diabetic individuals

Com a crescente necessidade de otimizaçäo de técnicas moleculares para fins de diagnóstico precoce, estabeleceu-se uma metodologia para obtençäo de DNA genômico de células sangüíneas, tornando-a mais acessível aos laboratórios clínicos. Obteve-se ótimo rendimento de DNA (60,9 ñ 1,6 µg/ml), de alta qualidade e pureza. Essa metodologia foi entäo aplicada para obtençäo de material genético para o estudo de genotipagem de apolipoproteína E (apo E) em indivíduos hipercolesterolêmicos (HIPERCOL), diabéticos insulino-dependente (IDDM) e näo-insulino-dependente (NIDDM), assim como avaliou-se a influência do polimorfismo genético da apo E na hipercolesterolemia pós-menopausa...

Efeito postural sobre valores de referência / The posture effect upon the reference values

Análises Clínicas assume especial atenção a postura do indivíduo no momento da coleta do espécime, interferindo de maneira significativa nos resultados laboratoriais. A bibliografia disponível identifica as variações e partimos então para um estudo paralelo. Constatou-se a necessidade da verificação do efeito postural sobre os valores de referência e sua aplicação. Para tanto elaborou-se a presente pesquisa, culminando nas conclusões expressas.