Protective effect of ß-glucan and glutamine on intestinal and immunological damage in mice induced by cytarabine (Ara-C) / Efeito protetor do ß-glucano e glutamina em lesões intestinais e imunológicas induzidas por ciratabina (Ara-C) em camundongos

Recently, glutamine and ß-glucan have been demonstrated to play an important role in modulation of the immune system and in promoting intestinal health benefits. The aim of this study was to investigate the effect of this intervention on inflammatory responses and intestinal health in mice orally pretreated with soluble Saccharomyces cerevisiae derived 1,3/1,6-ß-glucan (80mg/kg) with or without glutamine (150mg/kg) and then challenged with cytarabine (Ara-C) (15mg/kg). Improvements in villi and crypts were not observed in the ß-glucan group. The intestinal morphometry in the glutamine group showed the best results. ß-glucan in combination with glutamine presented the highest values of IL-1ß and IL-10 and lowest values for leukocytes and INF-γ. Based on these results, combined ß-glucan and glutamine pretreatment reduced intestinal inflammation and improved the immune response after Ara-C challenge.(AU)

Recentemente, glutamina e ß-glucano têm demonstrado desempenhar um papel importante na modulação do sistema imune e na promoção de benefícios para a saúde intestinal. O objetivo deste estudo foi investigar o efeito dessa intervenção sobre as respostas inflamatórias e saúde intestinal de camundongos pré- tratados por via oral com 1,3/1,6-ß-glucano (80mg/kg) derivado de Saccharomyces cerevisiae com ou sem glutamina (150mg/kg) e posteriormente desafiados com citarabina (Ara-C) (15mg/kg). Melhoras em vilosidades e criptas não foram observadas no grupo de tratamento com ß-glucano. A morfometria intestinal no grupo de tratamento com glutamina apresentou os melhores resultados. O grupo em que foi utilizado ß-glucano em combinação com glutamina apresentou os maiores valores de IL-1ß e IL -10 e valores mais baixos para os leucócitos e INF-γ. Com base nestes resultados, o pré-tratamento de ß-glucano combinado com glutamina reduziu a inflamação intestinal e melhorou a resposta imune após o desafio com Ara-C.(AU)

Nickel allergy: blood and periodontal evaluation after orthodontic treatment / Alergia ao níquel: avaliação periodontal e sanguínea após o tratamento ortodôntico

The aim of this study was to assess periodontal status and bloodparameters in orthodontic patients with nickel allergy one monthafter removal of brackets. Ninety-six randomly selected patientswere initially evaluated. Allergy to nickel was diagnosed using apatch test. After determining the prevalence of subjects allergic tonickel, two groups were formed: 16 allergic (experimental) and 16non-allergic (control) patients. Their periodontal status wasdetermined regularly by a single, blinded, duly calibrated examinerusing the Lõe Index (GI) and their blood was tested (complete bloodtest, including nickel and IgE levels) after nine months oforthodontic treatment and again one month after removing theorthodontic appliances. Statistical analyses included paired andnon-paired t-tests, Mann-Whitney, Wilcoxon, McNemar and lineartrend chi-square tests (p≤0.05). Comparison of the values recordedduring orthodontic treatment and one month after removing theappliances showed that in the allergic group there was significantincrease in eosinophils (p=0.046), basophils (p=0.001) andmonocytes (p=0.002), and decrease in number of bands (p=0.000),while in the control group, there was increase in lymphocytes(p=0.039) and decrease in segmented neutrophils (p=0.030) andIgE levels (p=0.001). In both groups, plasma nickel levels increased(p=0.010; p=0.039) and GI scores decreased. One month afterremoving the brackets, blood and periodontal parameters frompatients with and without nickel allergy were similar.

O objetivo do presente estudo foi avaliar a condição periodontal eos parâmetros sanguíneos em pacientes alérgicos ao níquel, ummês após remoção dos aparelhos. Noventa e seis pacientesselecionados aleatoriamente foram inicialmente avaliadas. Alergiaao níquel foi diagnosticada usando um teste de contato. Após adeterminação da prevalência de alergia ao níquel, formaram-sedois grupos: 16 pacientes alérgicos (experimental) e 16 nãoalérgicos (controle). Condição periodontal foi diagnosticadaatravés do Índice de Lõe (IG). Parâmetros sanguíneos foramdeterminados por meio de um exame de sangue completo,incluindo a quantificação de níquel e níveis de IgE. Avaliações doestado periodontal foram realizados por um único examinador deforma cega, devidamente calibrado e amostras de sangue foramtomadas depois de nove meses de tratamento e um mês após aremoção dos aparelhos ortodônticos. Análise estatística utilizadafoi testes t pareado e não pareado, Mann-Whitney, Wilcoxon,McNemar e qui-quadrado de tendência linear (p≤0,05). Emcomparação com os valores observados durante o tratamento, onúmero de eosinófilos (p=0,046), basófilos (p=0,001) e monócitos(p=0,002) aumentou significativamente depois da remoção dosaparelhos ortodônticos, ao passo que o número de bastões(p=0,000) diminuiu entre os períodos no grupo alérgico. O númerode linfócitos (p=0,039) aumentou no grupo controle e o número desegmentados (p=0,030) diminuiu. A diminuição dos níveis de IgE(p=0,001) entre os períodos ocorreu no grupo de controle. Níveisde níquel no plasma aumentou após a remoção de aparelhosortodônticos em ambos os grupos (p=0,010; p=0,039). O IGdiminuiu em ambos os grupos. Parâmetros periodontais esanguíneos de pacientes com alergia ao níquel foram semelhantesaos não alérgicos um mês após a remoção dos aparelhos.

Babesia bovis: expression of adhesion molecules in bovine umbilical endothelial cells stimulated with plasma from infected cattle / Babesia bovis: expressão de moléculas de adesão em células endoteliais de cordão umbilical de bovinos estimuladas com plasma de bovinos infectados

Ten male, 12-month-old Jersey with intact spleens, serologically and parasitologically free from Babesia were housed individually in an arthropod-free isolation system from birth and throughout entire experiment. The animals were randomly divided into two groups. Five animals (group A) were intravenously inoculated with 6.6 X10(7) red blood cells parasitized with pathogenic sample of Babesia bovis (passage 7 BboUFV-1), for the subsequent "ex vivo" determination of the expression of adhesion molecules. Five non-inoculated animals (group B) were used as the negative control. The expression of the adhesion molecules ICAM-1, VCAM, PECAM-1 E-selectin and thrombospondin (TSP) was measured in bovine umbilical vein endothelial cells (BUVECs). The endothelial cells stimulated with a pool of plasma from animals infected with the BboUFV-1 7th passage sample had a much more intense immunostaining of ICAM-1, VCAM, PECAM-1 E-selectin and TSP, compared to the cells which did not received the stimulus. The results suggest that proinflammatory cytokines released in the acute phase of babesiosis may be involved in the expression of adhesion molecules thereby implicating them in the pathophysiology of babesiosis caused by B. bovis.

Dez bezerros machos, da raça Jersey, com 1 ano de idade com baços "in situ", sorológica e parasitologicamente livres de Babesia, foram mantidos em baias individuais no isolamento a prova de artrópodes do Depto de Veterinária desde o nascimento e ao longo de toda a experimentação. Os animais foram divididos aleatoriamente em dois grupos. Cinco animais (grupo A) foram inoculados por via intravenosa com 6,6 x10(7) hemácias parasitados com amostra patogênica de Babesia bovis (BboUFV - 1 7ª passagem) , para a determinação subseqüente "ex vivo" da expressão de moléculas de adesão . Cinco animais não inoculados (Grupo B ) foram utilizados como controlo negativo . A expressão de moléculas de adesão ICAM - 1, VCAM , PECAM - 1, E - selectina e trombospondina ( TSP ) foi medida em células endoteliais da veia umbilical de bovinos (BUVECs). As células endoteliais estimuladas com um pool de plasma proveniente de animais infectados com BboUFV - 1 7ª passagem tinham uma imunocoloração muito mais intensa de ICAM - 1 , VCAM , PECAM - 1 de E - selectina e de TSP , em comparação com as células que não receberam o estímulo . Os resultados sugerem que as citocinas pró-inflamatórias liberados na fase aguda da babesiose pode estar envolvida na expressão de moléculas de adesão , implicando , assim, elas na fisiopatologia da babesiose causada por B. bovis.

Seleção, caracterização e clonagem dos genes fljB e groEL agonistas dos receptores de reconhecimento de padrão do sistema imune inato das aves / Selection, characterization and cloning of the fljB and groEL genes agonists of the innate immune system pattern recognition receptors of birds

The recombinant production of innate immune system pattern recognition receptor agonists has provided a new tool for the production of immunostimulants for animals. The molecular pattern associated with the pathogen (PAMP), flagellin, coded by the fljB gene from Salmonella Typhimirium, and the molecular pattern associated to the damage (DAMP), HSP60, coded by the groEL gene from S. Typhimurium and S. Enteritidis, are recognized by pattern recognition receptors (PRRs) of the innate immune system of birds. In the present study, we performed the cloning of genetic fragments of the genes fljB, from S. Typhimurium, and groEL from S. Typhimurium and S. Enteritidis inserted in expression vector pET100/D-TOPO and transformed in E. coli TO10 cells. The clones were evaluated by colony PCR, plasmidial DNA PCR and genome sequencing in order to confirm the presence of these genes. In the colony PCR, we identified the presence of genes groEL (S. Enteritidis), groEL (S. Typhimurium) and fljB (S. Typhimurium) in 80%, 60% and 80% of the transformed colonies, respectively. The cloning system adopted allowed the production of HSP60 genetic fragment clones and flagellin of Salmonella strains, allowing the posterior use of these clones in gene expression trials, with the future potential of being used as non-specific immunostimulants for birds.

A produção recombinante de agonistas dos receptores do reconhecimento de padrão do sistema imune inato tem fornecido uma nova ferramenta para a produção de imunoestimulantes para animais. O padrão molecular associado ao patógeno (PAMP), flagelina, codificado pelo gene fljB de Salmonella Typhimurium e o padrão molecular associado ao dano (DAMP) HSP60, codificado pelo gene groEL da S. Typhimurium e S. Enteritidis, são reconhecidos por receptores de reconhecimento de padrões (RRPs) do sistema imune inato das aves. No presente estudo, foi feita a clonagem de fragmentos genéticos dos genes fljB de S. Typhimurium e groEL de S. Typhimurium e S. Enteritidis inseridos no vetor de expressão pET100/D-TOPO e transformados em células de E. coli TOP10. Os clones foram avaliados pela PCR de colônia, PCR de DNA plasmidial e sequenciamento genômico para a confirmação da presença desses genes. Na PCR de colônia, foram identificadas em 80%, 60% e 80% das colônias transformadas, a presença dos genes groEL (S. Enteritidis), groEL (S. Typhimurium) e fljB (S. Typhimurium) respectivamente. O sistema de clonagem adotado possibilitou a produção de clones dos fragmentos genéticos da HSP60 e flagelina das cepas de Salmonella, permitindo a utilização posterior desses clones em ensaios de expressão gênica, com potencial futuro de serem utilizados como imunoestimulante inespecífico das aves.

Abortos por Neosporacaninum em bovinos do sul de Minas Gerais / Neosporacaninum abortions in cattle in southern Minas Gerais, Brazil

Este estudo avaliou a participação de Neospora caninum em casos de abortos em bovinos provenientes de propriedades rurais da região sul de Minas Gerais por meio de análises histopatológicas, imuno-histoquímicas (IHQ) e pela reação em Cadeia de Polimerase (PCR). O material utilizado foi obtido de um estudo retrospectivo de casos de aborto recebidos pelo Setor de Patologia Veterinária da Universidade Federal de Lavras e de fetos necropsiados durante os anos de 2011 a 2013. De 60 fetos estudados, 30 (50%) tinham lesões microscópicas. Destes, 19 (63%) apresentaram lesões compatíveis com aborto por N. caninum, caracterizadas principalmente por encefalite não supurativa multifocal, necrose e gliose multifocal, assim como, miocardite e miosite não supurativa. Em 14 fetos chegou-se ao diagnóstico definitivo. Destes, cinco tiveram sua confirmação somente pela marcação IHQ e cinco foram positivos somente na PCR. Quatro fetos foram positivos tanto na IHQ quanto na PCR. Cinco fetos, provenientes do estudo retrospectivo apresentaram lesões compatíveis com N. caninum, mas a presença do protozoário não foi confirmada pela marcação IHQ. Os achados demonstram que o N. caninum é um importante agente associado ao aborto em bovinos na região sul de Minas Gerais. Para tanto, além das lesões microscópicas a associação entre a IHQ e a técnica de PCR foi essencial para a confirmação do diagnóstico.

The present study evaluates the participation of Neospora caninum in bovine abortions from farms in the southern region of Minas Gerais state, Brazil, through histopathological, immunohistochemical (IHQ) analysis and DNA detection by polymerase chain reaction (PCR). The material used in this study was obtained through retrospective study of bovine abortion cases received by the Setor de Patologia Veterinária da Universidade Federal de Lavras and by necropsies performed in fetuses from 2011 to 2013. From 60 fetuses studied, 30 (50%) had microscopic lesions; 19 (63%) of them had histologic lesions compatible with N. caninum abortion, characterized by multifocal non-suppurative encephalitis, necrosis and gliosis in the central nervous system and multifocal nonsuppurative myocarditis and myositis. From the 19 fetuses with protozoa lesions in 14 the final diagnosis was performed; five were confirmated only by IHQ staining and five were positive only by PCR. Four fetuses were positive in IHC and in PCR. In five fetuses from the retrospective study lesions compatible with N. caninum were seen, but the presence of the protozoan was not confirmed by IHQ labeling. The findings demonstrate that N. caninum is an important agent associated with abortion in cattle from Minas Gerais. Therefore, beyond the microscopic lesions association between IHC and PCR was essential to confirm the diagnosis.