Toxoplasma gondii and Neospora caninum antibody seroprevalence and risk factors among dogs treated at Public Veterinary Hospitals in São Paulo, Brazil / Soroprevalência de anticorpos anti-Toxoplasma gondii e Neospora caninum em cães atendidos em Hospitais Públicos Veterinários em São Paulo, Brasil

Abstract Dogs can be infected by Toxoplasma gondii and Neospora caninum, for which they function, respectively, as intermediate, and definitive hosts. In the present study seroprevalence against T. gondii and N. caninum antibodies, were determined by indirect fluorescent antibody test (cut off of 16 and 50, respectively), in dogs that were treated at public veterinary hospitals in the metropolitan region of São Paulo and risk factors were identified. Out of the 1,194 samples 125 (10.5%; 95% CI: 8.8-12.3%) were positive for T. gondii and 9 (0.75%, 95% CI: 0.34-1.4%) for N. caninum. For T. gondii, statistical differences were observed between the proportions of positive dogs and different zones of the municipality (p = 0.025), and age (p = 0.02), higher among older dogs. The keepers were invited to answer an epidemiological questionnaire to analyze risk factors, and 471 (39.4%) agreed to be interviewed, and among their dogs 65 (13.8%) were T. gondii seropositive. Age group above 8 years (OR = 3.63; 95% CI: 1.08-12.23) was a risk factor and having a defined breed (OR = 0.49; 95% CI: 0.25-0.96) was a protective factor for T. gondii infection. Because of the low number of dogs positive for N. caninum, risk factors for this coccidium were not determined.

Resumo Cães podem ser infectados por Toxoplasma gondii e Neospora caninum, os quais funcionam, respectivamente, como hospedeiros intermediários e definitivos. Neste estudo, a soroprevalência contra anticorpos anti-T. gondii e N. caninum foi determinada pelo teste de imunofluorescência indireta (ponto de corte de 16 e 50, respectivamente), em cães atendidos em hospitais públicos veterinários da região metropolitana de São Paulo e fatores de risco foram identificados. Das 1.194 amostras, 125 (10,5%; IC 95%: 8,8-12,3%) foram positivas para T. gondii e 9 (0,75%, IC 95%: 0,34-1,4%) para N. caninum. Para T. gondii foram observadas diferenças entre as proporções de cães positivos e diferentes zonas do município (p = 0,025) e idade (p = 0,02), prevalência maior entre os mais velhos. Os tutores foram convidados a responder um questionário epidemiológico para análise de fatores de risco, e 471 (39,4%) concordaram em ser entrevistados, destes 65 cães (13,8%) eram soropositivos para T. gondii. Faixa etária acima de 8 anos (OR = 3,63; IC 95%: 1,08-12,23) foi fator de risco e raça definida (OR = 0,49; IC 95%: 0,25-0,96) foi fator de proteção para a infecção por T. gondii. Devido ao baixo número de positivos para anticorpos anti-N. caninum, fatores de risco para este coccídio não foram determinados.

Serological survey of Neospora caninum and Toxoplasma gondii in shelter-housed cats infected with feline immunodeficiency virus, Brazil / Inquérito sorológico para Neospora caninum e Toxoplasma gondii em um abrigo de gatos infectados com o vírus da imunodeficiência felina, Brasil

Felines play a leading role in the epidemiology of Toxoplasma gondii infection, but there is scarce information about the epidemiology of Neospora caninum, particularly in feline immunodeficiency virus (FIV)-infected cats. Cats seropositive to T. gondii do not usually show symptoms unless they are immunosuppressed, such as FIV-infected cats. The same relationship remains poorly known for N. caninum, although it has been associated with neurological disorders in HIV-infected people. Since FIV-infected cats are prone to develop encephalitis of unknown etiology, this study aimed to evaluate the presence of specific antibodies to T. gondii and N. caninum in a shelter for stray cats naturally infected with FIV. A total of 104 serum samples from cats living in a shelter, located in São Paulo city (Brazil), was assessed for T. gondii and N. caninum specific antibody by indirect fluorescent-antibody test (IFAT). Of the 104 cats, 25 (24%) were infected with FIV and, aside from these, 8 (32%) had antibodies against T. gondii (titers from 16 to 128). Only 1 (4%) of the FIV-infected cats had antibodies against N. caninum, which was the first record of coinfection. Among the FIV-naïve cats, 11 (14%) were positive for T. gondii(titers from 16 to 256) and only 1 (1.2%) had antibodies against N. caninum. Serologically positive reactions to T. gondii and N. caninum were not correlated with age or sex (p>0.05), and there was no correlation between FIV and the occurrence of anti-T. gondii or anti-N. caninum antibodies (p>0.05). Further studies encompassing larger cat populations from different origins and locations are essential to clarify the prevalence of T. gondii and N. caninum antibodies in FIV-positive cats.(AU)

Os felinos têm um papel importante na epidemiologia da infecção por Toxoplasma gondii, mas pouco se sabe sobre a epidemiologia da infecção por Neospora caninum em gatos, particularmente em gatos infectados com o vírus da imunodeficiência felina (FIV). Gatos soropositivos para Toxoplasma gondii geralmente não apresentam sintomas a não ser que estejam imunossuprimidos, como gatos infectados com FIV. A mesma relação ainda é pouco conhecida para N. caninum, embora tenha sido associada a distúrbios neurológicos em pessoas infectadas pelo HIV. Considerando que gatos infectados com FIV são propensos a desenvolver encefalite de etiologia desconhecida, o presente estudo teve como objetivo avaliar a presença de anticorpos específicos para T. gondii e N. caninum em gatos infectados com FIV. Um total de 104 amostras de soro de gatos residentes em um abrigo na cidade de São Paulo, Brasil, foram avaliadas para a presença de anticorpos contra T. gondii e N. caninum pelo teste de imunofluorescência indireta (RIFI). Dos 104 gatos, 25 (24%) estavam infectados com FIV e destes 8, (32%) tinham anticorpos contra T. gondii (titulação entre 16 e 128). Apenas 1 (4%) dos gatos infectados com FIV apresentava anticorpos contra N. caninum, sendo este o primeiro registro dessa coinfecção. Entre os gatos não infectados com FIV, 11 (14%) foram positivos para T. gondii (titulação entre 16 e 256) e apenas 1 (1,2%) tinha anticorpos contra N. caninum. A reação sorologicamente positiva para T. gondii e N. caninum não foi correlacionada com a idade ou sexo (p> 0,05), nem houve correlação entre FIV e ocorrência de anticorpos para T. gondii ou N. caninum(p> 0,05). Estudos subsequentes abrangendo populações maiores de gatos de diferentes origens e locais são essenciais para esclarecer a prevalência de anticorpos contra T. gondii e N. caninum em animais acometidos por FIV.(AU)

Endoparasites in domestic animals surrounding an Atlantic Forest remnant, in São Paulo State, Brazil / Endoparasitas em animais domésticos que vivem ao redor de uma reserva florestal, no Estado de São Paulo, Brasil

Abstract Morro do Diabo State Park (MDSP) is a significant remnant of the Atlantic Rain Forest in Brazil and is surrounded by rural properties. In that area, wild and domestic animals and humans are in close contact, which facilitates the two-way flow of infectious diseases among them. We assessed endoparasites in domestic livestock from all rural properties surrounding MDSP. There were sampled 197 cattle, 37 horses, 11 sheep, 25 swine, 21 dogs, one cat and 62 groups of chickens from 10 large private properties and 75 rural settlements. Eimeria spp. was present in almost all hosts, excepted in horses, dogs and cats. Giardia cysts were present only in cattle. Nematodes were found in swine, ruminants and horses in high prevalence. Ancylostoma, Toxocara and Sarcocystis were found in dogs. Chickens were found with coccidia, Ascaridida and Capillaria spp.. These parasites can cause malnutrition and reproductive disorders for their hosts. Strategies to prevent and control the spread of endoparasites can improve wildlife, animal and human health in this area.

Resumo O Parque Estadual Morro do diabo (PEMD) é um significante remanescente de Mata Atlântica no Brasil, e rodeado de propriedades rurais. Nesta área humanos, animais domésticos e silvestres vivem próximos, o que facilita o fluxo de agentes infecciosas entre eles. Nós avaliamos a presença de endoparasitas, por meio de exame coproparasitológico dos animais domésticos de todas as propriedades rurais do entorno do PEMD. Foram amostrados 197 bovinos, 37 equinos, 11 ovinos, 25 suínos, 62 grupos de galinhas, 22 cães e 1 gato, residentes em 10 grandes propriedades privadas e 75 assentamentos rurais. Eimeria spp. estava presente em quase todas as espécies hospedeiras, com excessão de equinos, cães e gatos. Cistos de Giardia estavam presentes somente em bovinos. Nematodes foram encontrados em suínos, ruminantes e equinos em alta prevalência. Ancylostoma, Toxocara e Sarcocystis foram encontrados em cães. Galinhas foram encontradas com coccidia, Ascaridida e Capillaria spp.. Os parasitas encontrados podem causar má nutrição e problemas reprodutivos para seus hospedeiros. Medidas de prevenção e controle da dispersão de endoparasitas podem melhorar a condição de saúde pública, animal e ambiental nesta área.

Fatal toxoplasmosis in an immunosuppressed domestic cat from Brazil caused by Toxoplasma gondii clonal type I / Toxoplasmose fatal em um gato doméstico imunossuprimido do Brasil causada por Toxoplama gondii clonal tipo I

Abstract The objective of the study was to report on a fatal case of feline toxoplasmosis with coinfection with the feline leukemia virus (FeLV). A domestic cat (Felis silvestris catus) presented intense dyspnea and died three days later. In the necropsy, the lungs were firm, without collapse and with many white areas; moderate lymphadenomegaly and splenomegaly were also observed. The histopathological examination showed severe necrotic interstitial bronchopneumonia and mild necrotic hepatitis, associated with intralesional cysts and tachyzoites of Toxoplasma gondii that were positive by anti-T. gondii immunohistochemical (IHC) evaluation. The bone marrow showed chronic myeloid leukemia and the neoplastic cells were positive by anti-FeLV IHC evaluation. DNA extracted from lungs was positive for T. gondii by PCR targeting REP-529. T. gondii was characterized by PCR-RFLP and by the microsatellites technique. ToxoDB-PCR-RFLP #10, i.e. the archetypal type I, was identified. Microsatellite analysis showed that the strain was a variant of type I with two atypical alleles. This was the first time that a T. gondii clonal type I genotype was correlated with a case of acute toxoplasmosis in a host in Brazil.

Resumo O objetivo deste estudo foi relatar um caso de toxoplasmose felina fatal com coinfecção com o vírus da leucemia felina (FeLV). Um gato doméstico (Felis silvestris catus) apresentou intensa dispneia e morreu três dias depois. Na necropsia, observaram-se pulmões firmes, não colabados e com múltiplas áreas brancas, além de linfoadenomegalia e esplenomegalia moderadas. No exame histopatológico, evidenciaram-se broncopneumonia intersticial necrótica acentuada e hepatite necrótica discreta associada a cistos e taquizoítas de T. gondii intralesionais positivos na imuno-histoquímica (IHC) anti-T. gondii. Evidenciou-se ainda, na medula óssea, leucemia mieloide crônica com IHC anti-FeLV positiva nas células neoplásicas. O DNA extraído dos pulmões foi positivo para T. gondii por meio da PCR-REP-529. T. gondii foi caracterizado por PCR-RFLP e pela técnica de microssatélites. Foi identificado o genótipo ToxoDB-PCR-RFLP #10, i.e., o arquétipo tipo I. A análise por microssatélites mostrou que a cepa era uma variante do tipo I, com dois alelos atípicos. Esta é a primeira vez que T. gondii clonal tipo I foi relacionado com um caso agudo de toxoplasmosis em um hospedeiro no Brasil.

Risk factors for Toxoplasma gondii infection in sheep in the northeastern region of Brazil / Fatores de risco para a infecção de Toxoplasma gondii em ovinos da região nordeste do Brasil

Toxoplasma gondii is an infective parasite that causes reproductive disorders such as abortion, fetal mummification, birth of weak offspring, and stillbirth, thereby causing economic losses to sheep production. The northeastern region of Brazil has approximately 171 million small ruminants, of which 5.4% are sheep. The present study aimed at determining the rate of occurrence of T. gondii in sheep flocks on 60 farms in 19 municipalities in the three mesoregions (eastern, semi-arid, and sertão or backlands) of the state of Sergipe, Brazil, and the risk factors associated with this infection. Serum samples were collected between 2011 and 2012, from 60 farms located in 19 municipalities in the three mesoregions: 680 in the eastern region, 280 in the semi-arid region, and 240 in the backlands, totaling 1,200 samples (990 females and 210 males). Anti-T. gondii antibodies were detected by means of the indirect fluorescence antibody test (IFAT ≥ 64). The highest occurrence was detected in the eastern region (45.3%, p = 0.001). On farms with subsistence production, the risk of having animals infected by T. gondii was approximately twice as high as on breeding/rebreeding/fattening farms (OR: 3.03; CI: 1.97-4.68). There was a significant lack of sanitary care, such as absence of a dunghill (p = 0.000; OR: 1.60; CI: 1.26-2.03), quarantine (p = 0.000; OR: 1.87; CI: 1.45-2.41) and disinfection (p = 0.003; OR: 1.46; CI: 1.13-1.88). Regarding feeding, the risk of infection was 1.74 and 1.37 times higher in places that used a trough and/or that cats could access, respectively. The present study allows the conclusions that T. gondii is found on farms in the three mesoregions of the state of Sergipe and that environmental and management factors have an influence on sheep infection.(AU)

Toxoplasma gondii é um parasita cuja infecção leva a desordens reprodutivas como aborto, mumificação fetal, nascimento de cordeiros fracos e natimortos, provocando perdas econômicas na produção ovina. A região nordeste do Brasil possui aproximadamente 171 milhões de pequenos ruminantes, dos quais 5,4% são ovinos. Este estudo tem como objetivo determinar a ocorrência de T. gondii nos rebanhos ovinos de 60 propriedades de 19 municípios de três mesorregiões (leste, semiárido e sertão) do estado de Sergipe, Brasil, e os fatores de risco associados a essa infecção. Amostras de soro foram coletadas entre 2011 e 2012, em 60 propriedades localizadas em 19 municípios das três mesorregiões: 680 na região leste, 280 no semiárido e 240 no sertão, totalizando 1.200 amostras (990 fêmeas e 210 machos). Anticorpos anti-T.gondii foram detectados por reação de imunofluorescência indireta (RIF ≥ 64). A maior ocorrência foi detectada na região leste (45,3%, p = 0.001). Em propriedades com produção de subsistência, o risco de animais infectados por T. gondii é aproximadamente duas vezes maior que nas de cria/recria/engorda (OR = 3.03/ IC: 1.97-4.68). A ausência de cuidados sanitários, como ausência de esterqueira (p = 0.000/ OR: 1.60; CI: 1.26-2.03); quarentena (p = 0.000/ OR: 1.87; CI: 1.45-2.41) e desinfecção (p = 0.003/ OR: 1.46; CI: 1.13-1.88) foram significantes. Em relação à alimentação, o risco de infecção aumenta 1.74 e 1.37 em locais que utilizam cocho ou com presença de gatos, respectivamente. Este estudo permite concluir que o T. gondii é encontrado em propriedades das mesorregiões do estado de Sergipe e fatores ambientais e de manejo estão influenciando nas infecções em ovinos.(AU)

Anti-Toxoplasma gondii antibodies in mammals, birds and reptiles at the zoological-botanical park in João Pessoa, Paraíba, Brazil / Anticorpos anti-Toxoplasma gondii em mamíferos, aves e répteis no parque zoobotânico em João Pessoa, Paraíba, Brasil

The purpose of this study was to verify the occurrence of anti-Toxoplasma gondii antibodies in 51 wild animals at the Arruda Câmara Zoological-Botanical Park in João Pessoa, PB, Brazil. Blood samples from different bird, mammal and reptile species were analyzed using the Modified Agglutination Test (MAT) with a cut-off point of 1:25. Anti-T. gondii antibodies were detected in 62.4% of the 51 tested animals. The following frequencies were found: 68.9% (20/29) in mammals, 80% (8/10) in birds, and 33.3% (4/12) in reptiles. This paper reports for the first time the occurrence of anti-T. gondii antibodies in birds of the species Pionites leucogaster (caíque), Anodorhynchus hyacinthinus (hyacinth macaw), Pavo cristatus (Indian peafowl), Urubitinga urubitinga (Brazilian eagle), and Buteo melanoleucus (black-and-white hawk-eagle). Reptiles of the species Caiman crocodilus (spectacled caiman), Chelonoidis carbonaria (red-footed tortoise) and Paleosuchus palpebrosus (Cuvier's dwarf caiman) were seropositive for T. gondii, although the significance of the presence of these anti-T. gondii antibodies in this group of animals requires a more in-depth study. We conclude that the frequency of antibodies found in the animals of this zoo is high and that the prophylactic measures that aim to diminish the environmental contamination by oocysts are necessary.(AU)

Este trabalho teve como objetivo verificar a ocorrência de anticorpos anti-Toxoplasma gondii em 51 animais silvestres mantidos no Parque Zoobotânico Arruda Câmara, João Pessoa, Brasil. Para isso, foram avaliadas amostras sanguíneas de diferentes espécies de aves, mamíferos e répteis por meio do Teste de Aglutinação Modificado (MAT) com ponto de corte de 1:25. Dos 51 animais testados, 62,4% apresentaram anticorpos anti-T. gondii. Nos mamíferos, a frequência encontrada foi de 68,9% (20/29), em aves foi de 80% (8/10) e em répteis de 33,3% (4/12). Pela primeira vez é relatada a ocorrência de anticorpos anti-T. gondii em aves das espécies Pionites leucogaster (marianinha-de-cabeça-amarela), Anodorhynchus hyacinthinus (arara-azul-grande), Pavo cristatus (pavão), Urubitinga urubitinga (gavião-preto) e Buteo melanoleucus (águia-chilena). Répteis das espécies Caiman crocodilus (jacaretinga), Chelonoidis carbonaria (jabuti) e Paleosuchus palpebrosus (jacaré-anão) foram soropositivos para T. gondii, embora o significado da presença desses anticorpos anti-T. gondii precise ser mais bem estudado nesse grupo de animais. Conclui-se que é alta a frequência de anticorpos encontrados nos animais do zoológico estudado e que medidas profiláticas que visem diminuir a contaminação ambiental por oocistos são necessárias.(AU)

Frequency of gastrointestinal parasites in cats seen at the University of São Paulo Veterinary Hospital, Brazil / Frequência de parasitos gastrintestinais em gatos atendidos no Hospital Veterinário da Universidade de São Paulo, Brasil

Abstract The frequency of gastrointestinal infections in 502 cats seen at the Veterinary Hospital of the University of São Paulo, SP, Brazil, between 2005 and 2014, was measured. The samples were analyzed using methods of flotation and sedimentation. The results were compared with those from studies published previously using fecal samples from the same hospital at different times. Associations between the frequency of positivity for each parasite and age, breed, sex, diarrhea and use of anthelmintic were investigated (chi-square or Fisher’s exact tests). A partitioned chi-square test was used to compare different periods. Cryptosporidium spp., Giardia spp., Cystoisospora spp. and Sarcocystis spp. were the most common parasites, followed by Toxocara cati and Ancylostoma spp. Cryptosporidium spp. presented higher frequency in young cats and Sarcocystis spp. with the presence of diarrhea (p < 0.05). Results from this study with previous periods showed that the frequencies of Cryptosporidium spp., Cystoisospora spp. and T. cati were lower (p < 0.05) than those observed in previous periods. The frequencies of Giardia spp. and Ancylostoma spp. were similar to the results found in the preceding period and lower than the values found for the other periods (p < 0.05). The reasons for these changes should be investigated.

Resumo A frequência de infecções gastrintestinais foi avaliada em 502 gatos atendidos no Hospital Veterinário da Universidade de São Paulo, SP, Brasil, entre 2005 e 2014. As amostras foram analisadas utilizando-se os métodos de flutuação e sedimentação. Os resultados foram comparados com os de estudos previamente publicados com amostras de fezes oriundas do mesmo hospital, em momentos diferentes. As associações entre a frequência de positividade para cada parasito e idade, raça, sexo, ocorrência de diarreia e uso de anti-helmínticos foram investigadas (teste de qui-quadrado ou teste exato de Fisher). Um teste de qui-quadrado estratificado foi utilizado para comparar os diferentes períodos (1991-1995; 1996-1999; 2000-2004 e 2005-2014). Cryptosporidium spp., Giardia spp., Cystoisospora spp. e Sarcocystis spp. foram os parasitos mais comuns parasitos, seguidos por Toxocara cati e Ancylostoma spp. Cryptosporidium spp. apresentou maior frequência em gatos jovens e Sarcocystis spp. em animais com diarreia (p < 0,05). Comparação das frequências obtidas neste estudo com os de períodos anteriores mostrou que as frequências de Cryptosporidium spp., Cystoisospora spp. e T. cati foram menores (p < 0,05) que as observadas nos períodos anteriores. As frequências de Giardia spp. e Ancylostoma spp. foram semelhantes (p > 0,05) aos resultados encontrados no período de 2000 a 2004 e menores do que os valores encontrados para os outros períodos (p <0,05). Os motivos dessas alterações devem ser investigados.

Anti-Toxoplasma gondii and anti-Neospora caninum antibodies in capybaras (Hydrochoerus hydrochaeris) from Itu Municipality, São Paulo / Anticorpos anti-Toxoplasma gondii e anti-Neospora caninum em capivaras (Hydrochoerus hydrochaeris) do Município de Itu, São Paulo

Abstract Capybaras (Hydrochoerus hydrochaeris) are the largest rodents found in South America. The aim of the present study was to investigate the occurrence of anti-Toxoplasma gondii and anti-Neospora caninum antibodies in 170 free-living capybaras in a residential park area in Itu Municipality, São Paulo State, Brazil. Serum samples were tested by indirect fluorescent antibody test (IFAT) for T. gondii (IFAT ≥ 1:16) and N. caninum (IFAT ≥ 1:50). Among the 170 samples analyzed, 10% (17/170) and 0% (0/170) were seropositive for T. gondii and N. caninum, respectively. This study confirms the widespread presence of T. gondii and reinforces the role of capybaras in the life cycle of this parasite. Capybaras may not be important as intermediate hosts of N. caninum in the studied environment.

Resumo As capivaras (Hydrochoerus hydrochaeris) são os maiores roedores encontrados na América do Sul. O objetivo do presente estudo foi investigar a ocorrência de anticorpos anti-Toxoplasma gondii e anti-Neospora caninum em 170 capivaras de vida livre, habitando em um condomínio fechado no Município de Itu, Estado de São Paulo, Brasil. Amostras de soro foram testadas por meio da Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) para T. gondii (RIFI ≥ 1:16) e N. caninum (RIFI ≥ 1:50). Entre as 170 amostras analisadas, 10% (17/170) e 0% (0/170) foram positivas para T. gondii eN. caninum, respectivamente. O presente estudo confirma a ampla distribuição de T. gondii e reforça o papel das capivaras no ciclo biológico desse parasita. Provavelmente, as capivaras não têm um papel importante como hospedeiros intermediários de N. caninum no ambiente estudado.

Prevalence of antibodies against Neospora spp. and Sarcocystis neurona in donkeys from northeastern Brazil / Prevalência de anticorpos contra Neospora spp e Sarcocystis neurona em jumentos do nordeste do Brazil

Abstract Sarcocystis neurona and Neospora hughesi are coccidian protozoa that can cause neurological illness in horses in America. In this study we report seroprevalence of Neospora spp. andS. neurona in sera of 333 donkeys from the northeastern region of Brazil. Antibodies to Neospora spp. were detected in 2% (7 donkeys) of 333 sera tested by the indirect fluorescent antibody test (IFAT) with a cut-off dilution of 1:40. Antibodies to S. neurona were found in 3% (10 donkeys) of the samples tested by IFAT (cut-off ≥50) and 21% (69 donkeys) by the direct agglutination test (SAT ≥50). The SAT and IFAT results for S. neurona showed a poor concordance (value of Kappa=0.051). This is the first report ofNeospora spp. antibodies in Brazilian donkeys and the first detection of antibodies against S. neurona in this animal species.

Resumo Sarcocystis neurona e Neospora hughesi são protozoários coccídios que infectam equídeos e são responsáveis por doenças neurológicas nessas espécies. Neste estudo, a soroprevalência de infecção porS. neurona e Neospora spp. foi determinada em amostras de 333 soros de jumentos da Região Nordeste do Brasil. Anticorpos contra Neospora spp. foram detectados em 2% (7 jumentos) dos 333 animais examinados pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI), com ponto de corte de 40. Anticorpos contra S. neurona foram detectados em 3% (10 jumentos) das amostras pela RIFI (ponto de corte de 50) e em 21% (69 jumentos) pela técnica de aglutinação direta (SAT - ponto de corte de 50). SAT e RIFI, para diagnóstico de S. neurona, apresentaram uma baixa concordância (Kappa = 0,051). Essa é a primeira observação de anticorpos anti-N. caninum em jumentos brasileiros e a primeira detecção de anticorpos contra S. neurona nessa espécie.

Presence of anti-Toxoplasma gondii, -Neospora caninum, - Leishmania spp. and -Ehrlichia canis antibodies in free-ranging maned wolves (Chrysocyon brachyurus) in the northeastern region of the state of São Paulo, Brazil / Presença de anticorpos anti-Toxoplasma gondii, -Neospora caninum, -Leishmania spp. e - Ehrlichia canis em lobos-guará (Chrysocyon brachyurus) de vida livre na Região Nordeste do Estado de São Paulo, Brasil

The maned wolf (Chrysocyon brachyurus), an inhabitant of the Brazilian savanna, is considered the largest canid of South America and is classified as a near-threatened species by the International Union for Conservation of Nature (IUNC). The purpose of this study was to investigate the presence of antibodies against Toxoplasma gondii, -Neospora caninum, - Leishmania spp., and -Ehrlichia canis in free-ranging maned wolves in the northeastern region of the state of São Paulo, Brazil. Of the 17 serum samples tested by the indirect fluorescent antibody test (IFAT), 88.2% (15/17), 17.6% (3/17) and 52.9% (9/17) showed anti-T. gondii, -Leishmania spp., and -E. canis antibodies, respectively. None of the studied maned wolves tested positive for N. caninum antibodies. Our results indicated the exposure of free-ranging maned wolves to the agents in question. The presence of industrial complexes, extensive agriculture and habitat fragmentation in the northeastern region of the state of São Paulo puts these wild animals in proximity to urban areas, possibly contributing to the transmission of diseases between wild and domestic animals and human beings.(AU)

O lobo-guará (Chrysocyon brachyurus) habita o ecossistema de Cerrado e é considerado o maior canídeo da América do Sul e uma espécie ameaçada de extinção pela "International Union for Conservation of Nature" (IUNC). O objetivo desse estudo foi investigar a presença de anticorpos anti-Toxoplasma gondii, -Neospora caninum, -Leishmania spp. e -Ehrlichia canis em lobosguará da região nordeste do estado de São Paulo, Brasil. Das 17 amostras de soro testadas por meio da reação de imunofluorescência indireta (RIFI), 88,2% (15/17), 17,6% (3/17) e 52,9% (9/17) apresentaram anticorpos anti-T. gondii, - Leishmania spp. e -E. canis, respectivamente. Todos os animais testados foram soronegativos para N. caninum. Esses resultados indicam a exposição dos lobos-guará dessa região aos agentes pesquisados. A presença de um complexo industrial, agricultura extensiva e fragmentação de habitat na região nordeste do estado de São Paulo, favorece a proximidade desses animais silvestres a ambientes urbanos o que pode contribuir para a transmissão de doenças entre os animais silvestres, domésticos e o homem.(AU)

Risk factors for Toxoplasma gondii and Neospora caninum seropositivity in buffaloes in Paraiba State, Brazil / Fatores de risco associados à soropositividade para Toxoplasma gondii e Neospora caninum em búfalos no Estado da Paraíba, Nordeste do Brasil

The aims of this survey were to determine the frequency of anti-Toxoplasma gondii and anti-Neospora caninum antibodies and to identify the risk factors associated with seropositivity among buffaloes in the state of Paraíba, Brazil. This survey included 136 buffaloes belonging to 14 herds. To detect anti-T. gondii and anti-N. caninum antibodies, the indirect fluorescent antibody test (IFAT) was used. Among the 136 samples analyzed, 17 (12.5%) were positive for anti-T. gondii antibodies with titers ranging from 64 to 1,024, and 26 (19.1%) for anti-N. caninum with titers from 200 to 1,600. Animals seropositive for both T. gondii and N. caninum were found in 10 of the 14 herds (71.4%). Semi-intensive management systems (odds ratio = 2.99) and presence of pigs (odds ratio = 4.33) were identified as risk factors for T. gondii and N. caninum, respectively. It can be suggested that T. gondii and N. caninum are widespread in buffaloes in Paraíba, and that additional surveys are needed in order to ascertain the importance of these agents for this species and for pigs, and the influence of the farming type on occurrences of seropositive animals.

Os objetivos deste trabalho foram determinar a frequência de anticorpos anti-Toxoplasma gondii e anti-Neospora caninum e identificar os fatores de risco associados com as soropositividades em búfalos do Estado da Paraíba, Brasil. Foram utilizados 136 búfalos oriundos de 14 propriedades. Para a detecção de anticorpos anti-T. gondii e anti-N. caninum, foi empregada a reação de imunofluorescência indireta (RIFI). Das 136 amostras analisadas, 17 (12,5%) foram positivas para anticorpos anti-T. gondii, com títulos variando de 64 a 1.024; e 26 (19,1%) para anticorpos anti-N. caninum, com títulos de 200 a 1.600. Das 14 propriedades, em 10 (71,4%) houve animais soropositivos tanto para T. gondii como para N. caninum. O manejo semi-intensivo (odds ratio = 2,99) e a presença de suínos (odds ratio = 4,33) foram identificados como fatores de risco para T. gondii e N. caninum, respectivamente. Sugere-se que T. gondii e N. caninum estão disseminados em búfalos do Estado da Paraíba, bem como a necessidade de mais estudos acerca da importância desses agentes nessa espécie e em suínos, e da influência do tipo de criação na ocorrência de animais soropositivos.

Prevalence and risk factors for Toxoplasma gondii in sheep in the State of Paraíba, Northeastern Brazil / Prevalência de rebanhos positivos e de animais soropositivos e fatores de risco associados com a infecção por Toxoplasma gondii em ovinos no Estado da Paraíba, Nordeste do Brasil

The aims of this survey were to determine the flock-level and animal-level prevalences of anti-Toxoplasma gondii antibodies in sheep in the State of Paraíba, Northeastern Brazil, and to identify risk factors. Blood samples were collected from 540 sheep in 63 flocks in 14 municipalities in the Sertão mesoregion. To serologically diagnose T. gondiiinfection, the indirect immunofluorescent antibody test (IFAT) was used. Flocks with at least one seropositive animal were considered positive. Among the 63 flocks, 28 (44.44%) were positive, and 60 (11.11%) of the 540 animals were seropositive. Variable flock size > 25 animals was identified as a risk factor (odds ratio = 3.2; 95% CI = 1.09 9.34; P = 0.033). The results from this survey demonstrate that T. gondii is spread among sheep in the State of Paraíba.

Os objetivos deste trabalho foram determinar a prevalência de rebanhos positivos e de animais soropositivos para Toxoplasma gondii em ovinos do Estado da Paraíba, Nordeste do Brasil, bem como identificar fatores de risco. Foram colhidas amostras de sangue de 540 ovinos de 63 rebanhos em 14 municípios da mesorregião do Sertão. Para o diagnóstico sorológico da infecção por T. gondii, foi utilizado o teste de imunofluorescência indireta (RIFI). Rebanhos com pelo menos um animal soropositivo foram considerados positivos. Dos 63 rebanhos, 28 (44,44%) foram positivos, e 60 (11,11%) dos 540 animais foram soropositivos. A variável tamanho do rebanho > 25 animais foi identificada como fator de risco (odds ratio = 3,2; IC 95% = 1,09 9,34; P = 0,033). Os resultados deste trabalho sugerem a disseminação de T. gondii em ovinos no Estado da Paraíba.

Toxoplasma gondii in domestic and wild animals from forest fragments of the municipality of Natal, northeastern Brazil / Toxoplasma gondii em animais domésticos e silvestres de fragmentos florestais do município de Natal, nordeste do Brasil

Toxoplasmosis stands out as a global disease that has felines as definitive hosts. In the municipality of Natal, Rio Grande do Norte State, Brazil, two parks are notable for their ecological and social importance. This study aimed to investigate the presence of Toxoplasma gondii in short hair cats, bats and small non-volant mammals in these two ecological reserves. Altogether, biological samples were obtained from 154 mammals, 92 wild animals from both areas and 62 domestic cats of the Parque da Cidade. In total, 22 (53.7%) non-volant wild mammals, 11 (21.5%) bats and 28 (52.8%) cats were positive for IgG anti-T. gondii antibodies using the Modified Agglutination Test (≥ 25). It was possible to detect the presence of T. gondii DNA, by means of a molecular amplification of a B1 gene fragment (155bp), in 92 tissue samples from wild animals, including Didelphis albiventris, Monodelphis domestica, Artibeus lituratus, Carollia perspicillata and Glossophaga soricina. Of the 62 cats examined by the same molecular method, T. gondii DNA could be detected in 4 cats. In this study, it was observed the circulation of T. gondii in wild species and domestic cats, demonstrating the involvement of wild and domestic animals in the cycle of T. gondii.

Toxoplasmose destaca-se como uma doença global que tem felinos como hospedeiros definitivos. No município de Natal, Rio Grande do Norte, Brasil, dois parques são notáveis por sua importância ecológica e social. Este estudo teve como objetivo investigar a presença de Toxoplasma gondii em gatos de rua, morcegos e pequenos mamíferos não-voadores nestas duas reservas ecológicas. No total, as amostras biológicas foram obtidas de 154 mamíferos, 92 animais selvagens de ambas as áreas e 62 gatos domésticos do Parque da Cidade. No total, 22 (53,7%) mamíferos silvestres não-voadores, 11 (21,5%) morcegos e 28 (52,8%) gatos foram positivos para IgG anti-T. gondii utilizando o Teste de Aglutinação Modificado (≥ 25). Foi possível detectar a presença de DNA de T. gondii, por meio de uma amplificação molecular de um fragmento do gene B1 (155bp), em 92 amostras de tecido de animais selvagens, incluindo Didelphis albiventris, Monodelphis domestica, Artibeus lituratus, Carollia perspicillata e Glossophaga soricina. Dos 62 gatos examinadas pelo mesmo método molecular, DNA de T. gondii pode ser detectado em quatro gatos. Neste estudo, observou-se a circulação de T. gondii em espécies selvagens e gatos domésticos, demonstrando o envolvimento de animais domésticos e selvagens no ciclo de T. gondii.

Seroprevalence rates of antibodies against Leishmania infantum and other protozoan and rickettsial parasites in dogs / Soroprevalência de anticorpos contra Leishmania infantum e outras espécies de protozoários e rickettsia em cães

Canine visceral leishmaniasis (CVL) is caused by the protozoan Leishmania infantum, which infects dogs and humans in many regions of Brazil. The present study involved an indirect fluorescent antibody test (IFAT) to analyze L. infantum, Ehrlichia spp., Babesia canis, Toxoplasma gondii and Neospora caninum infection rates in serum samples from 93 dogs in a rural settlement in Ilha Solteira, SP, Brazil. The seroprevalence rates of anti-L. infantum, anti-Ehrlichia, anti-B. canis, anti-T. gondii and anti-N. caninum antibodies were 37.6%, 75.3%, 72%, 47.3% and 6.4%, respectively. In addition to IFAT, direct microscopic examination of popliteal lymph node aspirates revealed 26.9% of CVL positive dogs. Serological tests revealed that 17.2% of the dogs were seropositive for a single parasite, 29% for two parasites, 33% for three, 16.1% for four, and 1.1% for five parasites, while 3.2% were seronegative for five parasites. The presence of antibodies against these parasites in serum samples from dogs confirmed their exposure to these parasites in this rural area. Because of the potential zoonotic risk of these diseases, mainly leishmaniasis, ehrlichiosis and toxoplasmosis, special attention should focus on programs for the improvement of diagnostic assays and control measures against these parasites.

Leishmaniose Visceral Canina (LVC) é causada pelo protozoário Leishmania infantum, podendo infectar cães e humanos em várias regiões do Brasil. O presente estudo teve por objetivo realizar a reação de imunofluorescência indireta (RIFI) para analisar os índices de infecção parasitária para L. infantum, Ehrlichia spp., Babesia canis, Toxoplasma gondii e Neospora caninum, em 93 amostras de soro de cães de um assentamento rural no município de Ilha Solteira, SP, Brasil. A taxa de soroprevalência de cães com anticorpos anti-L. infantum, anti-Ehrlichia, anti-B. canis, anti-T. gondii e anti-N. caninum foi de 37,6%, 75,3%, 72%, 47,3% e 6,4%, respectivamente. Pelo exame microscópico direto dos parasitas nos esfregaços de aspirados de linfonodos poplíteos dos cães, a positividade para LVC foi de 26,9%. Pelos exames sorológicos, 17,2% dos cães estavam positivos com um único parasita, 29% com dois, 33% com três, 16,1% com quatro e 1,1% com cinco parasitas. Além disso, 3,2% eram soronegativos para todos os cinco agentes parasitários. A presença de anticorpos aos parasitos em amostras sorológicas confirmam a exposição dos cães às doenças parasitárias nesse assentamento rural. Devido ao potencial risco zoonótico destas doenças, principalmente leishmaniose, erliquiose e toxoplasmose, atenção especial deve ser dada aos programas que objetivam o aprimoramento de testes diagnósticos e de medidas de controle dessas parasitoses.

Toxoplasma gondii: evaluation of immunofluorescence assay using heterologous secondary antibody in experimentally infected wild small rodents / Toxoplasma gondii: avaliação da reação de imunofluorescência indireta usando anticorpo secundário heterólogo em roedores silvestres experimentalmente infectados

Toxoplasmosis is a zoonotic infection caused by Toxoplasma gondii that affects a wide range of vertebrates. Rodents are intermediate hosts and serve as food for felids, the definitive hosts. However, because of the high variety of species in the order Rodentia, the serological diagnosis is difficult to perform, since the most used techniques require the use of specific antibody conjugated to fluorescein or enzymes. The aim of this study was to evaluate the use of a heterologous secondary antibody conjugate in Immunofluorescence Antibody Test (IFAT) for diagnosis of anti-T. gondii antibodies in two species of wild rodents: Euryoryzomys russatus (WAGNER, 1848) and Calomys callosus (RENGGER, 1830). The specie Mus musculus (Linnaeus, 1758) was used as control conjugate. The animals were experimentally infected with five cysts of T. gondii (strain ME 49) per animal. The Modified Agglutination Test (MAT), which does not require the use of conjugates, and the presence of T. gondii cysts in the rodents were used to confirm the infection. For each animal species, serum samples were collected weekly for five weeks and tested (50 samples per rodent specie, total of 150 samples). None of the samples from C. callosus and E. russatus were positive in the IFAT when anti-mouse heterologous conjugate was used. Brain cysts of T. gondii were microscopically observed in all animals, except in one of the E. russatus. Positive results were found in the MAT 14 days after T. gondii infection in all three species of rodents and IFAT of the control group (M. musculus) was also positive 14 days after infection using anti-mouse (homologous) conjugate. The use of heterologous secondary antibody conjugates should be used with caution and the MAT had a good agreement for serological diagnosis of T. gondii in the studied rodent species.

A toxoplasmose é uma zoonose causada pelo Toxoplasma gondii, que afeta uma grande variedade de vertebrados. Os roedores são hospedeiros intermediários e servem de alimento para felinos, os hospedeiros definitivos. No entanto, por causa da elevada variedade de espécies na ordem Rodentia, o diagnóstico serológico é difícil de ser realizado, uma vez que as técnicas mais empregadas requerem a utilização de um anticorpo específico conjugado com fluoresceína ou enzimas. O objetivo deste estudo foi avaliar o uso de um conjugado secundário heterólogo na Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) para diagnóstico de anticorpos anti-T. gondii em duas espécies de roedores silvestres: Euryoryzomys russatus (WAGNER, 1848) e Calomys callosus (RENGGER, 1830). A espécie Mus musculus (Linnaeus, 1758) foi utilizada como controle do conjugado. As três espécies de roedores foram experimentalmente infectadas com cinco cistos de T. gondii (cepas ME 49) por animal. O Teste de Aglutinação Modificado (MAT), que não requer o uso de conjugados, bem como, a presença de cistos de T. gondii nos roedores foram usados para confirmar a infecção. Para cada espécie de animal, amostras de soro foram coletadas durante cinco semanas e testadas (50 amostras por espécie de roedor, total de 150 amostras). Nenhuma das amostras de C. callosus e E. russatus foram positivas na RIFI, quando foi usado o conjugado heterólogo anti-camundongo. Cistos cerebrais de T. gondii foram microscopicamente observados em todos os animais, exceto em um dos E. russatus. Resultados positivos foram encontrados pelo MAT após 14 dias de inoculação em todas as três espécies estudadas e pela RIFI no grupo controle (M. musculus), também no dia 14 após a infecção utilizando conjugado anti-camundongo. O uso de conjugados secundários heterólogos deve ser empregado com cautela e o MAT apresentou uma boa concordância para o diagnóstico sorológico de T. gondii nas espécies de roedores estudadas.

Risk factors associated with Toxoplasma gondii seroprevalence in goats in the State of Paraíba, Brazil / Fatores de risco associados à soroprevalência de Toxoplasma gondii em caprinos do Estado da Paraíba, Brasil

A cross-sectional study based on planned sampling was carried out to determine flock-level risk factors associated with Toxoplasma gondii antibody prevalence in dairy goat flocks in a semiarid region of northeastern Brazil. Serum samples from 975 adult dairy goats from 110 flocks were examined by indirect immonufluorescent antibody test (IFAT), using cut-off point at 1:64 dilution. From the 110 flocks, 77 presented at least one seropositive animal, corresponding to a prevalence of 70% (95% CI: 60.5-78.4%). Out of the 975 animals, 177 (18.1%; 95% CI = 15.8-20.7%) tested positive. The presence of toxic plants (OR = 5.11; P = 0.045) and the fact that goat breeding is not the main activity on the farm (OR = 3.34; P = 0.014) were identified as risk factors. The results of the present study showed evidence of the presence of T. gondii infection in dairy goats from a semiarid region of northeastern Brazil using planned sampling. Further studies are needed to elucidate the importance of the identified risk factors in the epidemiology of the infection.(AU)

Foi conduzido um estudo transversal baseado em amostragem planejada com o objetivo de determinar fatores de risco associados com a prevalência de anticorpos contra Toxoplasma gondii, em rebanhos de caprinos leiteiros, em uma região semiárida do Nordeste do Brasil. Amostras de soro de 975 caprinos leiteiros adultos, procedentes de 110 propriedades, foram examinadas pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI), utilizando-se como ponto de corte a diluição 1:64. Das 110 propriedades, 77 apresentaram pelo menos um animal soropositivo, correspondendo a uma prevalência de 70% (IC 95%: 60,5-78,4%). Dos 975 animais, 177 (18,1%; IC 95% = 15,8-20,7%) foram positivos. Apesar da presença de plantas tóxicas (OR = 5,11; P = 0,045) e da caprinocultura não ser a principal atividade na propriedade (OR = 3,34; P = 0,014), foram identificados como fatores de risco. Os resultados do presente estudo mostraram uma evidência da presença da infecção por T. gondii, em caprinos leiteiros, em uma região semiárida do Nordeste do Brasil, utilizando-se uma amostragem planejada. Há necessidade de condução de estudos posteriores para elucidar a importância epidemiológica dos fatores de risco identificados.(AU)

Toxoplasma gondii: diagnosis of experimental and natural infection in pigeons (Columba livia) by serological, biological and molecular techniques / Toxoplasma gondii: diagnóstico da infecção experimental e natural em pombos (Columba livia) por métodos sorológicos, biológicos e moleculares

This study aimed to diagnose experimental and natural Toxoplasma gondii infection in pigeons (Columba livia) by serological, biological and molecular techniques. Twelve pigeons, free of infection, were inoculated with 50 sporulated oocysts of T. gondii (VEG sample) and four remained uninfected controls. Four birds (three infected and one control) were euthanized at 15, 30, 45 and 60 days post-infection (dpi), and their tissues were used to perform a bioassay in mice and nested-PCR using B1 gene as target. Blood was obtained weekly and it was tested for the presence of anti-T. gondii antibodies by the indirect fluorescent antibody test (IFAT) and modified agglutination test (MAT). Seven (58.3 percent) out of 12 inoculated pigeons were positive by serological techniques and titers ranged between 1:40 and 1:5120 by MAT and between 1:512 and 1:4096 by IFAT. Complete agreement was seen between the results obtained by serological techniques and nested-PCR in seven positive birds. In the bioassay in mice, five (41.7 percent) out of 12 pigeons inoculated were positive to T. gondii. Only one pigeon died at 23 dpi due to toxoplasmosis. A second study with free-living pigeons was performed for detection of anti-T. gondii antibodies. Birds were captured in the municipalities of São Paulo, Ibiúna and Sorocaba, São Paulo State, Southeastern Brazil. All 126 free-living birds were negative to anti-T. gondii antibodies by MAT (titer < 1:5). Bioassays were performed in mice with tissues from all captured birds and T. gondii was not isolated in any pigeon.

O presente estudo teve por objetivo diagnosticar a infecção experimental e natural pelo Toxoplasma gondii em pombos (Columba livia) por técnicas sorológicas, biológicas e moleculares. Doze pombos, livres de infecção, foram inoculados com 50 oocistos esporulados de T. gondii (amostra VEG), e quatro permaneceram como controles não infectados. Aos 15, 30, 45 e 60 dias pós-infecção (dpi), quatro aves (três infectadas e uma controle) foram sacrificadas e com seus tecidos realizou-se bioensaio em camundongos e nested-PCR, utilizando-se B1 como gene alvo. Sangue, para a pesquisa de anticorpos anti-T. gondii, foi obtido semanalmente, e a presença de anticorpos foi determinada pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI) e pela técnica de aglutinação modificada (MAT). Dos 12 pombos inoculados, sete (58,3 por cento) foram positivos pelas técnicas sorológicas, apresentando títulos que variaram de 40 a 5.120 no MAT e de 512 a 4.096 na RIFI. Concordância total foi observada entre os resultados obtidos pelas técnicas sorológicas e pela nested-PCR com sete animais positivos. No bioensaio em camundongos, dos 12 pombos inoculados, cinco (41,7 por cento) foram positivos ao T. gondii. Apenas um pombo veio a óbito no 23º dpi, devido à toxoplasmose. Um segundo estudo, com pombos de vida livre, foi realizado para a pesquisa de anticorpos anti-T. gondii. As aves foram capturadas nos municípios de São Paulo, Ibiúna e Sorocaba, Estado de São Paulo. Todos os 126 pombos de vida livre foram negativos a anticorpos anti-T. gondii, testados pelo MAT (título < 5). Foram realizados bioensaios em camundongos com tecidos de todas as aves capturadas e também, por esta técnica, T. gondii não foi isolado em nenhuma ave.

Prevalence of anti-Toxoplasma gondii and anti-Neospora caninum antibodies in swine from Northeastern Brazil / Prevalência de anticorpos anti-Toxoplasma gondii e anti-Neospora caninum em suínos do Nordeste do Brasil

A serologic survey was conducted among 130 swine slaughtered in the public slaughterhouse of the city of Patos, Paraíba State, Northeastern Brazil, to determine the prevalence of anti-Toxoplasma gondii and anti-Neospora caninum antibodies, and to verify possible associations between sex of the animals and antibody prevalence. The sera were analyzed by indirect antibody tests, considering 1:64 (T. gondii) and 1:50 (N. caninum) dilutions as cut-off points. The prevalence of anti-T. gondii antibodies was 36.2 percent (47/130) (95 percent CI = 27.9 - 45.0 percent) with reciprocal titers ranging from 64 to 2,048, and of anti-N. caninum antibodies was 3.1 percent (4/130) (95 percent CI = 0.8 - 7.7 percent) with reciprocal titers ranging from 50 to 6,400. Three of the four N. caninum-positive samples were also positive for T. gondii antibodies. All Neospora and Toxoplasma IFAT-positive animals were also positive for confirmatory immunoblotting techniques using total and purified N. caninum and T. gondii tachyzoite antigens, i.e., p38 (NcSRS2) and p30 (TgSAG1). There was no association between sex of animals and prevalence of anti-T. gondii and anti-N. caninum antibodies. This is the first indication of N. caninum natural infection in pigs from Brazil.

Foi conduzido um estudo sorológico em 130 suínos abatidos no matadouro público do município de Patos, Estado da Paraíba, Nordeste do Brasil, com o objetivo de determinar a prevalência de anticorpos anti-Toxoplasma gondii e anti-Neospora caninum, e verificar possíveis associações entre o sexo dos animais e a prevalência de anticorpos. Os soros foram analisados pelo testes de imunofluorescência indireta, considerando as diluições 1:64 (T. gondii) e 1:50 (N. caninum) como pontos de corte. A prevalência de anticorpos anti-T. gondii foi de 36,2 por cento (47/130) (IC 95 por cento = 27,9 - 45,0 por cento) com títulos variando de 64 a 2.048, e anti-N. caninum de 3,1 por cento (4/130) (IC 95 por cento = 0,8 - 7,7 por cento) com títulos variando de 50 a 6.400. Três das quatro amostras positivas para anticorpos anti-N. caninum também foram positivas para anticorpos anti-T. gondii. Todos os animais positivos na RIFI para Neospora e Toxoplasma também foram positivos nas técnicas confirmatórias de immunoblotting usando antígenos totais e purificados de taquizoítos de N. caninum e T. gondii, ou seja, p38 (NcSRS2) e p30 (TgSAG1). Não houve associação entre o sexo dos animais e a prevalência de anticorpos anti-T. gondii e anti-N. caninum. Essa é a primeira indicação de infecção natural por N. caninum em suínos do Brasil.

Toxoplasma gondii: diagnosis of experimental and natural infection in pigeons (Columba livia) by serological, biological and molecular techniques / Toxoplasma gondii: diagnóstico da infecção experimental e natural em pombos (Columba livia) por métodos sorológicos, biológicos e moleculares

This study aimed to diagnose experimental and natural Toxoplasma gondii infection in pigeons (Columba livia) by serological, biological and molecular techniques. Twelve pigeons, free of infection, were inoculated with 50 sporulated oocysts of T. gondii (VEG sample) and four remained uninfected controls. Four birds (three infected and one control) were euthanized at 15, 30, 45 and 60 days post-infection (dpi), and their tissues were used to perform a bioassay in mice and nested-PCR using B1 gene as target. Blood was obtained weekly and it was tested for the presence of anti-T. gondii antibodies by the indirect Fluorescent antibody test (IFAT) and modified agglutination test (MAT). Seven (58.3%) out of 12 inoculated pigeons were positive by serological techniques and titers ranged between 1:40 and 1:5120 by MAT and between 1:512 and 1:4096 by IFAT. Complete agreement was seen between the results obtained by serological techniques and nested-PCR in seven positive birds. In the bioassay in mice, ive (41.7%) out of 12 pigeons inoculated were positive to T. gondii. Only one pigeon died at 23 dpi due to toxoplasmosis. A second study with free-living pigeons was performed for detection of anti-T. gondii antibodies. Birds were captured in the municipalities of São Paulo, Ibiúna and Sorocaba, São Paulo State, Southeastern Brazil. All 126 free-living birds were negative to anti-T. gondii antibodies by MAT (titer < 1:5). Bioassays were performed in mice with tissues from all captured birds and T. gondii was not isolated in any pigeon.

O presente estudo teve por objetivo diagnosticar a infecção experimental e natural pelo Toxoplasma gondii em pombos (Columba livia) por técnicas sorológicas, biológicas e moleculares. Doze pombos, livres de infecção, foram inoculados com 50 oocistos esporulados de T. gondii (amostra VEG), e quatro permaneceram como controles não infectados. Aos 15, 30, 45 e 60 dias pós-infecção (dpi), quatro aves (três infectadas e uma controle) foram sacrificadas e com seus tecidos realizou-se bioensaio em camundongos e nested-PCR, utilizando-se B1 como gene alvo. Sangue, para a pesquisa de anticorpos anti-T. gondii, foi obtido semanalmente, e a presença de anticorpos foi determinada pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI) e pela técnica de aglutinação modificada (MAT). Dos 12 pombos inoculados, sete (58,3%) foram positivos pelas técnicas sorológicas, apresentando títulos que variaram de 40 a 5.120 no MAT e de 512 a 4.096 na RIFI. Concordância total foi observada entre os resultados obtidos pelas técnicas sorológicas e pela nested-PCR com sete animais positivos. No bioensaio em camundongos, dos 12 pombos inoculados, cinco (41,7%) foram positivos ao T. gondii. Apenas um pombo veio a óbito no 23° dpi, devido à toxoplasmose. Um segundo estudo, com pombos de vida livre, foi realizado para a pesquisa de anticorpos anti-T. gondii. As aves foram capturadas nos municípios de São Paulo, Ibiúna e Sorocaba, Estado de São Paulo. Todos os 126 pombos de vida livre foram negativos a anticorpos anti-T. gondii, testados pelo MAT (título < 5). Foram realizados bioensaios em camundongos com tecidos de todas as aves capturadas e também, por esta técnica, T. gondii não foi isolado em nenhuma ave.

Heartworm (Dirofilaria immitis) disease in a Brazilian oncilla (Leopardus tigrinus) / Doença do Verme do Coração (Dirofilaria immitis) em gato-do-mato-pequeno (Leopardus tigrinus) no Brasil

Heartworm disease is caused by the intravascular nematode Dirofilaria immitis, a pathogen of public health importance usually associated to domestic dogs and cats, and to a lesser extend to other mammal species. The oncilla (Leopardus tigrinus) is a threatened neotropic felid species that naturally occurs in Brazil. Here, we report the encounter of adult and larval stages of heartworms in a female specimen of L. tigrinus, probable of free-ranging origin, from Ubatuba, São Paulo, Brazil, which died showing clinical signals compatible with heartworm disease. This was the first reported case of D. immitis infection and associated disease in L. tigrinus, also suggesting that the oncilla acted as a definitive host for this parasite. The present findings confirmed D. immitis as a pathogenic agent for this felid species, thus supporting the recommendation for the inclusion of diagnostic testing for this pathogen in routine health screening procedures for captive and free-ranging oncillas in Brazil, especially in those localities where climate conditions support the occurrence of the parasite. Potential reservoirs as oncillas are established beyond the reach of veterinary care, thus representing a continuing risk for domestic animals and humans acquiring heartworm infection. We encourage further serologic and molecular studies aiming to establish D. immitis prevalences in L. tigrinus and other wild carnivores in the region of Ubatuba, as well as ecological and veterinary studies to access the role of this pathogen for the survival of this threatened felid species.

A doença do verme do coração é causada pelo nematódeo intravascular Dirofilaria immitis, um patógeno de importância em Saúde Pública geralmente associado a cães e gatos domésticos e, em menor extensão, a outras espécies de mamíferos. O gato-do-mato-pequeno (Leopardus tigrinus) é uma espécie ameaçada de felídeo neotropical que ocorre naturalmente no Brasil. Aqui relatamos o encontro de estágios adultos e larvais de vermes do coração em uma fêmea de L. tigrinus, provavelmente de vida livre e originária de Ubatuba, São Paulo, Brasil, que veio a óbito demonstrando sinais clínicos compatíveis desta doença. Este é o primeiro caso relatado de infecção e doença associada com D. immitis em L. tigrinus, sugerindo também que o gato-do-mato-pequeno agiu como hospedeiro definitivo para este parasita. Estes achados confirmaram que D. immitis é um agente patogênico para esta espécie de felino, sugerindo a recomendação para a inclusão de testes diagnósticos para este patógeno em procedimentos rotineiros de avaliação da saúde para gatos-do-mato-pequenos mantidos em cativeiro e de vida livre no Brasil, especialmente em localidades onde as condições climáticas permitam a ocorrência do parasita. Os gatos-do-mato-pequenos são potenciais reservatórios da D. immitis, mas vivem fora do alcance veterinário, representando desta forma um risco contínuo para animais domésticos e humanos. Encorajamos a realização de outros estudos epidemiológicos a fim de estabelecer as prevalências de infecção por D. immitis em L. tigrinus e outros carnívoros selvagens na região de Ubatuba, assim como estudos ecológicos e médicos veterinários para se acessar o papel deste patógeno para a sobrevivência desta espécie ameaçada de felídeo.