Efecto de iones amonio sobre la entrada de L-leucina en Saccharomyces cerevisiae: represíon e inhibicíon of transport systems / Effect of ammoniun ions on the uptake of L-leucine: repression and inhibition of transport systems

En Saccharomyces cerevisiae la entrada de L-leucina es mediada por la permeasa general de aminoácidos, GAP, y dos sistemas cinéticamente caracterizados, uno de alta afinidad y baja velocidad, S1, para concentraciones externas de L-leucina 0,05-01mM y otro de baja afinidad, alta velocidad, S2, para concentraciones externas 1.0mM. En células crecidas en medios suplementados con amonio, como única fuente de nitrógeno, los valores de entrada e incorporación son menores que en células crecidas en medios suplementados con L-prolina. En condiciones de represión de la GAP por iones amonio, la entrada de L-leucina es mediada por los sistemas S1 y S2. Los dos sistemas son parcialmente inhibidos por efecto de iones amonio. En condiciones de depresion de la GAP, por crecimiento en L-prolina, la entrada de L-leucina es mediada por los sistemas S1 y GAP, bajas concentraciones externas de L-leucina mediada por centraciones externas. El amonio inhibe en mayor extensión la entrada de L-leucina mediada por La GAP

Determinación del pH intracelular por distribución de ácido benzoico en S. cerevisiae, transporte de aminoácidos y gradiente de protones / Determination of internal pH of S. cerevisiae from the distribution of benzoic acid: amino acids transport and proton gradient

El (pHi) de Saccjaromyces cerevisiae, cepa silvestre y su mutante rhose determinó por el método de distribución intra-extracelilar del ácido 14C-benzoico. Los valores de pHi obtenidos (con un pH externo de 4,5) variarón con la depa de levadura y dependieron de las condiciones metabólicas de las mismas. En células de la cepa silvestre, energizada por incubación previa con glucosa 5 mM, el pHi osció entre 6,15-6,40 y el gradiente de protones a través de la membrana deltapH entre 1,65-1,90 ó -97 a -112 mV. Esos valores fueron mayores que los de células ayunadas: pHi 5,90, deltapH 1,40 ó -82 mV. En esas dos condiciones metabólicas, los valores en la mutante rho- fueron algo menores que en la cepa silvestre; levadura rho- energizada pHi 6,05, deltapH 1,55 ó -91 mV; levadura rho- ayunada pHi 5,70, deltapH 1,20 ó -71 mV. Los protonófros DNP y PCP produjeron una disminución del pHi del deltapH y una inhibición de la entrada de L-leucina por los sistemas S1, alta afinidad y baja velocidad y S2, baja afinidad y alta velocidad. Los valores de la disminución del deltapH y la inhibición del transporte de L-leucina obtenidos indican que no hay una relación estricta entre el deltapH y el proceso de transporte