Micropropagation of Brasilidium forbesii (Orchidaceae) through transverse and longitudinal thin cell layer culture / Micropropagação de Brasilidium forbesii (Orchidaceae) pela técnica 'thin cell layer' longitudinal e transversal

An efficient in vitro propagation method was established for Brasilidium forbesii (Hook.) Campacci using transverse and longitudinal thin cell layer (tTCL and lTCL, respectively) culture systems. Six-month-old protocorms from in vitro germinated seeds were used for this study. TCLs (1.0-mm thick) from protocorms were grown on Woody Plant Medium (WPM) supplemented with benzyladenine (BA) (0.5­4.0 µM).The lTCL technique was more efficient for inducing protocorm-like bodies (PLBs) and regenerating shoots than the tTCL technique. The frequency of PLB formation was influenced by BA concentration, and the lTCL explant grown on a medium containing 2.0 µM BA produced the highest percentage of new protocorms (77%) with a total of 22.7 PLBs per explant, after the first subculture on the same medium. Plantlet development was optimal on WPM medium containing 3.0 g L -1 activated charcoal, and indole-3 -butyric acid was not necessary for rooting. Regenerated plants were successfully acclimatized in a greenhouse after 16 weeks using vermiculite as the substrate (100% survival).

Foi estabelecido um método eficiente de propagação in vitro para Brasilidium forbesii (Hook.) Campacci utilizando a técnica 'thin cell layer' transversal (TCLt) e longitudinal (TCLl). Foram utilizados protocormos de seis meses obtidos da germinação in vitro. TCLs (1,0 mm de espessura) dos protocormos foram cultivados no meio 'Woody Plant Medium' (WPM), acrescido com benziladenina (BA) (0,5 a 4,0 µM). A técnica TCLl foi mais eficiente para indução de estruturas semelhantes a protocormos (ESPs) e regeneração de brotações do que a técnica TCLt. A frequência de formação de ESP foi influenciada pela concentração de BA e o explante TCLl, cultivado em um meio contendo 2,0 µM BA, produziu a mais alta percentagem de novos protocormos (77%), com um total de 22,7 PLBs por explante, após o primeiro subcultivo para o mesmo meio. O desenvolvimento das plântulas foi eficiente no meio WPM contendo 3,0 g L -1 de carvão ativado e o ácido indol-3- butírico (AIB) não foi necessário para o enraizamento. Plantas regeneradas foram estabelecidas com sucesso em casa de vegetação, utilizando vermiculita como substrato (100% de sobrevivência), após 16 semanas.

Meios de cultura na micropropagação do porta-enxerto de videira "VR043-43" (Vitis vinifera x Vitis rotundifolia) / Culture media in micropropagation of grapevine rootstock 'vr 043-43' (Vitis vinifera x Vitis rotundifolia)

A escolha adequada do meio de cultura é um fator relevante para a micropropagação, devido ao importante papel dos componentes minerais no processo de regeneração. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito dos meios de cultura MS/2, NN, WPM, QL e C2D, no cultivo inicial, a partir de segmentos nodais e em três subcultivos do porta-enxerto de videira "VR043-43". O delineamento experimental foi em blocos casualizados com quatro repetições. Os meios de cultura não tiveram efeito significativo sobre o número de brotações por explante no cultivo inicial e nos subcultivos. No primeiro subcultivo, os melhores resultados para o número de microestacas por explante inicial foram encontrados com os meios de cultura MS/2, QL e C2D, e, no segundo subcultivo, não houve diferenças estatísticas entre os tratamentos. A altura das brotações no cultivo inicial, no primeiro e no segundo subcultivos aumentou com o meio de cultura QL. No primeiro subcultivo, 83,3 por cento das brotações enraizaram no meio de cultura QL. Para o cultivo inicial do porta-enxerto de videira "VR043-43" in vitro, a partir de segmentos nodais e para a multiplicação das microestacas, o meio de cultura QL apresenta-se adequado para o desenvolvimento das brotações.

The right choice of the culture medium is an important factor for micropropagation mainly because of the mineral component role during the regeneration process. This research was aimed at evaluating the effect of the MS/2, NN, WPM, QL and C2D culture medium on the establishment of nodal segments and multiplication of grapevine rootstock 'VR043-43'. The data was analyzed according to a randomized complete block design with four replications. The culture medium had no significant effect on the number of shoots per explant in the initial culture and subcultures. For the first subculture, the best number of microcuttings per initial explant was obtained using the MS/2, QL and C2D culture medium. For the second subculture no statistical differences were observed between treatments. Shoot height in the initial, first and second subcultures increased with QL culture medium. For the first subculture, 83.3 percent of rooting was found on shoots growing in the QL culture medium. The best results of shoot development for the initial culture of the grapevine rootstock of 'VR043-43' in vitro using nodal segments and its microcuttings multiplication were obtained with the QL culture medium.