The role of apoptosis in cisplatin-induced ototoxicity in rats / Papel da apoptose na ototoxicidade por cisplatina em ratos

Cisplatin is a chemotherapy agent frequently used to treat different types of neoplasia. Ototoxicity is one of the side-effects which cause significant morbidity and limits its use. This study aimed at assessing the role of apoptosis in cisplatin-induced ototoxicity. DESIGN: experimental study. MATERIALS AND METHODS: male Wistar rats were treated with intraperitoneal cisplatin, in the doses of 24 and 16 mg/kg. The animals were assessed by means of distortion product evoked otoacoustic emissions (DPEOAE) or brainstem evoked auditory potentials (BEAP) in the third (D3) and fourth (D4) days after drug infusion onset. Following that, their cochleas were removed for immunohistochemical studies of apoptosis - TUNEL method. RESULTS: the group treated with 24 mg/kg showed a significant reduction in DPEOAE amplitude, and such fact was not seen with the 16 mg/kg. Both doses caused an increase in BEAP electrophysiological threshold in D3 and D4. Apoptosis was the injury mechanism responsible for the cisplatin-induced ototoxicity - 16 mg/kg dose, when the animals were assessed on D3. CONCLUSION: apoptosis may be involved in the cisplatin-induced ototoxicity, depending on the dose and time of injury assessment.

Cisplatina é um agente quimioterápico frequentemente usado para o tratamento de várias linhagens de neoplasias. A ototoxicidade é um dos efeitos colaterais causadores de significativa morbidade e que limita sua utilização. Este estudo teve por objetivo avaliar o papel da apoptose na ototoxicidade por cisplatina. DESENHO DO ESTUDO: Estudo experimental. MATERIAL E MÉTODO: Ratos Wistar machos foram tratados com cisplatina, via intraperitoneal, nas doses de 24 e 16 mg/kg. Os animais foram avaliados através de emissões otoacústicas evocadas produtos de distorção (EOAPD) ou potenciais auditivos evocados de tronco encefálico (PAETE) no terceiro (D3) e quarto (D4) dias após o início da infusão das drogas. Em seguida suas cócleas foram removidas para estudo de imunoistoquímica para apoptose, método TUNEL. RESULTADOS: O grupo tratado com 24 mg/kg mostrou diminuição significativa da amplitude das EOAPD, fato não observado com a dose de 16 mg/kg. Ambas as doses promoveram aumento do limiar eletrofisiológico pelo PAETE no D3 e D4. A apoptose foi o mecanismo de lesão responsável pela ototoxicidade da cisplatina, dose de 16 mg/kg, quando os animais foram avaliados no D3. CONCLUSÃO: Apoptose pode estar envolvida no mecanismo de ototoxicidade pela cisplatina, na dependência da dose e tempo de avaliação da lesão.

Distortion-product otoacoustic emissions and auditory brainstem responses sensitivity assessment in cisplatin-induced ototoxicity in rats / Avaliação da sensibilidade das emissões otoacústicas produtos de distorção e dos potenciais auditivos evocados de tronco encefálico na ototoxicidade por cisplatina em ratos

Cisplatin (cis-diamminedicloroplatinum) is an antineoplastic drug used in the treatment of a variety of cancers, especially head-and-neck cancer. Its ototoxicity, however, has been noted as a common side-effect which limits its use and causes significant morbidity. AIM: to assess distortion-product otoacoustic emissions (DPOAE) and brainstem evoked response audiometry (BERA) sensitivity to detect secondary ototoxicity caused by different doses and means of administration of cisplatin in rats. STUDY DESIGN: Experimental. MATERIAL AND METHODS: Male Wistar rats were intraperitoneally (i.p.) injected with 24 mg/kg cisplatin, divided into three equal doses (8mg/kg) or a single i.p. injection of 16 mg/kg. The animals were evaluated by distortion product otoacoustic emission (DPOAE) or brainstem evoked response audiometry (BERA) on the 3rd and 4th days after the cisplatin injection. RESULTS: Treatment with cisplatin 24 mg/kg resulted in significant DPOAE decrease and it raised the BERA electrophysiological threshold. The 16mg/kg dose could not significantly reduce the DPOAE amplitude, but it raised the animals' hearing thresholds - detected by the BERA. CONCLUSION: In rats, BERA was more sensitivity than DPOAE at detecting cisplatin-induced ototoxicity in rats considering different doses and means of administration.

Cisplatina (cisdiaminodicloroplatinum) é um agente quimioterápico usado para o tratamento de várias linhagens de neoplasias, mormente as de cabeça e pescoço. Sua ototoxicidade permanece sendo um dos efeitos colaterais causadores de significativa morbidade e limita sua utilização. OBJETIVO: Avaliar a sensibilidade das emissões otoacústicas evocadas produtos de distorção (EOAPD) e potenciais auditivos evocados de tronco encefálico (PAETE) na detecção da ototoxicidade secundária a diferentes doses e formas de administração de cisplatina em ratos. FORMA DE ESTUDO: Experimental. MATERIAL E MÉTODO: Ratos Wistar machos, administrou-se cisplatina por via intraperitoneal (IP) nas doses de 24 mg/kg, fracionada em três doses diárias ou 16 mg/kg em infusão única. Avaliaram-se os animais através de EOAPD ou PAETE no terceiro (D3) e quarto (D4) dias após o início da infusão das drogas. RESULTADOS: O grupo tratado com 24 mg/kg mostrou diminuição significativa da amplitude das EOAPD e aumento do limiar eletrofisiológico pelo PAETE. A dose de 16 mg/kg não foi capaz de promover redução significativa da amplitude das EOAPD, mas elevou o limiar auditivo dos animais, detectado através de PAETE. CONCLUSÃO: Em ratos, os PAETE foram mais sensíveis que as OEAPD na detecção da ototoxicidade por cisplatina para diferentes doses e formas de administração.

Experimental rat lung tumor model with intrabronchial tumor cell implantation

PURPOSE: The objective of this study was to develop a rat lung tumor model for anticancer drug testing. METHODS: Sixty-two female Wistar rats weighing 208 ± 20 g were anesthetized intraperitoneally with 2.5 percent tribromoethanol (1 ml/100 g live weight), tracheotomized and intubated with an ultrafine catheter for inoculation with Walker's tumor cells. In the first step of the experiment, a technique was established for intrabronchial implantation of 10(5) to 5×10(5) tumor cells, and the tumor take rate was determined. The second stage consisted of determining tumor volume, correlating findings from high-resolution computed tomography (HRCT) with findings from necropsia and determining time of survival. RESULTS: The tumor take rate was 94.7 percent for implants with 4×10(5) tumor cells, HRCT and necropsia findings matched closely (r=0.953; p<0.0001), the median time of survival was 11 days, and surgical mortality was 4.8 percent. CONCLUSION: The present rat lung tumor model was shown to be feasible: the take rate was high, surgical mortality was negligible and the procedure was simple to perform and easily reproduced. HRCT was found to be a highly accurate tool for tumor diagnosis, localization and measurement and may be recommended for monitoring tumor growth in this model.

OBJETIVO: O objetivo foi desenvolver um modelo de tumor de pulmão em rato que permita o teste de fármacos no tratamento deste câncer. MÉTODOS: Sessenta e dois ratos Wistar fêmeas, peso médio de 208±20 g, foram anestesiados com tribromo-etanol 2,5 por cento IP (1ml/100g de rato), traqueostomizados e intubados com cateter ultrafino para injetar células do tumor de Walker. Na 1ª etapa, estabeleceu-se a técnica do implante de células tumorais por via intrabrônquica e o índice de pega tumoral, usando-se de 10(5) a 5×10(5) células. Na 2ª, avaliou-se o volume tumoral e a correlação dos achados obtidos na tomografia computadorizada de alta resolução (TCAR) de tórax com os da necropsia e verificou-se a sobrevida. RESULTADOS: O índice de pega foi de 94,7, com o implante de 4×10(5) células do tumor; as medidas do tumor feitas na TCAR e comparadas com as da necropsia foram semelhantes (r=0, 953, p<0,0001); a sobrevida mediana foi de 11 dias; e a mortalidade cirúrgica de 4,8 por cento. CONCLUSÃO: O modelo mostrou-se viável, com alto índice de pega, mortalidade cirúrgica desprezível, de execução simples e fácil reprodutibilidade. A TCAR revelou alta acurácia no diagnóstico, localização e mensuração das lesões tumorais, credenciando-se para a monitorização de crescimento tumoral nesse modelo.

Principais mediadores inflamatórios envolvidos na fisiopatologia da periodontite: papel de moduladores farmacológicos / Main inflammatory mediators involved in the physiopathology of periodontitis: role of pharmacological modulators

A periodontite é uma doença inflamatória caracterizada por infiltrado leucocitário, perda de tecidos de sustentação, reabsorção do osso alveolar e formação de bolsas periodontais. A gravidade da doença está associada com os mecanismos de resposta do hospedeiro a fatores microbianos uma vez que componentes dessas bactérias são capazes de ativar as células de defesa do hospedeiro determinando a liberação de mediadores que estimulam o dano tecidual. Esses mediadores incluem uma variedade de moléculas tais como citocinas, especialmente IL-1β e TNF-α; prostaglandinas, como PGE2; enzimas hidrolíticas, como as metaloproteinase de matriz (MMP) e o óxido nítrico (NO), um mediador importante que determina eventos de sinalização extra e intracelular, produzindo dentre outros efeitos biológicos, relaxamento da musculatura lisa, com a conseqüente vasodilatação e broncodilatação. Além disso, o NO atua em eventos inflamatórios afetando o metabolismo ósseo. Em conjunto, esses mediadores são responsáveis pela extensão e gravidade da doença. O objetivo dessa revisão foi discutir os principais mediadores inflamatórios envolvidos na patogênese da doença periodontal e o papel de moduladores farmacológicos nesse processo, na perspectiva de contribuir para a compreensão dos fenômenos associados com a lise óssea e a busca de tratamentos que possam alterar o curso evolutivo da doença periodontal.

Periodontitis is an inflammatory disease characterized by leukocyte infiltration, connective tissue loss, alveolar boneresorption and periodontal pocket formation. The disease severity is associated with host resistance to microbial factors since bacteria have the capacity to activate host defense cells, which in turn produce and release mediators that stimulate connective tissue breakdown. These mediators are a wide array of molecules including cytokines, especially IL-1β and TNF-α; prostaglandins, such as PGE2; hydrolytic enzymes, such matrix metalloproteinases (MMP) and nitric oxide (NO), a key mediator which elicits both extra and intracellular signaling events, producing among other effects relaxation of smooth musculature, causing vase and broncodilation asbiological action. Furthermore, NO is considered to act during inflammatory process affecting bone metabolism. Together, those mediators determine the extent and duration of degradative activity. The objective of this review was to discuss the main inflammatory mediators involved in periodontitis pathogenesis and the role of pharmacological modulators in severity disease making an effort to understand the mechanism involved in bone destruction highlighting treatments that may change the periodontal disease severity.

Efeito de inibidores da sintase de óxido nítrico na dor inflamatória e influxo celular da artrite induzida por zymosan em ratos / Effect of nitric oxide synthse in articular inflammatory pain and cellular influx of zymosan-induced arthritis in rats

Objetivo: Investigar o papel do óxido nítrico (NO) no influxo celular (IC) e a incapacitação articular (IA) na artrite por zymosan (AZy). Métodos: Ratos Wistar receberam injeção de Zy (1mg) no joelho direito. Grupos-controles receberam salina. A IA foi avaliada pelo Teste de incapacitação articular para ratos. Após sacrifício, o IC e a liberação de PGE2 foram avaliados no lavado articular. Avaliou-se o edema pela diferença peso úmido/peso seco do tecido articular. Grupos foram tratados i.p. com L-NAME - inibidor de sintases de NO (NOS) (LN=30-300mg/kg) ou aminoguanidina (AG=30-30mg/kg) - inibidor seletivo de iNOS - 30 min antes ou 2 h após o Zy. Resultados: O pré-tratamento com L-NAME ou AG inibiu de forma dose-dependente a IA e o IC, mas não o edema ou a liberação de PGE2, sendo máximo para LN ou AG (100mg/kg). L-arginina (1g/kg) co-injetada com LN (100mg/kg) reverteu a inibição da IA e do IC. D-NAME (100mg/kg) não teve efeito. Co-injeção de naloxona (antagonista opióide) reverteu o efeito de LN e AG sobre a IA. A pressão arterial média elevou-se (p<0,01) após LN (100mg/kg), mas não com AG (100mg/kg). LN e AG (100mg/kg) dados 2 h após Zy não tiveram efeito. Azul de metileno (inibidor de GMPc), e não hemoglobina (scavenger de NO), reduziu IA e IC (p<0,01). Nitroprussiato de sódio (doador de NO) dado 2h após ZY, reduziu a IA, mas não o IC (p<0,01). Conclusões: A antinocicepção na AZy por inibição da iNOS só ocorre como pré-tratamento, por efeito antiinflamatório via GMPc, independentemente de NO exógeno ou de PGE2, associada à liberação de opióides endógenos. Um doador de NO produz analgesia de AZy. Enfim, o trabalho demonstra efeito analgésico de um doador de NO em um modelo de periartrite, abrindo a perspectiva do uso dessas substâncias em humanos

Óxido nítrico: biossíntese, metabolismo e funções / Nitric oxide: biosynthesis, metabolism and functions

Introdução: O óxido nítrico(NO) é uma molécula sintetizada a partir da L-arginina sob a ação da óxido nítrico sintase e, devido a sua ampla distribuição e participação em vários fenômenos fisiopatológicos, há um crescente interesse no seu estudo. Este trabalho busca discutir aspectos relacionados à biossíntese do NO e a sua importância nestes fenômenos. Método: foram discutidos dados atualizados obtidos a partir de pesquisa na rede mundial de computadores através do sistema Medline.Ações: o NO desempenha múltiplas funções biológicas particularmente no controle da pressão arterial, nos mecanismos envolvidos na comunicação celular, tanto a nível central quanto periférico, na resposta inflamatória e nos mecanismos de defesa. Considerações finais: os dados demonstram a importância do NO como mediador endógeno em vários eventos e apontam para algumas respostas dúbias cujo estudo e explicação ampliarão os conhecimentos sobre mecanismos fisiopatológicos nos quais há o envolvimentodo NO e ajudará na descoberta de novas alternativas terapêuticas

Modelo de tumor de pulmäo em rato com o carcinossarcoma de Walker / Lung tumor model in rat with Walker's carcinosarcoma

OBJETIVO: Desenvolver um modelo de tumor pulmonar em ratos com o carcinossarcoma de Walker e verificar in vivo a presença de tumor por meio de tomografia computadorizada (TC). MÉTODOS: Ratos Wistar fêmeas (n=47) foram anestesiados com pentobarbital, intubados por traqueostomia e submetidos a toracotomia para injeçäo no parênquima pulmonar de células do tumor de Walker ou do veículo das mesmas. O estudo consistiu de duas etapas: na primeira desenvolveu-se a técnica de implante do tumor e estabeleceu-se o número de células necessário para um bom índice de pega tumoral. Na segunda etapa, determinou-se o volume do tumor em cm3 (Dxd2/2) através de TC e necropsia (6º dia do implante), e analizou-se a sobrevida dos animais. RESULTADOS: O índice de pega do tumor foi 93,3 por cento, sendo 81,8 por cento na primeira etapa e 100 por cento na segunda. A mortalidade cirúrgica foi 17,0 por cento. As medidas dos tumores foram semelhantes (0,099 vs. 0,111 cm3) na tomografia e na necropsia, respectivamente (r=0,993; p<0,0001) e a sobrevida mediana foi 10 dias. CONCLUSAO: O alto índice de pega e a boa correlaçäo dos dados de tomografia com os de necropsia permitem, por meio deste modelo, o monitoramento tomográfico do crescimento tumoral e, portanto, a avaliaçäo da açäo in vivo de drogas anti-tumorais, além da análise de sobrevida sem a necessidade do sacrifício dos animais.

Periartrite promove incapacitação articular na artrite induzida por zimosan em ratos / Periarthritis promotes articular incapacitation in zymosan-induced arthritis in rats

Objetivo: Estudar a contribuição de periartrite e sinovite na incapacitação articular (IA) da artrite induzida por Zimosan (ZY). Métodos: Sessenta e seis ratosWistar foram submetidos à injeção de ZY (Img) no joelho direito. Um grupo de animais (GI) teve a injeção de ZY através da pele intacta. Um segundo grupo (GII) recebeu a injeção de ZY diretametne dentro da cavidade articular, após excisão da pele e tecido subcutâneo subjacente ao joelho. A IA foi avaliada usando o teste de IA para ratos. O aumento de permeabilidade vascular e o influxo celular foram avaliados no líquido articular. Resultados: A injeção de ZY induziu IA dose-dependente, que foi máxima entre a terceira/quarta hora de artrite, sendo significantemente maior nos animais do GI, enquanto o influxo celular (neutrófilos maior ou igual a 80 por cento) foi máximo na sexta hora. O influxo celular e o aumento da permeabilidade vascular não diferiram entre ambos os grupos. Um terceiro grupo (GIII), submetido a artrite por imunocomplexos, que recebeu anticorpos anti-soroalbumina bovina (BSA) intra-articular e BSA i.v., não apresentou IA, apesar de exibir aumento no influxo celular. Conclusões: Aumento de permeabilidade vascular e influxo celular são fenômenos independentes da IA. Neutrófilos não parecem contribuir para o desenvolvimento da IA na artrite por Zy. A sensibilização de nociceptores específicos periarticulares é responsável pela IA na artrite induzida por Zy