RESUMEN
Damage to cartilage causes a loss of type II collagen (Col-II) and glycosaminoglycans (GAG). To restore the original cartilage architecture, cell factors that stimulate Col-II and GAG production are needed. Insulin-like growth factor I (IGF-I) and transcription factor SOX9are essential for the synthesis of cartilage matrix, chondrocyte proliferation, and phenotype maintenance. We evaluated the combined effect of IGF-I and SOX9 transgene expression on Col-II and GAG production by cultured human articular chondrocytes. Transient transfection and cotransfection were performed using two mammalian expression plasmids (pCMV-SPORT6), one for each transgene. At day 9 post-transfection, the chondrocytes that were over-expressing IGF-I/SOX9 showed 2-fold increased mRNA expression of the Col-II gene, as well as a 57% increase in Col-II protein, whereas type I collagen expression (Col-I) was decreased by 59.3% compared with controls. The production of GAG by these cells increased significantly compared with the controls at day 9 (3.3- vs 1.8-times, an increase of almost 83%). Thus, IGF-I/SOX9 cotransfected chondrocytes may be useful for cell-based articular cartilage therapies.
Asunto(s)
Humanos , Condrocitos/metabolismo , Colágeno Tipo II/biosíntesis , Glicosaminoglicanos/biosíntesis , Factor I del Crecimiento Similar a la Insulina/metabolismo , Proteínas Matrilinas/biosíntesis , Factor de Transcripción SOX9/metabolismo , Transfección/métodos , Cartílago Articular/lesiones , Cartílago Articular/metabolismo , Colágeno Tipo II/análisis , Matriz Extracelular/química , Expresión Génica , Glicosaminoglicanos/análisis , Factor I del Crecimiento Similar a la Insulina/genética , Proteínas Matrilinas/genética , Cultivo Primario de Células , Reacción en Cadena en Tiempo Real de la Polimerasa , ARN Mensajero/metabolismo , Factor de Transcripción SOX9/genética , EspectrofotometríaRESUMEN
Como la actividad citolitica de E. histolytica podria contribuir a la produccion de las lesioes necroticas de la amibiasis, los autores desarrollaron un modelo experimental para identificar la actividad citolitica de extractos libres de trofozoitos sobre celulas de ovarios de jamster chino premarcadas con (3 H) UTP.El porcentaje de citolisis producido por los extractos amibianos dependio de la dosis y del tiempo de incubacion. Esta actividad podria estar relacionada con la cistolisis mediada por el contacto de los trofozoitos con las celulas blancos y formar parte del mecanismo patogeno de E. histolytica