Frequency of anti-Toxocara antibodies in broiler chickens in southern Brazil / Frequência de anticorpos anti-Toxocara em frangos de corte no Sul do Brasil

Abstract The aim of this study was to evaluate the presence of anti-Toxocara antibodies in naturally infected broiler chickens (n = 189) from the state of Paraná, southern Brazil. The chickens were reared in a semi-intensive system by small family farmers (n = 7). An enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was performed to detect the presence of anti- Toxocara spp. IgY after serum adsorption with Ascaridia galli antigens. An overall seroprevalence of 67.7% (128/189; 95% CI = 61.1-74.4) was observed. The frequency of positive animals by farm ranged from 29.6% to 100%. The optical density and reactivity index values observed in ELISA test indicated the possible chronicity of infection of the evaluated chickens. Associations between the presence of antibodies and the area where the chickens were reared (p = 0.382) or the population density of dogs on the farm (p = 0.785) were not observed. This study shows a high prevalence of Toxocara spp. antibodies in broiler chickens reared in semi-intensive systems and provides evidence that chickens are a good indicator of environmental contamination by larva migrans agents. Further studies are necessary to assess the risk factors associated with poultry infection and the likelihood of toxocariasis transmission to humans via the ingestion of free-range chicken meat.

Resumo A finalidade do presente estudo foi avaliar a presença de anticorpos anti- Toxocara, em frangos de corte naturalmente infectados (n = 189), no Norte do Paraná, Sul do Brasil. Os frangos foram criados em sistema semi-intensivo, em pequenas propriedades rurais (n = 7). Os testes sorológicos foram realizados pela técnica de ELISA, para detecção de anticorpos IgY (IgG), com pré-adsorção do soro com antígenos de Ascaridia galli. Foi observada uma prevalência de 67,7% (128/189; IC 95% = 61,1-74,4). A frequência de animais soropositivos por propriedade variou de 29,6% a 100%. Os valores da Densidade Ótica e do Índice de Reatividade observados no teste de ELISA indicaram uma possível cronicidade de infecção dos frangos avaliados. Não foi observada correlação entre a positividade dos animais, quando comparada a área (p = 0,382) e a densidade populacional de cães por propriedade (p = 0,785). O presente estudo verificou uma alta prevalência de anticorpos anti-Toxocara em frangos de corte criados em sistema semi-intensivo e oferece dados que apontam esses animais como bons indicadores de contaminação ambiental por agentes de larva migrans . Estudos futuros são necessários para avaliar os fatores de risco associados e a possibilidade da transmissão de toxocaríase ao ser humano pela ingestão de carne de frango.

Kinetics and avidity of anti-Toxocara antibodies (IgG) in rabbits experimentally infected with Toxocara canis / Cinética e avidez de anticorpos (IgG) anti-Toxocara em coelhos experimentalmente infectados com Toxocara canis

Abstract An evaluation was made of the kinetics and avidity of anti-Toxocara antibodies (IgG) in rabbits experimentally infected with embryonated Toxocara canis eggs. Seventeen four month old New Zealand White rabbits were distributed into two groups. In the experimental group, twelve rabbits were infected orally with 1,000 embryonated T. canis eggs. A second group (n = 5), uninfected, was used as a control. Serum samples were collected for analysis on days 7, 14, 21, 28 and 60 post-infection (DPI). An indirect ELISA test was performed to evaluate the reactivity index (RI) of IgG anti-T. canis antibodies and to calculate the avidity index (AI). The animals showed seroconversion from the 14th DPI, with high AI (over 50%) except for one animal, which presented an intermediate AI. At 60 DPI, all the animals were seropositive and maintained a high AI. The data indicated that specific IgG antibodies formed early (14 DPI) in rabbits infected with T. canis, with a high avidity index that persisted throughout the course of the infection.

Resumo O objetivo deste estudo foi o de avaliar a cinética e a avidez de anticorpos anti-Toxocara canis, em coelhas infectadas experimentalmente com ovos embrionados de Toxocara canis. Foram utilizados 17 coelhos New Zealand de linhagem branca, com quatro meses de idade, distribuídos em dois grupos. No grupo experimental, doze coelhas foram infectadas, oralmente, com 1.000 ovos larvados de T. canis. Um segundo grupo (n=5), não infectado, foi utilizado como controle. Nos dias 7, 14, 21, 28 e 60 pós-infecção (DPI), foram coletadas amostras de soro para análise. O teste de ELISA indireto foi realizado para avaliar o índice de reatividade (IR) de anticorpos IgG anti-T. canis e para cálculo do índice de avidez (IA). A soroconversão nos animais ocorreu a partir do140 DPI, com verificação de alto IA (superior a 50%), com exceção de um animal, que apresentou médio IA. Aos 60 DPI, todos os animais foram soropositivos e mantiveram alto IA. Os dados mostram que em coelhos infectados por T. canis, anticorpos IgG específicos formam-se precocemente (14 DPI), apresentando alto índice de avidez e que se mantém durante o curso da infecção.

Contaminação de solo por ovos de Toxocara spp. e outros geo-helmintos em comunidade rural do Pantanal Mato-Grossense, Brasil / Soil contamination by Toxocara spp. eggs and other geohelminths in a rural community from the Pantanal Mato-Grossense area, Brazil

A investigação da contaminação do solo por enteroparasitos já foi efetuada em várias regiões do Brasil, principalmen- te em locais que podem apresentar riscos à saúde humana, como creches e praças públicas. No presente trabalho, foi relatada a contaminação do solo por ovos de Toxocara spp., Ascaris spp., tricostrongilídeos e oocistos de protozoários em uma comunidade rural localizada no Pantanal Mato-Grossense. Os resultados do presente estudo ressaltam o risco a que podem estar expostos os moradores de comunidades em condições precárias de habitação e saneamento com relação à infecção por parasitas.

Studies concerning soil contamination by enteroparasites have been carried out in different regions of Brazil, particularly in areas that may represent risks to human health, such as daycare playgrounds and public parks. In this study, contamination of soil by eggs of Toxocara spp., Ascaris spp., trichostrongylids as well as by oocysts of protozoa was reported in a rural community located close to the Pantanal Mato-Grossense, Brazil. The results highlight the risk of people living in communities with precarious sanitary conditions in relation to parasitic infection.

Austrodiplostomum compactum (Lutz, 1928) (Digenea, Diplostomidae) in the eyes of fishes from Paraná river, Brazil / Austrodiplostomum compactum (Lutz, 1928) (Digenea, Diplostomidae) em olhos de peixes do rio Paraná, Brasil

Parasitological indexes of Austrodiplostomum compactum (Digenea, Diplostomidae) in fishes from the Paraná River, Presidente Epitácio region, state of São Paulo, Brazil, and their relationship with climate and water quality are evaluated. Fifty-one specimens of Plagioscion squamosissimus, 39 Geophagus surinamensis, 27 Hoplias malabaricus and 23 Cichla sp. were collected between June 2007 and June 2008. Water quality and rainfall indexes were measured monthly. P. squamosissimus had the highest parasite rate, with 98% total prevalence, intensity of infection varying between 1 and 255 and parasite mean abundance totaling 40.5 ± 9.9. H. malabaricus had the next parasite rate, with 66.6% total prevalence, parasite intensity between 2 and 184 and mean abundance totaling 22.4 ± 20.9. Cichla sp. had a total prevalence of 52.1%, intensity between 1 and 21, and mean abundance 4.3 ± 2.9. Finally, G. surinamensis had a total prevalence of 46.1%, intensity between 1 and 53 and mean abundance 7.1 ±8.8. A survey of diplostomid infection in Brazil and the role of piscivore fish as an important host have also been discussed.

Este estudo avaliou os índices parasitológicos de Austrodiplostomum compactum (Digenea, Diplostomidae) em peixes do rio Paraná, região de Presidente Epitácio, Estado de São Paulo, Brasil e sua relação com o clima e qualidade da água. Cinquenta e um espécimes de Plagioscion squamosissimus, 39 Geophagus surinamensis, 27 Hoplias malabaricus e 23 Cichla sp. foram coletados de junho de 2007 a junho de 2008. Qualidade da água e pluviosidade foram medidas mensalmente. O peixe mais parasitado foi P. squamosissimus com 98% de prevalência total, intensidade de infecção variando de 1 a 255 e abundância média de 40,5 ± 9,9. O segundo peixe mais parasitado foi H. malabaricus com 66,6% de prevalência total, intensidade de 2 a 184 e abundância média de 22,4 ± 20,9. Cichla sp. apresentou 52,1% de prevalência, intensidade de 1 a 21 e abundância média de 4,3 ± 2,9. Finalmente, G. surinamensis apresentou 46,1% de prevalência, intensidade de 1 a 53 e abundância média de 7,1 ± 8,8. Um levantamento de infecções por diplostomídeos no Brasil e o papel de peixes piscívoros como importantes hospedeiros é também discutido.

Cardiac markers: profile in rats experimentally infected with Toxocara canis / Marcadores cardíacos: perfil em ratos infectados experimentalmente com Toxocara canis

The aim of this study was to evaluate the profile of the enzymes creatine kinase (CK), creatine kinase MB (CK-MB) and lactate dehydrogenase (LDH) in Wistar rats infected with 250 (GI, n = 24) or 1000 (GII, n = 24) Toxocara canis eggs. Animals were evaluated on days 7, 15, 30, 60, 120 and 180 post-infection (DPI). Only the GI rats showed an increase in CK and CK-MB, at 15 and 30 DPI, respectively. Anti-Toxocara spp. antibodies were detected by ELISA in infected animals. Despite of the presence of eosinophilic infiltrate in the heart of three infected animals, none larva was recovered from the organ neither by acid digestion nor by Baermann procedure. Eosinophilia was observed in both groups but there was no significant difference in the eosinophil counts between GI and GII (p = 0.2239). It is possible to consider that cardiac lesion is an eventual finding in murine model for toxocariasis

O objetivo do presente estudo foi avaliar o perfil das enzimas creatinoquinase (CK), creatinoquinase-MB (CK-MB) e lactato desidrogenase (LDH) em ratos Wistar infectados com 250 (GI, n = 24) ou 1000 (GII, n = 24) ovos de Toxocara canis. Os animais foram avaliados nos dias 7, 15, 30, 60, 120 e 180 pós-infecção (DPI). Observou-se que apenas os animais do GI apresentaram aumento da atividade de CK e CK-MB aos 15 e 30 DPI, respectivamente. Anticorpos anti-T. canis foram detectados por ELISA nos animais infectados. Apesar da presença de infiltrado eosinofílico em três animais infectados, nenhuma larva foi recuperada do coração pela digestão ácida ou pela técnica de Baermann. Eosinofilia foi observada em todos os momentos em GI e GII, sem diferença significativa entre os grupos (p = 0,2239). Pode-se considerar que as lesões cardíacas foram um achado eventual no modelo murino para toxocaríase.

Contamination of public parks in Presidente Prudente (São Paulo, Brazil) by Toxocara spp. eggs / Contaminação de praças públicas de Presidente Prudente, São Paulo, Brasil, por ovos de Toxocara spp

This study aims to evaluate soil contamination by Toxocara spp. eggs in public parks in Presidente Prudente, São Paulo, Brazil. Soil samples (500 g) were collected every month over a 12-month period, from 25 parks in different parts of the city (northern, southern, eastern, western and central areas). Two 10-g aliquots of the material collected from each park were subjected to the centrifuge-flotation method to recover Toxocara spp. eggs. Twenty-four out of the 25 squares studied (96.0%) were contaminated and the number of eggs recovered ranged from 1 to 398 per sample. Eggs were recovered all over the year. Despite the number being greater in autumn (p < 0.001), there was no correlation between number egg number and average monthly temperature (r = -0.492; p = 0.148) or between egg number and monthly rainfall (r = -0.299; p = 0.402). Park localization does not influence egg presence (p = 0.7116). Because of the high level of contamination of the parks by Toxocara spp. eggs, prevention of contamination of public areas by larva migrans agents is indicated.

O objetivo do estudo foi avaliar a contaminação do solo de praças públicas por ovos de Toxocara spp. em Presidente Prudente, São Paulo. Amostras de solo (500 g) foram coletadas mensalmente, durante um período de 12 meses, de 25 praças de cinco diferentes setores da cidade (norte, sul, leste, oeste e central). Duas alíquotas de 10 g do material coletado foram submetidas ao método de centrífugo-flutuação (sulfato de zinco; d = 1.200 g/cm3), para recuperação dos ovos. Das 25 praças estudadas, 24 (96,0%) estavam contaminadas e o número variou de 1 a 398 ovos por amostra analisada. A recuperação foi verificada durante todos os meses do ano, sendo maior no outono (p < 0,001). Entretanto, não houve correlação entre o número de ovos e a temperatura média (r = -0,492; p = 0,148) e a precipitação pluviométrica (r = -0,299; p = 0,402) mensal. Não houve influência da localização dos parques sobre a quantidade de ovos (p = 0,7116). Devido ao alto nível de contaminação de parques públicos por ovos de Toxocara spp., a prevenção da contaminação de áreas públicas pelos agentes de larva migrans é indicada.

Protective and risk factors for toxocariasis in children from two different social classes of Brazil / Fatores de risco e protetores para toxocaríase em crianças de duas diferentes classes socioeconômicas do Brasil

The aim of this study was to analyze the prevalence of Toxocara spp. antibodies in children from two different socioeconomic classes in the Presidente Prudente municipality, São Paulo State, Brazil, and the protective and risk factors associated with toxocariasis. One hundred and twenty-six middle-class (MC) and 126 disadvantaged children (DC) were included in this study. Anti-Toxocara ELISA test was performed in order to evaluate seroprevalence. A survey was applied to the children's guardians/parents in order to analyze the protective and risk factors. The overall prevalence was 11.1 percent, and of 9.5 percent (12/126) and 12.7 percent (16/126) for MC and DC subgroups, respectively. Toxocara seropositivity was inversely proportional to the family income. A high household income was considered a protective factor for toxocariasis in the total population and in both MC and DC subgroups. Being a girl was considered a protective factor for the total population and for both subgroups. Whilst being an owner of cat was a risk factor for children belonging to the total and for both MC and DC subgroups, having dog was considered as a risk factor for only the MC. Epidemiologic protective/factor risks can be distinct depending on the strata of the same population. Thus, it is relevant to evaluate these factors independently for different socioeconomic classes in order to design future investigations and programs for preventing the infection of human beings by Toxocara spp. and other geohelminths.

A finalidade do presente estudo foi avaliar a prevalência de anticorpos anti-Toxocara spp. em crianças de duas diferentes classes sociais do município de Presidente Prudente, São Paulo, Brasil, e os fatores protetores e de risco associados à toxocaríase. Foram incluídas no estudo 126 crianças de classe média (CM) e 126 de baixa renda (BR). O teste ELISA foi realizado para avaliar a seroprevalência. Um questionário foi aplicado aos pais ou responsáveis pelas crianças para análise dos fatores protetores e de risco. A prevalência na população foi de 11,1 por cento, sendo de 9,5 por cento (12/126) e 12,7 por cento (16/127) para os subgrupos CM e BR. A seropositividade foi inversamente proporcional à renda familiar. Observou-se que uma alta renda familiar foi considerado um fator de proteção tanto para a população total como para ambos os subgrupos CM e BR. Da mesma forma, ser criança do sexo feminino foi outro fator de proteção para a população total e para os dois subgrupos. Possuir gato foi um fator de risco para a população total e para os dois subgrupos estudados, enquanto que possuir cão foi considerado como fator de risco apenas para as crianças de classe média. Os fatores protetores e de risco podem ser diferentes em uma mesma população a depender do estrato social. Dessa forma, é relevante avaliar esses fatores independentemente para diferentes classes sócio-econômicas para elaboração de futuros estudos e programas de prevenção à infecção humana por Toxocara spp. e outros geohelmintos.

Influence of variables on centrifuge-flotation technique for recovery of Toxocara canis eggs from soil / Influência de variáveis na técnica de centrífugo-flutuação para a recuperação de ovos de Toxocara canis em solo

The purpose of this study was to evaluate the influence of variables in a flotation technique for the recovery of Toxocara canis eggs from soil. The trials were done under standardized conditions on one gram of previously sterilized soil samples contaminated with 200 eggs of T. canis. The following variables were evaluated in serial steps: sieving; type of wash; time of stirring; resuspension of sediment; solution flotation. Centrifuge-flotation in sodium nitrate (d = 1.20 g/cm3) was adopted as an initial technique, using Tween 80 (0.2%) and decinormal sodium hydroxide as solutions for washing the samples. Ten tests were done to compare the variables, using counting in triplicate. The sieving of the material reduced significantly the recovery of eggs (p < 0.001) and the number of eggs recovered was higher when the sediment was resuspended (p < 0.05). After standardization, flotation solutions sodium chloride, zinc sulfate, sodium dichromate, magnesium sulfate, and sodium nitrate (d = 1.20g/cm3) were compared. The best results were obtained by using zinc sulfate solution. In conclusion, the chances of recovering T. canis eggs from samples using flotation solutions can be increased by washing of soil twice using distilled water, and resuspension of sediment. On the other hand, the sieving procedure can drastically reduce the number of eggs.

Com o objetivo de avaliar a influência de variáveis na técnica de centrífugo-flutuação para a recuperação de ovos de Toxocara canis em solo, amostras de solo foram previamente esterilizadas e divididas em alíquotas de um grama e contaminadas com 200 ovos. Após contaminação, foram comparadas, em etapas seriadas, as variáveis: filtragem, tipo de lavagem e ressuspensão do material. Como ponto de partida, utilizou-se técnica com lavagem de solo em Tween 80 (0,2%) e solução de hidróxido de sódio 0,1N; ressuspensão; e centrífugo-flutuação em solução de nitrato de sódio (d = 1,20 g/cm3). Os ovos recuperados foram contados com 10 repetições e três leituras para cada repetição. A filtragem reduziu significativamente a recuperação de ovos em relação ao material não filtrado (p < 0,001), enquanto o número de ovos foi significativamente maior quando da ressuspensão do material (p < 0,05). Após padronização, as soluções de cloreto de sódio, dicromato de sódio, nitrato de sódio, sulfato de zinco, sulfato de magnésio foram comparadas. O sulfato de zinco mostrou os melhores resultados. Dessa forma, as chances de recuperação de ovos de T. canis podem ser ampliadas com um processo duplicado de lavagem do solo com água destilada e ressuspensão do sedimento, sendo que a filtragem reduz consideravelmente o número de ovos.

Environmental contamination by Toxocara spp. Eggs in a rural settlement in Brazil / Contaminação ambiental por ovos de Toxocara spp. em assentamento rural no Brasil

In order to study the environmental contamination by Toxocara spp. eggs in a rural community from the Pontal do Paranapanema region, São Paulo State, Brazil, soil samples from 31 out of 121 plots were collected in eight different places on each house. The samples were submitted to flotation technique in sodium nitrate (d = 1.20g/cm³). Eggs of Toxocara spp. were recovered in nine (29.03 percent) out of the 31 plots. At least one dog was registered in 27 of the 31 plots examined (87.1 percent) and at least one cat in 17 (54.84 percent). The number of pets per plot ranged from one to six (mean of 2.3) for dogs and one to 14 (mean of 1.29) for cats. In 16 plots (51.61 percent), the presence of both dogs and cats was observed. There was no relation between the presence of pets in the plots and soil contamination (p > 0.05). However, the environmental contamination by Toxocara spp. eggs associated to the poor conditions of the inhabitants may be an important risk factor for the human population to ocular or visceral larva migrans.

Com o objetivo de avaliar a contaminação ambiental por ovos de Toxocara spp. em assentamento rural da região do Pontal do Paranapanema, oeste do estado de São Paulo, Brasil, amostras de solo de oito diferentes pontos ao redor da casa de 31 dos 121 lotes do assentamento foram coletados. A recuperação de ovos foi realizada pela técnica de centrífugo-flutuação em solução de nitrato de sódio (d = 1,20g/cm³). Ovos de Toxocara spp. foram recuperados em nove (29,03 por cento) dos 31 lotes. Em 27 das 31 casas amostradas (87,1 por cento), havia pelo menos um cão e em 17 (54,84 por cento) pelo menos um gato. O número de cães por lote variou de um a seis (media de 2,3). No caso dos gatos, o número variou de um a 14 (média de 1,29). Em 16 dos 31 lotes (51,61 por cento), havia a presença de pelo menos um cão ou gato. Não houve relação entre a presença desses animais e a contaminação do solo (p > 0,05). Entretanto, a contaminação do solo por ovos de Toxocara spp. e as precárias condições de higiene tanto da população quanto dos seus animais compõem um ambiente favorável à infecção dos assentados por agentes de larva migrans/toxocaríase.

Casos autóctones de Fasciola hepatica na região de Presidente Prudente, São Paulo, Brasil / Autochthonous cases of Fasciola hepatica in Presidente Prudente region, Sao Paulo State, Brazil

O presente trabalho descreve, a partir da condenação de fígado de bovinos em matadouro, a ocorrência de fasciolose em uma propriedade na região de Presidente Prudente, São Paulo, com a confirmação de ovos de Fasciola hepatica em exame coproparasitológico e a presença de caramujos do gênero Lymnaea. Observou-se que a propriedade ofereceu condições favoráveis ao desenvolvimento do hospedeiro intermediário do parasito e ao surgimento de casos autóctones na região. A verificação desses casos deve servir de alerta para as potenciais perdas econômicas advindas desse tipo de parasitismo.

Larva migrans cutânea: ocorrência de casos humanos e identificação de larvas de Ancylostoma spp em parque público do município de Taciba, São Paulo / Cutaneous larva migrans: reports of pediatric cases and contamination by Ancylostoma spp larvae in public parks in Taciba, São Paulo State

Descreve-se a ocorrência de larva migrans cutânea em crianças de Taciba, São Paulo, Brasil, pelo contato com areia de parques públicos, onde observou-se larvas de Ancylostoma spp. A enfermidade foi controlada após adotar-se medidas educacionais sanitárias, desativação e isolamento dos locais para reduzir acesso de animais e troca de areia.