Extracellular proteases of Halobacillus blutaparonensis strain M9, a new moderately halophilic bacterium

Halophilic microorganisms are source of potential hydrolytic enzymes to be used in industrial and/or biotechnological processes. In the present study, we have investigated the ability of the moderately halophilic bacterium Halobacillus blutaparonensis (strain M9), a novel species described by our group, to release proteolytic enzymes. This bacterial strain abundantly proliferated in Luria-Bertani broth supplemented with 2.5% NaCl as well as secreted proteases to the extracellular environment. The production of proteases occurred in bacterial cells grown under different concentration of salt, ranging from 0.5% to 10% NaCl, in a similar way. The proteases secreted by H. blutaparonensis presented the following properties: (i) molecular masses ranging from 30 to 80 kDa, (ii) better hydrolytic activities under neutral-alkaline pH range, (iii) expression modulated according to the culture age, (iv) susceptibility to phenylmethylsulphonyl fluoride, classifying them as serine-type proteases, (v) specific cleavage over the chymotrypsin substrate, and (vi) enzymatic stability in the presence of salt (up to 20% NaCl) and organic solvents (e.g., ether, isooctane and cyclohexane). The proteases described herein are promising for industrial practices due to its haloalkaline properties.

Suscetibilidade à novobiocina na identificação de amostras de Staphylococcus coagulase negativos (SCoN) isolados de hemoculturas / Susceptibility to the novobiocin in the identification of isolates of Staphylococcus negative (SCoN) isolated from blood cultures

Tradicionalmente o Laboratório de Microbiologia Clínica utiliza a prova de suscetibilidade a novobiocina para distinguir as espécies clinicamente significativas de SCoN, entre elas o Staphylococcus saprophyticus. Devido ao aumento destes microrganismos nas infecções relacionadas à assistência à saúde, este estudo teve como objetivo relatar duas bacteremias por SCoN resistentes a novobiocina ocorridas em maio e setembro de 2006, em um hospital geral, na cidade de São Paulo. Primeiramente o teste fenotípico apontou resistência a novobiocina, mas com padrões distintos de identificação ao S. saprophyticus. Na identificação convencional, asamostras fermentaram trealose, manitol e manose, sendo positivas nos testes da urease e fosfatase alcalina. No sistema semi-automatizado, a confirmação da espécie apontou o Staphylococcus cohnii subsp. urealyticus com 99,99 de probabilidade. No teste de disco difusão, os isolados mostraram-se resistentes à oxacilina, mas suscetível a cefoxitina, vancomicina e teicoplanina. Houve confirmação pela metodologia do Etest® mostrando CIM para oxacilina superior a 256 μg/ml, e suscetibilidade a vancomicina e a teicoplanina.A reação da PCR confirmou a presença do gene mecA nos isolados. Estes dados demonstram a importância dos SCoN isolados em hemoculturas, sendo necessária uma correta identificação destes microrganismos.