High level of infection by Toxoplasma gondii in pigs slaughtered in the city of São Luís, Maranhão / Alto nível de infecção por Toxoplasma gondii em suínos abatidos na cidade de São Luís, Maranhão

Abstract A serological, molecular and histopathological study was carried out in order to investigate occurrences of Toxoplasma gondii in pigs slaughtered with and without inspection service. Serum samples were collected from 60 pigs to detect anti-T. gondii antibody by indirect fluorescent antibody (IFAT). Tongue, masseter and diaphragm fragments were also collected for parasite DNA detection by means of the polymerase chain reaction (PCR) and histopathological analysis. The serological results showed that 77% (44/60) of the pigs were positive. Regarding PCR, 66.67% (40/60) were positive for T. gondii. Among the tissues evaluated, the diaphragm was the one with the highest frequency of positivity (40%; 24/60), followed by the masseter (38.33%; 23/60) and tongue (33.3%; 20/60). Histopathological changes were only observed in the diaphragm, which presented inflammatory infiltrates of lymphohistiocytic and neutrophilic types. These results not only show the potential threat of T. gondii to human health, but also demonstrate the dynamic epidemiological situation of toxoplasmosis in pigs in the city of São Luís, providing support for food security regarding pigs and for T. gondii control programs in Brazil.

Resumo Realizou-se um estudo sorológico, molecular e histopatológico com o objetivo de verificar a ocorrência de Toxoplasma gondii em suínos abatidos com e sem serviço de inspeção. Foram coletados soros de 60 suínos para a pesquisa de anticorpos anti-T. gondii pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI). Também foram coletados fragmentos de língua, masseter e diafragma para a detecção do DNA do parasito por meio da reação em cadeia da polimerase (PCR) e análise histopatológica. A análise sorológica demonstrou que 77% (44/60) dos suínos apresentaram anticorpos anti-T. gondii. Com relação ao PCR, 66,67% (40/60) foram positivos para T. gondii. Dentre os tecidos avaliados, o diafragma foi o que obteve maior frequência de positividade (40%; 24/60), seguidos de masseter (38,33%; 23/60) e língua (33,3%; 20/60). Alterações histopatológicas foram observadas apenas no diafragma, que apresentou infiltrado inflamatório do tipo linfohistiocitário e neutrofílico. Esses resultados não evidenciam apenas a ameaça potencial de T. gondii à saúde humana, mas também demonstram a dinâmica situação epidemiológica da toxoplasmose em suínos na região da cidade de São Luís, fornecendo suporte para a segurança alimentar de suínos e programas de controle de T. gondii no país.

High genetic diversity of Anaplasma marginale infecting dairy cattle in northeastern Brazil / Alta diversidade genética de Anaplasma marginale em bovinos de leite no nordeste do Brasil

Abstract Anaplasma marginale is an obligate intracellular Gram-negative bacterium found in ruminants' erythrocytes and is the etiological agent of bovine anaplasmosis. The bacterium's genetic diversity has been characterized based on sequences of major surface proteins (MSPs), such as MSP1α. The aim of the present study was to investigate the genetic diversity of A. marginale in cattle in the state of Maranhão, northeastern Brazil. To this end, 343 blood samples were harvested and subjected to iELISA assays using the recombinant surface protein MSP5. Out of 343 blood samples, 235 (68.5%) were randomly chosen and submitted to DNA extraction, qPCR and conventional PCR targeting the msp1α gene to determine amino acid sequences and classify the genotypes. The iELISA results showed 81.34% seropositivity (279/343), whereas qPCR revealed 224 positive samples (95.32%). Among these qPCR-positive samples, 67.4% (151/224) were also positive in the cPCR. Among the 50 obtained sequences, 21 strains had not been previously reported. Regarding the genotypes, H (26/50) and E (18/50) were identified most often, while genotypes F and C were only identified twice each and B and G once each. In conclusion, high prevalence and genetic diversity for A. marginale were observed in dairy cattle herds in the state of Maranhão.

Resumo Anaplasma marginale é uma bactéria Gram-negativa intracelular obrigatória de eritrócitos de ruminantes e responsável pela anaplasmose bovina. A diversidade genética de A. marginale tem sido caracterizada com base nas sequências das principais proteínas de superfície (MSPs), como a MSP1α. O objetivo deste estudo foi investigar a diversidade genética de A. marginale em bovinos no estado do Maranhão, Nordeste do Brasil. Dessa forma, 343 amostras de sangue foram submetidas ao ensaio iELISA, utilizando-se a proteína recombinante MSP5. Das 343 amostras de sangue, 235 (68,5%) foram escolhidas aleatoriamente e submetidas à extração de DNA, qPCR e PCR convencional para gene msp1α, para determinação das sequências de aminoácidos e classificação dos genótipos. Os resultados do iELISA mostraram 81,34% de soropositividade (279/343), enquanto qPCR revelou 224 amostras positivas (95,32%). Dentre estas na qPCR, 67,4% (151/224) mostraram-se positivas no PCR convencional. Das 50 sequências obtidas, 21 cepas não haviam sido relatadas anteriormente. Em relação aos genótipos, H (26/50) e E (18/50) foram os mais frequentes, enquanto os genótipos F e C foram identificados apenas duas vezes cada, e B e G uma vez cada. Em conclusão, alta prevalência e marcante diversidade genética de A. marginale foram observadas em rebanhos leiteiros no estado do Maranhão.

First report of detection of Toxoplasma gondii DNA in oysters (Crassostrea sp.) in the state of Maranhão / Primeiro relato da detecção de DNA de Toxoplasma gondii em ostras (Crassostrea sp.) no Estado do Maranhão

Abstract The aim of this study was to report on detection of Toxoplasma gondii DNA in oysters (Crassostrea sp.) in the state of Maranhão. To conduct this study, 200 farmed oysters were acquired in the municipality of Raposa and 100 in Paço do Lumiar; and a further 100 oysters were taken from the natural stock in the municipality of Primeira Cruz. This total of 400 specimens sampled was divided into 80 pools composed of five animals each. The gills and visceral mass of each oyster were removed for DNA extraction (per pool of oysters), using a commercial kit. The nested PCR technique (with the primer SAG-1) was then used to investigate any presence of protozoa. This molecular technique demonstrated the presence of DNA of T. gondii in 2.5% of the pools of oysters (n = 2/80): these oysters were exclusively from farms. The results from this study allow the conclusion that oysters of the genus Crassostrea that are farmed in the state of Maranhão are capable of filtering oocysts of T. gondii and maintaining them in their tissues. They are therefore potential sources of contamination for humans and other animals.

Resumo: Objetivou-se com este estudo relatar a detecção do DNA de Toxoplasma gondii em ostras (Crassostrea sp.) no estado do Maranhão. Para a realização do estudo foram adquiridas 200 ostras de cultivo do município de Raposa, e 100 de Paço do Lumiar, além de 100 ostras extraídas de estoque natural do município de Primeira Cruz. Do total de 400 exemplares amostrados, formaram-se 80 pools em que cada pool foi constituído por cinco animais. De cada ostra foi procedida à retirada das brânquias e massa visceral, seguido da extração de DNA de cada pool de ostras, com a utilização de kit comercial. Posteriormente, realizou-se a pesquisa do protozoário por meio da técnica de nested PCR (primer SAG-1). Com a técnica molecular utilizada, foi diagnosticado o DNA do protozoário pesquisado em 2,5% (n=2/80) pools de ostras oriundas exclusivamente de cultivo. Com os resultados obtidos neste estudo, conclui-se que ostras do gênero Crassostrea sp., cultivadas no estado do Maranhão, são capazes de filtrar e manter nos seus tecidos oocistos de T. gondii, sendo, portanto, fontes potenciais de contaminação para seres humanos e outros animais.

Occurrence of Bartonella genotypes in bats and associated Streblidae flies from Maranhão state, northeastern Brazil / Ocorrência de genótipos de Bartonella em morcegos e moscas Streblidae no Estado do Maranhão, Nordeste do Brasil

Abstract Bartonella is a genus of emerging zoonotic bacteria that are mainly associated with mammalian erythrocytes and endothelial cells. Bats are natural reservoirs for a variety of important pathogens that impact human and animal health. Recent reports have highlighted the role of bats and bat flies in the maintenance of Bartonella. Here, we showed that none of the 29 bat DNA blood samples obtained from five bat species in São Luís Island, state of Maranhão, northeastern Brazil, were positive for Bartonella in qPCR assays targeting nuoG. On the other hand, three out of 15 DNA samples (20%) from flies in the family Streblidae were positive for Bartonella. The BLASTn results showed that the gltA and rpoB sequences shared identities ranging from 97.2% to 100%, with Bartonella sequences amplified from bats or bat flies from Costa Rica and Brazil. These findings were supported by phylogenetic analyses based on Bayesian inferences. The present study showed that Bartonella genotypes are present in bat flies, thus shedding some light on the distribution of bat fly-related Bartonella genotypes in South America.

Resumo Bartonella é um gênero de bactérias zoonóticas emergentes associadas principalmente a eritrócitos e células endoteliais de mamíferos. Morcegos são reservatórios naturais para uma variedade de patógenos importantes que afetam a saúde humana e animal. Além disso, estudos recentes destacaram o papel dos morcegos e de moscas associadas a morcegos na manutenção de Bartonella. No presente estudo, nenhuma das 29 amostras de DNA obtidas a partir do sangue de cinco espécies de morcegos amostrados na ilha de São Luís, estado do Maranhão, Nordeste do Brasil, foi positiva para Bartonella nos ensaios de qPCR direcionados ao gene nuoG. Por outro lado, três das 15 (20%) amostras de DNA de moscas da família Streblidae foram positivas para Bartonella. Os resultados do BLASTn mostraram que as sequências dos genes gltA e rpoB compartilharam identidade, variando de 97,2% a 100%, com as sequências de Bartonella amplificadas em morcegos ou moscas amostrados na Costa Rica ou Brasil. Tais resultados corroboraram as análises filogenéticas realizadas por Inferência Bayesiana. O presente estudo mostrou a ocorrência de Bartonella em moscas de morcegos, auxiliando a esclarecer a distribuição dos genótipos de Bartonella relacionadas a moscas Streblidae na América do Sul.

Qualidade microbiológica da água de cacimbão e poços artesianos na comunidade pesqueira Ilha Grande, município de Humberto de Campos – MA / Microbiological quality of cacimban water and artisian wells in the fishing community Grande Island, municipality of Humberto de Campos – MA

Objetivou-se neste trabalho avaliar a qualidade microbiológica da água de ‟cacimbão” (poços de coleta com mais de 1 metro de diâmetro) e poços artesianos na comunidade pesqueira Ilha Grande, Município de Humberto de Campos – MA. No mês de julho de 2018, foram coletadas as águas de cinco (5) poços artesianos e de um (1) ‟cacimbão” para obtenção de amostras. As mesmas foram encaminhadas para o Laboratório de Microbiologia de Alimentos e Água da Universidade Estadual do Maranhão (UEMA), onde foram realizadas as análises. Os resultados das análises microbiológicas e físico-químicas obtidas foram comparados com a Portaria 2.914/Ministério da Saúde de 12/12/11. O método utilizado para análises de coliformes totais e Escherichia coli foi a técnica do Substrato Colilert e para bactérias heterotróficas aeróbias mesófilas a técnica do Substrato SimPlate. As 5 (83,33%) amostras apresentaram qualidade insatisfatória, quanto aos parâmetros microbiológicos. Conclui-se que a todas as amostras avaliadas de águas de poços artesianos estão em descordo com padrões de potabilidade exigidos na legislação.

Avaliação das condições higiênico-sanitárias na comercialização de pescado no mercado do peixe no município de São Luís - MA / Evaluation of sanitary conditions on fish marketing in the fish market in the municipality of São Luís - MA

A demanda de pescado tem crescido devido às mudanças de hábitos alimentares da população, sendo frequente a comercialização em feiras e mercados públicos. Contudo, os hábitos irregulares como a falta de atenção ao manipular e armazenar o pescado pode desencadear graves problemas à saúde pública. Este trabalho teve como objetivo avaliar as condições higiênicos sanitários da comercialização de pescado no Mercado do Peixe de São Luís - MA. Foi utilizado o método observacional direto e aplicação de check list fundado na RDC nº 275 do Ministério da Saúde. Os resultados evidenciaram algumas desconformidades relacionadas ao manejo de resíduos, vestimenta dos manipuladores e resfriamento de pescado, não atendendo os padrões de higiene e acondicionamento para comercialização de pescado.

Alterações anatomopatológicas em rete ovarii de fêmeas bovinas mestiças / Anatomopathological changes in rete ovarii of mestizo cattle

O objetivo do presente estudo foi identificar e caracterizar as principais alterações patológicas em rete ovarii, observadas em rebanho bovino mestiço. Foram coletadas amostras de 467 pares de ovários de fêmeas bovinas (gestantes e não gestantes), com idades variáveis, provenientes de dois frigoríficos da região metropolitana de Belo Horizonte, Minas Gerais, Brasil, no período de setembro a dezembro de 2012, para avaliação anatomopatológica. Das amostras coletadas, observou-se a rete ovarii em ambos os lados de 417/467 animais (89,3%). Na análise macroscópica, verificou-se a presença de cistos foliculares (5,03%), cistos de corpo lúteo (0,72%) e secreções purulentas (0,48%) de coloração amarela intensa e consistência viscosa, indicativo de processo inflamatório supurativo. No exame microscópico, observaram-se em 23/417 amostras (5,51%), um processo hiperplásico adenomatoso de rete ovarii, com espessamento da camada epitelial, modificação do padrão de epitélio variando de cúbico a colunar, com duas ou três camadas de células, sendo em alguns momentos ciliadas e com dilatação tubular. Destas amostras, verificou-se associação de lesão hiperplásica com infiltrado inflamatório predominantemente linfomacrofágico em 15/23 amostras (65,22%). Ainda em relação às amostras confirmadas para hiperplasia, observou-se reação proliferativa estromal com característica fibroplástica em 21/23 amostras (91,30%). Conclui-se que em fêmeas bovinas mestiças a frequência de alterações encontradas em rete ovarii é baixa ou rara e o conhecimento desta lesão pode auxiliar no manejo reprodutivo desta espécie animal, a fim de diagnosticar possíveis alterações patológicas que podem promover subfertilidade e até infertilidade do rebanho bovino, que resultam em significativas perdas econômicas.

The aim of this study was to identify and characterize the main pathological changes in rete ovarii observed in cattle herd mestizo. Samples were collected from 467 pairs of ovaries of cows (pregnant and non-pregnant), with varying ages, from two refrigerators in the metropolitan region of Belo Horizonte, Minas Gerais, Brazil, in the period from September to December 2012 for anatomopathological evaluation. From samples collected, the rete ovarii was observed on both sides of 417/467 animals (89.3%). In macroscopic analysis, the presence of follicular cysts (5.03%), corpus luteum cyst (0.72%) and purulent discharge (0.48%) with yellow color and viscous consistency indicating a suppurative inflammatory process. At microscopic analysis, were observed in 23/417 samples (5.51%), a hyperplastic adenomatous rete ovarii process, and thickening of the epithelial cell layer, with two or three cell layers of cuboidal to columnar cells, and some cilia and tubular dilatation. From these samples, there was association between hyperplastic lesions with predominantly a lymphomacrofagic inflammatory cell infiltrate in 15/23 samples (65.22%). Also in relation to the samples confirmed for hyperplasia, there was proliferating fibroblasts in 21/23 samples (91.30%). It is concluded that in mestizo cattle the frequency of alterations found in rete ovarii is low or rarity, and the knowledge of this lesion may assist in the reproductive management of this animals species, in order to diagnose possible pathological alterations that can promote subfertility and even infertility of the herd that results in significant economic losses