Infection by Mycobacterium bovis in a dog from Brazil

Abstract Tuberculosis (TB) is a chronic disease caused by bacteria belonging to the Mycobacterium tuberculosis complex (MtbC). This disease rarely affects dogs. Canine infections are usually caused by M. tuberculosis. Mycobacterium bovis infections are rare in dogs and associated with consumption of raw milk or contaminated products. Here, we report a Boxer dog who had a M. bovis infection and was admitted to a Brazilian veterinary hospital with a presumptive diagnosis of chronic ehrlichiosis. Despite receiving treatment for chronic ehrlichiosis, it progressed to death. TB was diagnosed during post-mortem examinations using histopathological analysis. Ziehl-Neelsen staining revealed acid-fast bacilli in the kidneys, liver, mesentery, and a mass adhered to the liver. Further, PCR-restriction analysis was performed to identify mycobacteria in the samples. A restriction profile compatible with MtbC was found in the lungs. In addition, PCR-based MtbC typing deletions at different loci of chromosome 9 enabled the identification of M. bovis in the lungs. Therefore, it is very essential to perform differential diagnosis of TB in dogs with non-specific clinical signs and who do not respond to treatment, particularly those who had been in contact with TB-infected cattle or owners. Further, we highlight the use of molecular methods for the identification of bacilli, improving the diagnosis and aiding epidemiological studies.

Avaliação dos efeitos de 5-hidroxitriptofano em-hidroxibenzilhidrazine associados a Lactobacillus spp. na morfometria intestinal e imunomarcação de serotonina em frangos de corte desafiados com Salmonella Enteridis / Assessment of the effects of 5-hydroxytryptophan and m-hydroxybenzyl hydrazine associated with Lactobacillus spp. in intestinal morphology and immunostaining of serotonin in broilers challenged with Salmonella Enteritidis.

As células enterocromafins são um dos componentes da mucosa intestinal que liberam serotonina para o lúmen, promovendo atividades secretórias e crescimento celular de vários tecidos, incluindo vilosidades intestinais. O presente estudo avaliou as influências do 5-hidroxitriptofano (5HTP) e do m-hidroxibenzilhidrazine (NSD1015), associados a Lactobacillus spp., sobre o peso corporal e o desenvolvimento das vilosidades intestinais na porção proximal do duodeno de frangos de corte desafiados com Salmonella Enteritidis. Verificou-se também se a presença de Lactobacillus spp. e Salmonella Enteritidis influenciaram a imunomarcação de serotonina no duodeno e, para isso, o estudo foi dividido em dois experimentos, com e sem desafio por S. Enteritidis. No Experimento 1, em aves sem desafio, os pesos corporais não diferiram significantemente (p>0,05) e, no Experimento 2, aves com desafio, os tratamentos com o precursor isolado e associado a Lactobacillus spp. determinaram maior peso corporal das aves. Nos dois experimentos, as aves tratadas com 5HTP apresentaram aumento na densidade e altura das vilosidades no duodeno, sugerindo a atuação de 5HTP como um agente trófico. A administração de Lactobacillus spp. também determinou altura maior de vilosidades duodenais. Quanto a imunomarcação de serotonina, as aves tratadas com Lactobacillus spp. no Experimento 1 e as aves tratadas com Lactobacillus spp. e desafiadas com S. Enteritidis no Experimento 2, apresentaram valores superiores aos demais tratamentos, sugerindo que a presença destas bactérias promove maior liberação de serotonina para o duodeno, porém o mecanismo exato de como este processo ocorre necessita ser mais elucidado...

Enterochromaffin cells are components of the intestinal mucosa to release serotonin lumen, promoting cell growth and secretory activity of various tissues, including intestinal villi. This study evaluated the influence of 5-hydroxytryptophan (5HTP) and m-hidroxibenzilhidrazine (NSD1015) associated with Lactobacillus spp. on body weight and development of intestinal villi in the proximal duodenum of broilers challenged with Salmonella Enteritidis. It was found that the presence of Lactobacillus spp. and Salmonella Enteritidis influenced immunostaining of serotonin in the duodenum. The study was divided into two experiments with and without challenge by S. Enteritidis. In Experiment 1, birds without challenge, body weights did not differ significantly (p>0.05), and in Experiment 2, the treatments with precursor and precursor associated with Lactobacillus spp. determined higher body weight of the birds. In both experiments the birds treated with 5HTP showed increased density and villus height in the duodenum, suggesting the presence of 5HTP as a trophic agent. The use of Lactobacillus spp. also determined greater duodenal villus height. The immunostaining of serotonin, birds treated with Lactobacillus spp. in Experiment 1, and the birds treated with Lactobacillus spp. and challenged with S. Enteritidis in Eperiment 2 showed higher values, suggesting that the presence of these bacteria promotes greater release of serotonin into the duodenum. The exact mechanism of how this process occurs needs to be further elucidated...

Effect of protective solutions and hydroxyethyl starch in the attenuation of the injuries of ischemia and reperfusion of splanchnic organs

PURPOSE: Vogt´s antioxidant solution (red blood cells, Ringer's solution, sodium bicarbonate, mannitol, allopurinol and 50% glucose) or its modification including hydroxyethyl starch (HES) were tested for the prevention of splanchnic artery occlusion shock. METHODS: Seventy rats were distributed in treatment (3), control (1), and sham (3) groups. Ischemia and reperfusion were induced by celiac, superior mesenteric and inferior mesenteric arteries occlusion for 40 min, followed by 60 min reperfusion or sham procedures. Controls received saline, both treatment and sham groups received the Vogt's solution, modified Vogt's solution (replacing Ringer's solution by HES), or HES. Mean arterial blood pressure (MABP), ileal malondialdehyde (MDA) and plasmatic MDA were determined, and a histologic grading system was used. RESULTS: At reperfusion, MABP dropped in all I/R groups. Only HES treatment was able to restore final MABP to the levels of sham groups. Plasmatic MDA did not show differences between groups. Ileum MDA was significantly higher in the control and treatment groups as compared to the sham group. Histology ranking was higher in the only in control group. CONCLUSIONS: Hydroxyethyl starch was able to prevent hemodynamic shock but not intestinal lesions. Both treatments with Vogt's solutions did not show any improvement. .

EFFECT OF Bifidobacterium animalis ON MICE INFECTED WITH Strongyloides venezuelensis / Efeito da administração de Bifidobacterium animalis sobre a infecção por Stongyloides venezuelensis em camundongos

The administration of viable Bifidobacterium animalis was tested to induce resistance against Strongyloides venezuelensis infection in mice. Effects on parasite burden, worm length, egg output, and intestinal mucosal histology were evaluated. The oral administration of B. animalis, strain 04450B, starting 14 days before the inoculation of nematode larvae significantly decreased the worm burden and egg output. In probiotic treated animals, the percent reduction of adult worms in the intestine was of 33% and the reduction of egg production was of 21%, compared with those of the control group. The duodenum villous height and villous/crypt ratio were significantly higher in probiotic-treated mice, indicating that this group could be experiencing less intestinal damage. The present findings revealed that the administration of B. animalis for the amelioration of host response to nematode infections is biologically plausible and could have some potential for impacting public health. Meanwhile, further study is needed to delineate the nature and identity of the factor(s) involved in these beneficial effects.

Os efeitos da administração de Bifidobacterium animalis viáveis sobre a infecção por Strongyloides venezuelensis foram avaliados em camundongos experimentalmente infectados. Os parâmetros analisados incluíram a carga parasitária, o comprimento dos vermes, a quantidade de ovos eliminados e a histologia da mucosa intestinal. A administração oral da cepa 04450B de B. animalis, iniciada 14 dias antes da inoculação de larvas do nematódeo, foi acompanhada de uma redução significativa do número de vermes que se estabeleceu no intestino e do número de ovos eliminados nas fezes. Nos animais tratados com o probiótico, o percentual de redução de vermes adultos no intestino foi de 33% e da produção de ovos foi de 21%, em comparação com os do grupo controle. O comprimento das vilosidades do duodeno e a relação vilus/cripta foram significativamente maiores nos animais tratados, indicando que nestes animais as lesões intestinais foram mais leves. Os resultados do presente trabalho revelaram que a administração de B. animalis com o propósito de modular a resposta do hospedeiro contra infecções por nematódeos é uma possibilidade biologicamente plausível com impacto potencial em saúde pública. No entanto, são ainda necessários mais estudos para esclarecer os mecanismos de ação destes microrganismos e identificar os fatores envolvidos na produção dos efeitos benéficos.

Induction of immune response in broiler chickens immunized with recombinant FliC and challenged by Salmonella Typhimurium / Indução de resposta imune em frangos de corte imunizados com FliC recombinante e desafiados por Salmonella Typhimurium

The study examined (1) the immune response in broiler chickens after oral immunization with recombinant flagellin (rFliC) from Salmonella Typhimurium conjugated with sodium alginate microparticles, and the immune response enhancement in association with recombinant cholera toxin B subunit protein (rCTB) and pool of Lactobacillus spp. (PL). The immune responses were evaluated by dosage of IgY serum and IgA from intestinal fluid and immunostaining of CD8+ T lymphocytes in the cecum. The immunized animals were challenged with Salmonella Typhimurium (ST) 21 days after treatment. In all immunized groups, a significant increase (p<0.05) was observed in IgA levels (μg/mL), especially three weeks after immunization. The serum IgY levels (μg/mL) were little affected by the treatments and differed significantly among groups only in the second post-immunization week (p<0.05). After the challenge, the number of CD8+ T cells differed significantly between the treatments and negative control. Retrieval of Salmonella Typhimurium was not detected at 48 hours after the challenge in T2 (rFliC+rCTb), T3 (rFliC+PL) and T4 (rFliC+rCTB PL). The rFliC administered orally with or without rCTB and Lactobacillus spp. produces significant induction of humoral immune response, and the immunized chickens were more effective in eliminating Salmonella after challenge.

Este estudo investigou a resposta imunitária de frangos de corte após a imunização oral com flagelina recombinante (rFliC) de Salmonella Typhimurium conjugada com micropartículas de alginato de sódio, e como intensificador de resposta imune foi associada a proteína subunidade B da toxina colérica (rCTB) e pool de Lactobacillus spp. (PL). As respostas imunes foram avaliadas por dosagem de IgY sérica e IgA do fluído intestinal e imunomarcação de linfócitos T CD8+ presentes no ceco. Os animais imunizados foram desafiados aos 21 dias após tratamento com Salmonella Typhimurium (ST). Foi observado em todos os grupos imunizados um aumento significativo (p<0,05) nos níveis de IgA (μg/mL) principalmente três semanas após as imunizações. Os níveis de IgY sérica (μg/mL) foram pouco influenciados pelos tratamentos, apenas na segunda semana após imunização observou-se diferenças significativas (p<0,05) entre os grupos. Observou-se que o número de linfócitos T CD8+ apresentou diferença significativa entre os tratamentos e o controle negativo após o desafio. Quanto a recuperação de Salmonella Typhimurium, observou-se que 48 horas após o desafio já não havia detecção do agente nos grupos T2 (rFliC+rCTb), T3 (rFliC+PL) e T4 (rFliC+rCTB+PL). Concluí-se que rFliC administrada, via oral, associada ou não a Lactobacillus spp e rCTB, demonstrou induzir significativamente a resposta imune humoral e que as aves imunizadas foram mais eficientes na eliminação de Salmonella após desafio.

Resposta tecidual a implantes de discos de poliuretana de mamona nas formas pré-moldada ou biomassa moldada / Tissue reaction to premolded or molded biomass disks of polyurethanes containing castor oil

O trabalho teve por objetivo avaliar a resposta tecidual à implantação de discos de poliuretana derivada do óleo de mamona confeccionados de duas formas distintas, na forma pré-moldada fornecida pela indústria e em biomassa moldada no momento da aplicação, de forma a observar se haveria algum tipo de reação local tardia associada à possível continuidade do processo de endurecimento final do biomaterial. Foram utilizados 20 ratos, linhagem Wistar, fêmeas, com peso de 300-350g, nos quais foi inserido o disco pré-moldado no tecido subcutâneo do flanco direito e o de biomassa moldada no flanco esquerdo. Ambos os discos tinham 0,8cm de diâmetro por 0,5cm de espessura. Para o procedimento histológico, cinco ratos foram submetidos à eutanásia aos 3, 7, 15 e 30 dias de pós-cirúrgico. Os implantes e tecidos circundantes foram colhidos, processados e corados pela técnica de hematoxilina-eosina. Foi observada inicialmente uma reação inflamatória moderada, composta especialmente por células polimorfonucleares e macrófagos. Os linfócitos variaram de ausentes a discretos. A reação inflamatória diminui de intensidade à medida que se intensificou a formação de tecido conjuntivo fibroso ao redor dos implantes, porém sem modificação dos números de macrófagos. Sendo assim, conclui-se que ambos os discos de poliuretana induzem uma reação inflamatória similar, que varia de moderada a discreta na dependência do momento de avaliação.

The aim of this study was to histologically evaluate the tissue reaction to implantation of polyurethane disks containing castor oil produced in premolded form, supplied commercially, and biomass molded at the moment of application; since a late tissue reaction may occur during the total hardening process of the biomaterial. Twenty female Wistar rats, about 3 months of age, weighing 300-350g, and polyurethane disks 0.8cm in diameter and 0.5cm in thickness were used. The premolded disk was implanted into the subcutaneous tissue at the right flank and the molded biomass disk at the left flank. Five rats each were submitted to euthanasia at 3, 7, 15 and 30 days after surgery, and the polyurethane disks and surrounding tissue were collected. The specimens were processed for HE staining and examined microscopically. A moderate inflammatory reaction was primarily composed of polymorphonuclear cells and macrophages. The lymphocytes varied from absent to discreet. The intensity of the inflammatory reaction decreased at the same time the formation of fibrous conjunctive tissue increased around the implants. However, the numbers of macrophages remained the same. In conclusion, both polyurethane disks induce the same type of inflammatory reaction that varies from slight to moderate according to evaluation time.

Imunorreatividade da p53 associada à ausência de mutações no gene TP53 em linfomas caninos / Immunostaing of p53 associated with absence of mutations in TP53 gene in dogs with lymphoma

Sabendo-se da influência das mutações no gene TP53 no desenvolvimento das neoplasias e da discrepância entre os resultados obtidos pelas técnicas de sequenciamento e imunoistoquímica, esta pesquisa teve como objetivo relacionar a sequência do TP53 com a imunorreatividade da p53. Foram obtidas amostras de linfoma de 12 cães. O diagnóstico histopatológico foi determinado pela classificação de Kiel. O imunofenótipo e a imunomarcação da p53 foram determinados por imunoistoquímica. Para reação com a p53, utilizou-se anticorpo policlonal anti-p53 (CM1) na diluição de 1:500. A região do gene TP53 compreendida entre os exons quatro e nove foi amplificada por PCR e submetida ao sequenciamento. Apesar dos resultados obtidos pela imunoistoquímica, nenhuma mutação foi encontrada nas sequências analisadas. Conclui-se que a imunorreatividade da p53 pela imunoistoquímica não pode ser atribuída à presença de mutações no domínio central do gene TP53.

TP53 mutations are usually involved in cancer, but sequencing and immunohistochemistry results are often controversial. Thus, the aim of this study was to associate TP53 sequence with p53 immunostaining in dogs with lymphoma. Tumor samples were collected from 12 dogs with lymphoma and were included in this study. Histopathological diagnosis was performed according to Kiel classification. Immunohistochemistry was performed to identify immunophenotype as well as p53 expression. Polyclonal antibody anti-p53 (CM1) was used at a 1:500 dilution. The region that encompasses exons 4-9 was amplified by f PCR reactions and sequencing was then performed. Nevertheless, gene mutations were not observed in any sequence. In conclusion, immunoreactivity of p53 by means of immunohistochemistry should not be indicator of presence of mutations in the core domain of TP53 gene.

Segurança e eficácia da técnica de biopsia pulmonar transtorácica percutânea para avaliação histopatológica do parênquima pulmonar de ovinos clinicamente sadios / Safety and effectiveness of the transthoracic percutaneous lung biopsy technique for histopathological evaluation of the lung parenchyma in healthy sheep

Foram analisados os resultados e complicações decorrentes do emprego da técnica de biopsia pulmonar transtorácica percutânea em 20 ovinos clinicamente sadios. Os animais foram submetidos ao exame clínico seguido da biopsia com agulha semi-automática no 7º espaço intercostal direito, 5cm acima do olécrano. Foram analisados o número de tentativas para a execução do procedimento e o tamanho dos fragmentos. As amostras obtidas foram avaliadas histologicamente. Posteriormente ao abate, foi realizado o exame pos mortem para avaliação de complicações da técnica e das eventuais lesões provocadas. Entre todos os animais submetidos à biopsia apenas dois demonstraram resistência a técnica, sendo obtidos fragmentos pulmonares de 4-7mm de comprimento, com média de 1,8±1 tentativas por fragmento. As principais alterações relacionadas à técnica foram tosse, dispnéia inspiratória, elevação das freqüências cardíaca e respiratória e aumento do ruído broncobronquiolar. Ao exame post mortem observou-se hemorragia dos músculos intercostais e pleura visceral em todos os animais. Das 20 tentativas de execução da técnica, 18 obtiveram sucesso, enquanto que em duas o fígado foi equivocadamente puncionado. As amostras de tecido pulmonar foram consideradas representativas, pois foi possível a visualização de estruturas íntegras, incluindo bronquíolos e alvéolos. Podemos concluir que a biopsia pulmonar é segura e eficaz para obtenção de amostras pulmonares com fins de diagnóstico histológico.

The results and complications arising from use of the percutaneous transthoracic lung biopsy technique in 20 clinically healthy sheep were analyzed. The animals were subjected to clinical examination followed by lung biopsy with a semi-automatic needle in the 7th right intercostal space, 5cm above the olecranon. The number of attempts to implement the procedure and size of the fragments were evaluated. The samples were evaluated histologically. After the slaughter, a postmortem examination assessed the technical complications and possible injuries. Among all animals which underwent biopsy only two did not tolerate the technique. Lung fragments measuring 4-7mm were obtained by an average of 1.8 attempts per fragment. The main changes related to the procedure were cough, labored breathing, increased heart and breathing rate, and increased bronco-bronchiolar sound. The postmortem examination revealed bleeding of the intercostal muscles and visceral pleura of various extend in all lambs, and a wound up to 14mm length in the lung of two animals that did not tolerate the procedure. From 20 attempts to implement the technique, 18 were successful, while in two of them the liver was mistakenly punctured. Samples of lung tissue were representative. It was possible to visualize intact structures, including bronchioles and alveoli. It could be concluded that lung biopsy is a safe and effective procedure to obtain lung samples for histological diagnosis.

Classificação citológica dos linfomas caninos / Cytological classification of canine lymphomas

Os linfomas estão entre as neoplasias mais frequentes na espécie canina. Do ponto de vista etiológico, epidemiológico, clínico, morfológico e imunofenotípico os linfomas caninos apresentam muitas semelhanças com os linfomas não-Hodgkin humanos e os esquemas de classificação destes têm sido utilizados na espécie canina. O objetivo do presente trabalho foi aplicar aos linfomas caninos as classificações de Kiel, Working Formulation e Fournel-Fleury, et al., (1994) em material colhido pelo método da PAAF (Punção Aspirativa por Agulha Fina). De acordo com a Classificação de Kiel, 61,02% (36 casos) das neoplasias se enquadram como de grau alto 38,98% (23 casos) como de grau baixo. Segundo a Classificação da Working Formulation, 11,86% (sete casos) foram classificados linfomas de grau baixo, 61,02% (36 casos) de grau intermediário e 27,12% (16 casos) de grau alto. Utilizando a classificação proposta por Fournel-Fleury et al. (1994), 38,98% (23 casos) dos animais que apresentaram linfomas de grau baixo e 61,02% (36 casos) de grau intermediário ou alto. Concluindo, a PAAF é um método de diagnóstico que pode ser empregado na classificação dos linfomas caninos. A classificação que mostrou melhores resultados foi a de Kiel, que tem por característica principal a ênfase nos achados citológicos.

Lymphoma is among the most frequent canine neoplasia and share many similarities with human non-Hodgkin’s lymphoma in respect of etiology, epidemiology, clinical, morphological and immunophenotipical aspects. Human classification schemes have been used in canine lymphoma. The aim of this work was apply Kiel, Working Formulation and Fournel-Fleury’s et al. (1994) classification in Fine Needle Aspiration (FNA) cytology matherial. According to Kiel scheme 61.02% (36 cases) were high-grade lymphomas and 38.98% (23 cases) low grade. The Working Formulation, showed 11.86% (7 cases) of low grade, 61.02% (36 cases) intermediary grade and 27.12% (16 cases) high grade. In Fournel-Fleury’s protocol revealed a predominance of high-grade lymphoma, with 61.02% (36 cases) over 38.98% (23 cases) of low grade. In conclusion, FNA can be used as a diagnostic method and in canine lymphoma cytological classification. Kiel’s system showed the best results, once is based on cytologic basis.

Leucemia linfocítica crônica em cão: relato de caso / Chronic lymphocitic leukemia in dog: case report

O presente relato refere-se a um caso de leucemia linfocítica crônica (LLC) diagnosticada no Hospital Veterinário da FMVZ - UNESP, Campus de Botucatu, em um cão da raça Doberman, fêmea, com nove anos e oito meses de idade que apresentava anorexia e histórico de dificuldade locomotora. Ao exame físico observou-se hepato e esplenomegalia. O diagnóstico foi baseado nos resultados do hemograma (hemácias: 2,4 x 106/mL; hemoglobina: 5,6g/dL; hematócrito: 16 por cento), linfocitose (40,1 x 103/mL) e trombocitopenia (32,5 x 103/mL) e no exame citológico da medula óssea onde se observou celularidade aumentada com hipoplasia severa das séries megacariocítica, mielóide e eritróide. A série linfóide apresentou-se marcadamente aumentada, sendo representada principalmente por linfócitos pequenos e médios e em menor grau por plasmócitos.

Chronic lymphocytic leukemia (CLL) was diagnosed in a 9-year-old-female Doberman Pinscher presented to the hospital of FMVZ - UNESP, Botucatu with anorexia and locomotion abnormalities. Clinical examination revealed hepato and splenomegaly. The diagnose was based on CBC results which showed anemia (RBC 2.4 x 106/mL; hemoglobin 5.6g/dL; PCV 16 percent), lymphocytosis (40.1 x 103/mL) and thrombocytopenia (32.5 x 103/mL) and in bone marrow evaluation which showed increased cellularity with severe myeloid, erythroid and megakaryocytic hypoplasia. The lymphoid series was marked increased, represented mainly by small and medium lymphocytes and occasional plasma cells.

Proliferação celular nos linfomas caninos / Cell proliferation in canine lymphoma

O estudo dos linfomas caninos além de abordar a classificação morfológica e imunofenotípica necessita ser ampliado para que se tenha a avaliação da cinética celular. Esta verificação só pode ser feita com segurança quando são avaliados os parâmetros que indicam a taxa de proliferação celular. No homem, estes fatores têm influência no prognóstico e no tratamento dos limfomas. Os 40 linfomas utilizados neste trabalho foram classificados de acordo com a classificação de Kiel e a imunofenotipagem utilizou CD3 (linfócitos T) e CD79a (linfócitos B). A proliferação celular foi avaliada pelos métodos de contagem dos AgNORs e Ki-67 (MIB-1) De acordo com a classificação de Kiel os linfomas de alto grau foram os mais freqüentes, a imunofenotipagem mostrou a mesma freqüência de linfomas T e B. Quando avaliada a proliferação celular houve diferença significativa entre os linfomas de alto e baixo grau tanto pelo método do AgNOR como do KI-67.(MIB-1), porém não foram estatisticamente entre os imunofenótipos Entre as neoplasias de alto grau de malignidade a média de número de NORs por núcleo de célula neoplásica foi de 1,37 ± 0,32, e nos casos de baixo grau de 0,98 ± 0,36, de acordo com o KI-67 a média do percentual de células positivas foi de 43,19% ± 19,01, e 14,09% ± 11,74 nos casos de alto e baixo grau, respectivamente.

Lymphoma studies deals with morphological classification and immunophenotypic features and they have to be amplified for cellular kinetics evaluation. This evaluation can only be safely made, when the proliferative index are evaluated. In men the proliferation index have, most of the time, important influence in the neoplasia prognosis and treatment In this work it was used 40 canine lymphomas that were classified according to Kiel methods and immunophenotype was achieved with CD3 (T lymphocyte) and CD79a (B lymphocyte). Cellular proliferation was evaluated by AgNORs and Ki-67 (MIB-1) According to Kiel classification system, high grade lymphomas were more frequent and T and B lymphoma showed the same frequency.When cellular proliferation was evaluated, there was a significant difference between high grade and low grade lymphomas by AgNOR and Ki-67 (MIB-1) methods, but did not differ when comparing immunophenotype. Among high grade malignancy lymphomas the NORs medium number per cell nucleoli was 1.37± 0.32 and in low grade was 0.98± 0.36, concerning Ki-67 the positive cellular percentual was 43.19% ± 19.01, e 14.09% ± 11.74 in high and low grade, respectively

O processo aterosclerótico em artérias de coelhos submetidos a dieta suplementada com gema de ovo: modelo experimental de baixo custo / Atherosclerotic lesion formation in rabbits fed on egg yolk-supplemented diet: an inexpensive experimental model

OBJETIVO: Verificar a aterogenicidade do modelo de hipercolesterolemia por suplementação alimentar com gema de ovo em coelhos e seu uso como modelo de aterosclerose experimental de baixo custo. MATERIAL E MÉTODO: Foram utilizados 14 coelhos divididos em dois grupos de sete animais: grupo controle (G1), que recebeu ração comercial ad libitum, e grupo tratado (G2), que foi alimentado com dieta suplementada com gema de ovo. Ambos os grupos foram alimentados por 90 dias. Foram realizadas dosagens do perfil lipídico dos animais nos momentos 0, 30, 60 e 90 dias. Ao término do período experimental, os animais foram submetidos a eutanásia e retirada da aorta e de seus ramos diretos para realização de estudo anatomopatológico. RESULTADOS Apenas no grupo G2 houve aumento significativo nos níveis de colesterol total e frações. Ao exame macroscópico, foram observadas estrias gordurosas no arco aórtico e aorta abdominal e, à microscopia, acúmulos lipídicos discretos na íntima da aorta abdominal, renal, carótida, transição toracoabdominal e femoral. Portanto, a dieta com gema de ovo provocou aterosclerose leve no animal de experimentação e alterações equivalentes àquelas provocadas pelo colesterol purificado comercial quando fornecido em baixa dosagem. Assim sendo, a gema de ovo pode ser utilizada como fonte de colesterol alimentar de baixo custo em modelos de aterosclerose experimental.

OBJECTIVE: To observe whether an inexpensive dietary-induced hypercholesterolemia model in rabbits using a chow diet supplemented with egg yolks can be used to develop atherosclerotic lesions in animals. MATERIAL AND METHOD: Fourteen rabbits were divided into two groups of seven animals: control group (G1), in which the rabbits were fed standard chow diet; and experimental group (G2), in which the rabbits were fed standard chow supplemented with egg yolks. Both groups were fed for 90 days. The lipid profile of all animals was measured at 0, 30, 60 and 90 days. At the end of the experimental period, euthanasia was performed and the aorta and its direct branches were excised to perform the histopathological examination. RESULTS: There was a significant increase in plasma total cholesterol and cholesterol fractions only in group G2. The macroscopic examination showed fatty streaks in the aortic arch and abdominal aorta. Histological analyses revealed minimal lesions consisting of macrophages foam cells in the abdominal, renal, carotid and diaphragmatic aorta and femoral arteries. Therefore, the egg yolk diet developed mild atherosclerosis in rabbits and induced the same characteristics and extent of the lesions obtained by low-dosage purified cholesterol. Thus, egg yolk can be used as an inexpensive source of cholesterol in models of experimental atherosclerosis.

Restabelecimento funcional do tendão extensor digital longo submetido a ressecção parcial em equinos: observação macroscópica, histopatológica e ultra-sonográfica / Functional restoration of the long digital extensor tendon in horses after partial tenectomy: gross, histopathologycal and ultrasonographic evaluation

Objetivou-se estudar os aspectos macroscópicos, ultra-sonográficos e histopatológicos do tecido neoformado no local da ressecção parcial do tendão extensor digital longo em 10 eqüinos, no momento do restabelecimento funcional do membro com o animal em locomoção à passo. O exame macroscópico foi realizado a cada 48 horas, o planimétrico das feridas a cada 10 dias, o ultra-sonográfico a cada 15 dias e o histopatológico no final do experimento. As feridas mostraram tecido de granulação em retração e exuberante, sem epitelização total, com aspectos ultra-sonográficos desorganizados diferentes do tendão íntegro e os exames histopatológicos revelaram tecido cicatricial em formação. O restabelecimento funcional médio foi de 45,9 dias, com o tecido neoformado na região da tenectomia permitindo o restabelecimento funcional do membro operado.

The objective of this work was to study the macroscopic, ultrasonographic and histopathologic aspects from the newly formed cicatricial tissue at the site of the partial resection of the long digital extensor tendon in 10 equines at the moment of functional restoration of the limb with the animal in walk locomotion. The macroscopic exam was performed every 48 hours, the planimetric mensuration every 10 days, the ultrasonographic exam every 15 days and the histopathologyc exam at the end of the study. The wounds showed granulation tissue in retraction, without total lesion epithelization, and the aspects ultrasonographics revealed wound healing with newly formed tissues with variable density and high neovascularization without tendon structural reorganization. The histopathology showed newly formed vascularized tissue, with leukocytic infiltrate and collagenous deposition without full epithelization. The cicatrization tissue formed in the resection region of the tendon, immature and without the structural organization of the normal tendon, showed to be able to functional restoration of the operated limb.

Morphological and biomechanical study of abdominal aorta of rats submitted to experimental chronic alcoholism

OBJETIVO: avaliar a influência do alcoolismo crônico experimental na morfologia e biomecânica da artéria aorta de ratos. MÉTODOS:ratos Wistar foram divididos em dois grupos de 22 animais. Grupo alcoolista: os ratos receberam água com concentração crescente de etanol e ração ad libitum durante 6 meses. Grupo controle: os animais receberam água e ração ad libitum pelo mesmo período. Os animais foram sacrificados com overdose de pentobarbital e as aortas abdominais foram excisadas para realização de histologia (hematoxilina-eosina, tricrômio de Masson, Calleja, Picrosirius red), histomorfometria e avaliação biomecânica (carga máxima, alongamento na carga máxima, limite de proporcionalidade, alongamento no limite de proporcionalidade e coeficiente de rigidez). RESULTADOS: A histologia e a histomorfometria não mostraram diferenças significantes na morfologia da aorta em ambos os grupos. A avaliação biomecânica mostrou aumento do alongamento no limite de proporcionalidade no grupo alcoolista (p<0.05). CONCLUSÃO: o alcoolismo crônico experimental não provocou alterações morfológicas na parede da aorta, mas causou aumento da sua elasticidade, sem modificar as outras propriedades mecânicas avaliadas.

Uso da cola n-butil cianoacrilato na sulcoplastia de recessäo em coelhos: avaliaçäo histológica / Use of n-butyl cyanoacrylate glue in the recession sulcoplasty in rabbits: histologic study

O trabalho teve por objetivos analisar a cola composta por n-butil cianoacrilato, como um auxiliar na fixaçäo da cunha óssea no procedimento da sulcoplastia de recessäo e sua interferência no processo cicatricial. Foram utilizados nove coelhos da raça Norfolk, machos, com peso inicial entre 3,0 e 3,5 kg. Após anestesia epidural, realizou-se acesso parapatelar medial e seccionou-se uma cunha ósseo-cartilaginosa em formato de V no sulco da tróclea. No joelho direito, antes da colocaçäo da cunha em seu leito, foram aplicadas duas gotas da cola, ao passo que, no joelho esquerdo, considerado controle, a cunha foi apenas recolocada. Para realizaçäo da técnica de exame anatomopatológico, foram submetidos à eutanásia três animais aos cinco, 15 e 30 dias de pós-operatório. Na avaliaçäo macroscópica, notou-se, em ambos os joelhos, a estabilizaçäo da cunha ósseo-cartilaginosa em seu leito receptor nos diferentes momentos de observaçäo. Pelo exame histológico foi possível concluir que a cola näo induziu o aparecimento de processo inflamatório acentuado e reaçäo do tipo corpo estranho, mas interferiu negativamente, retardando o processo cicatricial.

Avaliação de dois modelos experimentais de isquemia e reperfusão cerebral em ratos com oclusão temporária carotídea associada ou não à oclusão vertebral / Evaluation of two brain ischemia and reperfusion experimental models in rats with carotid temporary occlusion associated or not to vertebral occlusion

OBJETIVO: Avaliar a reprodutibilidade de dois modelos experimentais de isquemia e reperfusão cerebral. MÉTODOS: 60 ratos foram distribuídos, aleatoriamente, em três grupos experimentais, com 20 animais cada: I - pinçamento temporário de artéria carótida esquerda; II - cauterização prévia das artérias vertebrais e pinçamento temporário da artéria carótida esquerda; simulado - sem isquemia nem reperfusão. Todos os animais tiveram oclusão definitiva de artéria carótida direita e os três grupos foram subdivididos em dois períodos de reperfusão: A - 60 minutos e B - 120 minutos. Os parâmetros verificados foram: medidas de pressão arterial média sistêmica e fluxo sangüíneo carotídeo; medida de malondialdeído cerebral através do teste TBARS e avaliação histológica do hemisfério cerebral submetido à isquemia e reperfusão. Foi feito também um estudo complementar com angiografia cerebral em 5 animais adicionais. RESULTADOS: Não houve diferenças significativas nas dosagens de malondialdeído cerebral e na freqüência e gravidade das alterações histológicas cerebrais entre os três grupos. Nos grupos GI e GII, a PAM foi significantemente maior no período de isquemia. O fluxo sangüíneo entre os períodos pré e pós-pinçamento aumentou nos grupos IA e IIB, diminuiu no grupo IB e no grupo IIA manteve-se inalterado. As angiografias do estudo complementar mostraram aporte sangüíneo para cérebro através de circulação colateral. CONCLUSAO: Os modelos de isquemia e reperfusão estudados não demonstraram alterações consistentes de marcadores de lesão cerebral, seja quanto à produção de lipoperóxidos ou de lesões histológicas.

Açäo do ácido trissódio-cálcio-dietileno-triaminopentaacético (CaNa3DTPA) nas lesões de isquemia-reperfusäo em membro posterior de rato / Action of the CaNa3DTPA on ischemia-reperfusion lesions in the hindlimb of rats

OBJETIVO: Açäo do ácido trissódio-cálcio-dietileno-triaminopentaacético (CaNa3DTPA), quelante de ferro com açäo ainda anti-viral, antiinflamatória e imunológica, na atenuaçäo de lesões de reperfusäo em músculos esqueléticos de ratos. MÉTODOS: 52 ratos Wistar, pesando 188±22g, foram anestesiados e submetidos a semi-amputaçäo de membro posterior direito (MPD), poupando-se o fêmur, artéria e veia femorais. Foram entäo randomizados e distribuídos: G1-CTAN - controle anestesia, sem cirurgia e sem isquemia; G2-CTCIR - controle cirurgia, sem isquemia; G3-IRCT e G3-IRDTPA - com isquemia (4 hora) e reperfusäo ( 2 horas). O G3-IRCT foi tratado, ao final da isquemia, com cloreto de sódio 0,9 por cento e G3-IRDTPA com (CaNa3DTPA).Parâmetros: Circunferência do pé direito e peso do rato, dosagem sérica de CPK, dosagem de malonaldeído e microscopia óptica de músculos soleus bilateral. RESULTADOS: Aumento da circunferência nos G3-IRCT e G3-IRDTPA (significante no G3-IRCT quando comparado ao G1-CTAN); CPK elevado nos G3-IRCT e G3-IRDTPA comparados aos controles; MDA mais alto no membro contralateral do G3-IRDTPA, comparado ao MPD do G3-IRDTPA e ao G1-CTAN; maior edema intersticial em G3-IRCT, maior infiltrado inflamatório em G3-IRDTPA e recuperaçäo dos níveis de glicogênio semelhantes em G3-IRCT e G3-IRDTPA. CONCLUSÃO: Apesar do menor edema no G3-IRDTPA comparado ao G3-IRCT, o CaNa3DTPA näo alterou CPK sérico, MDA muscular e morfologia muscular dos animais.

Estudo da açäo do extrato de Ginkgo biloba e amido hidroxietílico hipertônico na atenuaçäo de alteraçöes decorrentes de isquemia e reperfusäo de órgäos esplâncnicos em ratos / Study of action of Ginkgo biloba extract and hypertonic hydroxyethyl starch on attenuating of ischemia and reperfusion changes of splanchnic organs in rats

A oclusäo e reperfusäo das artérias esplâncnicas ocasiona choque circulatório, causado principalmente pelo aumento de permeabilidade vascular e pela agressäo celular provocada por radicais livres derivados do oxigênio. Este estudo tem por finalidade verificar a açäo do extrato de Ginkgo biloba (Egb-761) e do amido hidroxietílico (AHH) na prevençäo do choque circulatório produzido pela isquemia e reperfusäo de órgäos esplâncnicos. O Egb-761 tem propriedades antioxidantes relatadas na literatura. O AHH, tem sido utilizado como recurso terapêutico do choque hipovolêmico. Ratos anestesiados receberam infusäo contínua de Egb-761 ou AHH, sendo submetidos à isquemia (oclusäo do tronco celíaco, artéria mesentérica superior e artéria mesentérica inferior por 30 minutos) e reperfusäo (por 90 minutos) dos órgäos esplâncnicos. Foram feitas: análise histopatológica ileal, dosagem de malondialdeído ileal e determinaçäo contínua da pressäo arterial média (PAM). A PAM ao final do período de reperfusäo foi significativamente mais elevada nos animais tratados com Egb-761 e AHH, que no grupo controle (F=18,29; p<0,001). Näo houve diferença entre os grupos tratados e controle quanto à dosagem de MDA (H=4,61; p>0,10) e quanto às alteraçöes histológicas (H=6,003; p>0,10). Em conclusäo, houve melhora nas condiçöes hemodinâmicas, com atenuaçäo do choque nos ratos que receberam Egb-761 ou AHH. Novos estudos seräo necessários para se avaliar melhor as alteraçöes histológicas e para esclarecer a formaçäo de produtos finais da peroxidaçäo lipídica.

Wound healing and colon carcinogenesis: enhancing effects of skin wounding on development of colon tumors induced by 1, 2 Dimethylhydrazine in the rat

This study demonstrates the tumor promoting effect at a distant site of skin wounding, in a model of colon carcinogenesis induced by 1,2 dimethylhydrazine (DMH) in the rat. Six-week-old male Wistar rats were given subcutaneous injections of DMH, 20mg/kg, or saline, once a week, for eight weeks. One week after the last DMH injection the animals received a full thickness skin wound in their dorsal skin and the wound was left open to heal by second intention. Control and DMH-treated rats, with or without skin wounds were killed at the 12th week, just after healing of the skin wound was complete. The colons were removed and divided into proximal and distal parts. Each segment was rolled as "Swiss roll"and processed for histology. The incidence, distribution and morphology of the colon tumors was recorded. The total number of tumors in the colonic mucosa and the number of tumors per rat was significantly higher in the skin-wounding DMH- treated group than in the unwounded group. In the histopathological analysis of the colon the number of poorly differentiated mucin-secreting carcinomas was 6-fold in the skin-wounding DMH-treated group than in the unwounded group and the majority of tumors were located near to lymphoid aggregates. The present results suggest that wound healing enhances tumor development at a distant site, such as the colon, and this effect seems to be related to tumor histology.

Timoma em cäo. Relato de caso / Thymoma in the dog. Case report

Uma cadela, Dachshund, quatro anos, foi encaminhada ao H.V. da FMVZ-UNESP-Botucatu-SP com histórico de prostraçäo, emagrecimento progressivo, anorexia, cansaço e tosse seca. Ao exame clínico observou-se apatia, secreçäo nasal serosa bilateral e dispnéia intensa. Radiografia torácica demonstrou efusäo pleural, edema pulmonar acentuado, desvio dorsal da traquéia e possível massa mediastinal. A ultra-sonografia, após drenagem torácica, confirmou a presença de massa mediastinal, sendo classificada como neoplasia maligna de origem epitelial pela citologia aspirativa por agulha fina. O animal veio a óbito logo após o diagnóstico de neoplasia. A necropsia constatou-se massa mediastinal encapsulada, consistência macia e superfície de corte com coloraçäo branco-acinzentada e áreas necrótico-hemorrágicas, localizada na regiao ântero-ventral do tórax. O exame histopatológico demonstrou células epiteliais neoplásicas, células linfóides (timócitos) com morfologia normal, vasos sangüíneos de pequeno e médio calibre, formaçöes císticas com conteúdo eosinofílico e corpúsculos de Hassall. A imunohistoquímica apresentou positividade para citoqueratina AE1/AE3 e UCHL, confirmando o diagnóstico de timoma